Técnica de constrição da aorta minimamente invasiva transversal em camundongos para indução de Hipertrofia Ventricular Esquerda

Reza Tavakoli; Simona Nemska; Peiman Jamshidi; Max Gassmann; Nelly Frossard

doi:10.3791/56231

É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Técnica de constrição da aorta minimamente invasiva transversal em camundongos para indução de Hipertrofia Ventricular Esquerda

24.9K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/56231

⸱

25 de setembro de 2017

Reza Tavakoli¹ , Simona Nemska¹^,² , Peiman Jamshidi³ , Max Gassmann¹ , Nelly Frossard²

¹Institute of Veterinary Physiology and Zurich Center for Integrative Human Physiology (ZIHP), University of Zurich, ²Laboratoire d'Innovation Thérapeutique, UMR7200, Université de Strasbourg - CNRS, ³Department of Cardiology, Canton Hospital Lucerne

Neste artigo

Resumo

O objectivo do presente protocolo é descrever passo a passo a técnica de constrição da aorta transversa minimamente invasiva (TAC) em camundongos. Pela eliminação de intubação e ventilação que são obrigatórios para o procedimento padrão comumente usado, TAC minimamente invasiva simplifica o procedimento operatório e reduz o esforço de colocar o animal.

Resumo

Constrição da aorta transversa (TAC) em camundongos é dentre as técnicas cirúrgicas mais utilizadas para a investigação experimental de pressão induzida por sobrecarga esquerda hipertrofia ventricular (HVE) e sua progressão para insuficiência cardíaca. Na maioria dos inquéritos relatados, este procedimento é realizado com intubação e ventilação do animal que torna exigente e demorado e contribui para a carga cirúrgica para o animal. O objectivo do presente protocolo é descrever uma técnica simplificada de TAC minimamente invasiva sem intubação e ventilação dos ratos. Passos críticos da técnica são enfatizados para atingir baixa mortalidade e alta eficiência na indução de hve.

Camundongos C57BL/6 do sexo masculino (10 semanas, 25-30 g, n = 60) foram anestesiados com uma única injeção intraperitoneal de uma mistura de ketamina e xilazina. Em um respirar espontaneamente animais seguindo uma esternotomia parcial superior de 3 a 4 mm, um segmento de 6/0 de sutura seda enfiada através do olho de uma ajuda de ligadura foi aprovado sob o arco aórtico e amarrado com uma agulha de calibre 27 embotada. Animais com operação submeteu-se a mesma preparação cirúrgica mas sem constrição da aorta. A eficácia do procedimento na indução de hve é atestada por um aumento significativo na proporção de peso de corpo/coração. Esta proporção é obtida no dias 3, 7, 14 e 28 após a cirurgia (n = 6-10 em cada grupo e cada ponto de tempo). Usando a nossa técnica, hve é observada em TAC comparado com animais, farsa do dia 7 até dia 28. Operativa e tardia (mais de 28 dias) mortalidades são ambos muito baixa em 1,7%.

Em conclusão, nossa técnica econômica de TAC minimamente invasiva em camundongos carrega muito baixa mortalidade operatória e pós-operatório e é altamente eficiente na indução de hve. Simplifica o procedimento operatório e reduz o esforço de colocar o animal. Pode ser facilmente realizada seguindo os passos críticos descritos neste protocolo.

Introdução

Nos últimos anos, o estudo de insuficiência cardíaca tem sido conduzido em animal viável modelos¹. Comparado a grandes modelos animais de insuficiência cardíaca, pequenos modelos animais tem inúmeras vantagens potenciais. Além de reduzir os custos de habitação e manutenção modelos animais pequenos são acessíveis aos investigadores mais devido a menos complexas instalações necessárias².

Modelos de mouse insuficiência cardíaca oferecem muitas das mesmas vantagens que os modelos do rato. Além disso, reduzida a carcaça custa³, modelos do rato beneficiam a disponibilidade de....