Artigo de método
Este protocolo descreve uma armação cirúrgica para um soquete de eletrodo sub-fascial permanente e um eletrodo implantado no peito em roedores. Colocando um segundo eletrodo na tomada, diferentes tipos de estimulação elétrica do cérebro de transcraniana podem ser entregue para o sistema motor em animais alertas através do crânio intacto.
Estimulação elétrica do cérebro de transcraniana pode modular a excitabilidade cortical e plasticidade em humanos e roedores. A forma mais comum de estimulação em seres humanos é a estimulação transcraniana de corrente contínua (tDCS). Menos frequentemente, estimulação transcraniana de corrente alternada (TAC) ou estimulação transcraniana de ruído aleatório (tRNS), uma forma específica de TAC usando uma corrente elétrica aplicada aleatoriamente dentro de um intervalo de frequência pré-definidos, é usada. O aumento da investigação de estimulação cerebral elétrica não invasiva em seres humanos, tanto para fins experimentais e clínicos, resultou em uma maior necessidade de estudos de segurança básico, mecanicista, em animais. Este artigo descreve um modelo para estimulação elétrica do cérebro de transcraniana (tES) através do crânio intacto como alvo o sistema motor em roedores alertas. O protocolo fornece instruções passo a passo para a instalação cirúrgica de um soquete de eletrodo permanente sub-fascial combinado com um eletrodo contador implantado no peito. Colocando um eletrodo de estimulação na tomada sub-fascial, tipos diferentes de estimulação elétrica, comparáveis a tDCS, TAC e tRNS em humanos, podem ser entregue. Além disso, os passos práticos para tES em alertas roedores são introduzidos. A densidade de corrente aplicada, estimulação duração e tipo de estimulação podem ser escolhidos dependendo das necessidades de experimentais. As advertências, vantagens e desvantagens desta montagem são discutidas, assim como aspectos de tolerabilidade e segurança.
A administração de transcraniana de correntes elétricas para o cérebro (tES) tem sido usada por décadas para estudar a função do cérebro e para modificar o comportamento. Mais recentemente, a aplicação direta de correntes, ou menos frequentemente correntes alternas (TAC e tRNS), canaliza através do crânio intacto pelo uso de dois ou mais eletrodos (anode(s) e cathode(s)) ganhou interesse científico e clínico. Em particular, tDCS tem sido utilizado em mais de 33.200 sessões em indivíduos saudáveis e pacientes com doenças neuropsiquiátricas e emergiu como um seguro e fácil, econômica aplicação de cabeceira, com possível potencial terapêutico, bem como de longa duração e....
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para pesquisa envolvendo animais, as aprovações (específico do país) relevantes devem ser obtidas antes de iniciar os experimentos. Todas as experiências com animais aqui relatadas são executadas de acordo com a Directiva 2010/63/UE, a lei de proteção animal alemão atualizado (" Tierschutzgesetz ") de julho de 2013 e os regulamentos de atualizada pesquisa animal alemã de agosto de 2013. Protocolos de animais que tenham sido aprovados pelas autoridades locais " Comissão para a experimentação Animal do Conselho Regional da cidade de Freiburg " e " Comissão para a experimentação Animal da Universidade Medical Center Freiburg ".
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A implementação descrita de uma armação para confiável tES repetidas em roedores alertas pode ser facilmente integrada em experimentos mecanicistas, estudos de dose-resposta ou experimentos incluindo tarefas comportamentais. Até à data, a comparabilidade dos dados de estudos com animais usando tES (não invasivo) é dificultada pela variabilidade de tES instantâneas estimulação entre laboratórios e por diferenças nos parâmetros de estimulação (por exemplo, várias densidades de corr.......
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Este protocolo descreve materiais típicos e etapas do procedimento cirúrgica realização de uma configuração de tES permanentes, bem como para estimulação subsequente em roedores alertas. Durante a preparação de um roedor tES experimentar, vários aspectos metodológicos (segurança e tolerabilidade de tES, parâmetro de resultado), bem como aspectos conceituais (comparabilidade com a condição humana, os efeitos previstos da estimulação em um cérebro particular região) precisam ser levados em conta. Do ponto de vista metodoló.......
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Os autores não têm nada para divulgar.
Este trabalho foi financiado pela Fundação de pesquisa alemã (DFG RE 2740/3-1). Agradecemos Frank Huethe e Thomas Günther a produção interna do set-up feito por tES e DC-estimulador.
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Softasept N | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Deutschland | 3887138 | agente anti-séptico |
| Etanol 70 % | Carl Roth GmbH & Co. KG, Karlsruhe, Deutschland | T913.1 | |
| pinça de ponta arqueada | FST Ferramentas de ciência fina, Heidelberg, Deutschland | 11071-10 | |
| pinça de íris, 10cm, reta, serrilhada | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 15914 | |
| Cabo de bisturi #3, 13cm | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 500236 | |
| Lâmina de bisturi padrão #10 | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, USA, Inc, Sarasota, FL, USA | 500239 | |
| Cotonetes de celulose Zelletten | Lohmann und Rauscher, Neuwied, Deutschland | 13349 | 5 x 4 cm |
| Isoflurano | AbbVie Deutschland GmbH & Tesoura | Co N01AB06 | |
| , 11,5 cm, reta | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, EUA, Inc, Sarasota, FL, EUA | 501758 | tesoura pequena |
| cotonete/cotonetes | Carl Roth GmbH & Co. KG, Karlsruhe, Deutschland | EH12.1 | Rotilabo |
| Kelly, 14 cm, reta | World Precision Instruments, Inc, Sarasota, FL, EUA, Inc, Sarasota, FL, EUA | 501241 | de grampo cirúrgico |
| (platina) | Wissenschaftliche Werkstatt Neurozentrum Uniklinik Freiburg, Deutschland | 10x6 mm, 0,15 mm | |
| de espessura fios de cobre isolados (~1 mm de diâmetro) | Reichelt elektronik GmbH & Co. KG, Sande, Alemanha | Cabo de eletrodo | LITZE BL |
| Weller EC 2002 M estação de solda | Weller Tools GmbH, Besigheim, Alemanha | ||
| Iso-Core EL 0,5 mm | FELDER GMBH Lö ttechnik, Oberhausen, Deutschland | 20970510 | solda sem chumbo |
| MERSILENE Sutura de fibra de poliéster | Johnson & Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Alemanha | R871H | sutura trançada não absorvível, 4-0 |
| Histoacryl | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Deutschland | 9381104 | cianoacrilato |
| Ketamin 10% | Medistar GmbH, Alemanha | n/a | anestésicos |
| Rompun 2% (Xilazina) | Bayer GmbH, Alemanha | n/a | anestésicos |
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