É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Um instrumento ultra-sônico para condução nervosa bloquear em modelos de ratos diabéticos

7.3K visualizações

DOI:

10.3791/55675

20 de outubro de 2017

Neste artigo

Resumo

Este trabalho apresenta a metodologia de aplicação de alta intensidade com foco ultra-som para bloquear os potenciais de ação dos nervos neuropáticas diabéticos.

Resumo

Bloqueio de condução do nervo com um transdutor de ultra-som centradas em intensidade elevada (HIFU) tem sido realizado recentemente em modelos animais diabéticos e normais. HIFU reversível pode bloquear a condução dos nervos periféricos sem danificar os nervos, enquanto usando um parâmetro apropriado ultra-sônico. Bloco parcial e temporário dos potenciais de ação dos nervos mostra que HIFU tem potencial para ser um tratamento clínico útil para alívio da dor. Este trabalho demonstra os procedimentos para suprimir os potenciais de ação dos nervos neuropáticas em ratos diabéticos na vivo usando um transdutor HIFU. O primeiro passo é gerar ratos neuropáticas diabéticos macho adulto por injeção de estreptozotocina (STZ). O segundo passo é avaliar a neuropatia diabética periférica em ratos diabéticos induzido por STZ por uma sonda de von Frey eletrônico e um prato quente. A etapa final é recorde na vivo extracelular potenciais de ação do nervo exposto a sonication HIFU. O método mostrou aqui pode beneficiar o estudo das aplicações analgésicas de ultra-som.

Introdução

Medicações orais, acupuntura1, e de estimulação elétrica nervosa2 têm sido utilizados para o tratamento da polineuropatia diabética dolorosa. No entanto, os efeitos secundários dos medicamentos orais, operação invasiva de acupuntura e estimulação elétrica nervosa dificultam a eficácia terapêutica e aderência do paciente. Bloco de ultra-som de nervos periféricos em modelos animais foi investigado por décadas3,4,5. A condução de em vitro nervos ciático do grande sapo verde foi inibida reversível após o tratamento de pulso....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

o cuidado Animal institucional e uso Comitê dos institutos nacionais de pesquisa de saúde em Taiwan aprovaram todos os protocolos animais.

1. indução de modelo diabético no masculino adulto Sprague - Dawley (SD) ratos

  1. remover pelotas de comida de rato da gaiola para ratos de SD rápido macho (300-350 g) para 6 h antes da indução de STZ.
  2. Buffer de
  3. preparar citrato de sódio (0,1 M, pH 4.5).
    1. Dissolver 1,05 g ácido cítrico monoidratado (C 6 H 8 O 7 · H 2 O; Astyanax peso 210.14) em 50 mL de água para fazer uma solução de ácido cítrico 0,1 M destilada.
    2. Dissolver....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

O estudo na vivo demonstrou que, com uma dose HIFU de 3 sonication s em uma intensidade de 2.810 W/cm2, os CMAPs foram suprimidos por 20% da linha de base, mas eles foram completamente recuperados após 30 min (Figura 2A, diamantes) e foram quase constante no período de 28 dias (Figura 2B, diamantes). Para a exposição HIFU de s 5 na mesma intensidade, os CMAPs diminuíram para 65,4% (9,5%) da linha de base em 4 .......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Supressão parcial e temporária de action potentials dos nervos neuropáticas de ratos diabéticos na vivo e ocorrência instantânea do efeito de bloqueio após o tratamento de HIFU, que ambos foram observados. O estudo de acompanhamento de 28 dias na CMAPs demonstrou que um bloqueio seguro de condução do nervo pode efectuar-se em uma exposição adequada de HIFU. Como resultado, o protocolo acima do tratamento HIFU pode fornecer uma solução alternativa para o bloqueio reversível da condução dos nervos isquiático em ra.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Os autores não têm nada para divulgar.

Agradecimentos

O estudo foi apoiado pelo Ministério da ciência e tecnologia (projeto mais 105-2221-E-400-001) e os institutos nacionais de saúde pesquisa (projeto BN-105-PP-10), Taiwan.

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
estreptozotocinaSigma85882
ácido cítrico monohidratado SigmaC1909
di-hidratadoMedidoresde glicose Sigma W302600
Roche Accu-Check ActiveGC
IITC Placa quente de ciências da vida2390
IITC Life Science
Biopac MP36 BiopacSystems, Inc.
Transdutor HIFUSonic ConceptsH108
gerador de funçãoAgilent33250A
amplificador de potênciaEletrônica & Ratos Innovation1040L
Biolasco taiwanSprague-Dawley
Puralube pomada veterináriaDechra
vaporizador de isofluranoParkland ScientificV3000PS
IsofluranceAttane
Saco de contenção (Decapicones)Braintree ScientificDC 200
Citrato trissódico Dispositivo eletrônico de von Frey Sistema de aquisição

Referências

  1. Abuaisha, B. B., Costanzi, J. B., Boulton, A. J. Acupuncture for the treatment of chronic painful peripheral diabetic neuropathy: A long-term study. Diabetes Res Clin Pract. 39 (2), 115-121 (1998).
  2. Hamza, M. A., et al.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Etiquetas

Ultrassom Focalizado de Alta IntensidadeNervo PeriféricoAquisição de EletrofisiologiaTransdutor de HIFUInjeção de EstreptozotocinaVon Frey EletrônicoPotenciais de Ação Muscular CompostosParâmetro Ultrassônico