Aqui apresentamos uma combinação de perfusão de Doppler laser de imagem (LDPI) e do laser Doppler perfusão monitoramento (LDPM) para medir spinal cord fluxos de sangue local e saturação de oxigênio (SO2), bem como um procedimento padronizado para a introdução da medula espinhal trauma no rato.
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Artigo de método
Usando Laser Doppler Imaging e acompanhamento para analisar a microcirculação na medula espinhal em ratos
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Laser Doppler flowmetry (LDF) é um método não invasivo para a medição de vazão (BF) de sangue, que o torna preferível para medir microcirculatory alterações da medula espinhal. Neste artigo, nosso objetivo era usar imagem Laser Doppler e monitoramento para analisar a mudança de BF após lesão medular. Tanto o scanner de imagem Doppler laser e o sonda/monitor foram sendo empregadas para obter cada leitura. Os dados de LDPI fornecido uma distribuição local de BF, que deu uma visão geral de perfusão em torno do local da lesão e acessível para a análise comparativa de BF entre diferentes locais. Medindo-se intensamente a área de sondagem durante um período de tempo, uma sonda combinada foi usada para medir simultaneamente a saturação BF e oxigênio da medula espinhal, mostrando a perfusão global da medula espinhal e o suprimento de oxigênio. LDF em si tem algumas limitações, tais como fluxo relativo, sensibilidade ao movimento e zero biológico do sinal. No entanto, a tecnologia foi aplicada no estudo clínico e experimental, devido à sua configuração simples e rápida medição de BF.
Introdução
O tecido da medula espinhal é altamente vascularizado e extremamente sensível à hipóxia induzida pela lesão da medula espinhal (SCI). Nossos estudos anteriores mostraram que o fluxo de sangue da medula espinhal foi diminuiu significativamente após a concussão lesão1,2, que pode estar relacionado com o défice de função motora. Estudos recentes têm mostrado que a integridade dos vasos sanguíneos, seguindo SCI é bem correlacionada com a melhoria da função motora sensorial3. Tem sido relatado que a vascularização melhorada pode resgatar matéria branca, indiretamente, levando à melhoria da f....
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Protocolo
Animais protocolos envolvendo animais experimentais seguiram as diretrizes estabelecidas pelo National Institutes of Health (NIH) e foram aprovados pelo Comitê de uso de Capital médica Universidade e cuidado Animal.
Os procedimentos de introdução de SCI e medição BF da medula espinhal, usando laser Doppler equipamentos descritos abaixo foram usados em um estudo publicado1.
1. preparação para a cirurgia
- Preparar o pentobarbital de sódio solução 3% (p/v) em solução salina e administrar a dose de 35 mg/kg.
Cuidado: pentobarbital de sódio é uma substância controlada. Devem ser man....
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Resultados
LDPI foi usado para medir o BF na medula espinhal, que foi quantificada no eixo rostral-caudal da medula espinhal, extraindo perfis lineares (Figura 4). Figura 5A e Figura 5B representam a imagem de fluxo da medula espinhal do grupo farsa e grupo SCI, respectivamente. Figura 5 e Figura 5 representam o BF alterando ao longo do eixo rostral-ca.......
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Discussão
Alguns detalhes devem ser notados ao realizar este protocolo. Em primeiro lugar, o processo de anestesia e cirurgia deve ser realizado tão rapidamente e elegantemente quanto possível para minimizar o stress introduzido ao animal. Para reduzir os resultados de perturbações, manter o animal em um Estado relativamente Pacífico e estável. Em segundo lugar, deveria prestar mais atenção ao sangramento durante a medição usando laser Doppler equipamentos, desde que o sangue poderia potencialmente interferir com a leitura. Finalm.......
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Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Os autores têm sem agradecimentos.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Scanner de linha Doppler a laser | Moor Instruments | moorLDLS2 | |
| Monitor Doppler a laser | Moor Instruments | moorVMS-LDF | |
| Sonda para monitor | Moor Instruments | VP3 | Sonda de entrega de ponta de agulha romba |
| Sistemas | e instrumentação de precisão | Impactor IH-0400 | |
| Fenobarbital sódico | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Buprenorfina | Sigma-Aldrich | B-908 | |
| Seringa | Becton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd | 300841 | |
| Agulhas de sutura cirúrgica com rosca | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 18T0329 (número do lote) / 4-0 | |
| Fábrica de instrumentos de operação de bisturi da Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J11030 4 # | ||
| Scalpel blade | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J12130 20 # | |
| fórceps oftálmico | Operação instrumento fábrica de Xangai Medical Instrument Co., Ltd. | JD1040 | |
| de operação de fórceps hemostático | da Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J31050 | |
| Penicilina benzílica sódica | North China Pharmaceutical Co., Ltd | F6072116 (número do lote) | |
| 75% álcool | Dezhou Anjie Gaoke produtos de desinfecção Co., Ltd | 150421R (número do lote) | |
| Iodo | Shandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd | 20170102 (número do lote) | |
| Rat Laboratory Animal Center, The Academy of Millitery Medical Ciências | Sprague-Dawly (linhagem de ratos) |
Referências
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Meliorating microcirculatory with melatonin in rat model of spinal cord injury using laser Doppler flowmetry. Neuroreport. 27 (17), 1248-1255 (2016).
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H.
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Reimpressões e permissões
