A avaliação precisa da resposta de dor em um modelo animal neuropática é crítica para investigar a fisiopatologia das doenças dor e desenvolver novos analgésicos. Apresentamos um método sensível e objetivo para determinar a função sensorial do roedor hind pata por um sistema de análise de marcha automática.
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Artigo de método
Análise de marcha automatizados em ratos com lesão crônica de constrição
Neste artigo
Resumo
Resumo
O teste de von Frey é um método clássico que tem sido amplamente utilizado para examinar a função sensorial dos animais de dor neuropática. No entanto, tem algumas desvantagens, tais como dados subjetivos e a exigência de um experimentador hábil, experiente. Até à data, uma variedade de modificações melhoraram o método de von Frey, mas ainda tem algumas limitações. Relatórios recentes têm sugerido que a análise da marcha produz dados mais precisos e objectivos dos animais neuropáticas. Este protocolo demonstra como realizar a análise de marcha automática para determinar o grau de dor neuropática em ratos. Após vários dias de aclimatação, os ratos foram autorizados a andar livremente sobre o piso de vidro para iluminar as pegadas. Em seguida, quantificação das pegadas e da marcha foram realizadas através de clips de vídeo com análise automática de vários parâmetros ambulante, como área de pata tempo impressão, balanço, ângulo da pata, etc.
O principal objetivo deste estudo é descrever a metodologia de análise de marcha automática e brevemente compará-lo com os dados do teste sensorial clássico usando filamentos de von Frey.
Introdução
As alterações patológicas do sistema nervoso induzidos por trauma, disfunção metabólica, inflamação, infecção, isquemia, ou doença auto-imune, ocasionalmente, resultar em dor neuropática, que é definida como uma dor que surjam como consequência directa de uma lesão ou doença afetando o sistema somatossensorial1. A dor neuropática é geralmente insuportável e infelizmente, analgésicos convencionais geralmente não produzem suficiente alívio de dor2. Das principais características da dor neuropática contém espontâneas e evocado por estimulação dores (i.e., alodinia e hiperalgesia). Alodinia é uma resposta nociceptiv....
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Protocolo
todos os experimentos foram conduzidos em conformidade com as diretrizes éticas da Associação Internacional para o estudo da dor e foram aprovados pelo Comitê de uso e cuidado de Animal institucional com a Universidade Nacional de Chungnam ( Daejeon, Coreia do Sul).
1. indução da ICC no nervo ciático
- casa ICR camundongos machos pesando 20-25 g sob um ciclo claro/escuro de 12 h à temperatura ambiente controlada (mantida a 20-25 ° C) e humidade (40-60%), com livre acesso à comida e água. Permitir um período de aclimatação para os ratos na sala de cuidados com animais de pelo menos 1 semana antes da cirurgia.
- ....
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Resultados
Nós temos realizado o teste de von Frey e automatizado de análise de marcha em camundongos CCI até 10 dias após a cirurgia da ICC. Para análise estatística, medidas repetidas de duas vias de análise de variância (ANOVA) determina os efeitos globais e análise post-hoc de Dunnett foi realizada para determinar o valor de p entre os grupos experimentais.
Os resultados mostrados na Figura 1 indi.......
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Discussão
Atualmente, a medição de alodinia mecânica por meio de filamentos de von Frey é o mais amplamente utilizado método em modelos animais de dor para demonstrar a hipersensibilidade tátil. Como modelos animais de dor neuropática continuaram a ser desenvolvidos, a metodologia de avaliação de função sensorial tem sido também melhorou8,9,10,15. Esses relatórios, tem sido sugerido que essas modificaçõe.......
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Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Esta pesquisa foi apoiada pelo Chungnam University, Coreia Instituto Nacional de Medicina Oriental (KIOM) e uma subvenção da Coreia saúde tecnologia R & D o projeto através da Coreia saúde indústria desenvolvimento Institute (KHIDI), financiado pelo Ministério da saúde & Bem-estar, República da Coreia (número de concessão: HI15C0007).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 0,9% de solução salina | JW Pharmaceutical | N / A | Veículo para drogas |
| seringa de 1 ml | BD Plastipak | 300013 | Dispositivo de injeção |
| 2, 2, 2-tribromoetanol (97% de pureza) | Sigma | T48402 | Anestésico |
| 2-metil-2-butanol (99% de pureza) | Sigma | 152463 | Solvente para 2, 2, 2-tribromoetanol |
| Catwalk Sistema automatizado de análise de marcha | Noldus | N/A | Software de análise automática de marcha aniaml |
| Catgut crômico (4-0 espessura) | AILEE | C442 | Ligadura para fazer lesão de constrição crônica no nervo ciático |
| Gabapentina | Sigma | Y0001280 | Analgeisc, Usado como uma droga de controle positivo neste estudo |
| Graefe Forceps | FST | 11051-10 | |
| Almofada de aquecimento | DAESHIN ELECTRONICS | M-303AT | Regulação da temperatura corporal |
| ICR Mouse | Samtaco | N/A | Animal experimental |
| Mersilk (espessura 3-0) | ETHICON | W598H | Material de sutura para fechamento cirúrgico da pele |
| Micro-Mosquito | F.S.T | 13010-12 | Instrumento cirúrgico |
| Micro-tesoura | F.S.T | 14090-09 | Cirúrgico instrumento |
| Porta-agulha | F.S.T | 12002-12 | Instrumento cirúrgico |
| Povidona Iodo | Firson | N/A | Desinfetante para prevenir infecções após a cirurgia |
| Lâmina de bisturi | F.S.T | 10010-00 (#10) | Instrumento cirúrgico para fazer uma incisão |
| Cabo de bisturi | F.S.T | 10003-12 (#3) | Instrumento cirúrgico para fazer uma incisão |
| Filamentos Von-Frey | North Coast | NC12775-99 | Dispositivo de medição para testar a função sensorial para estimulação mecânica |
Referências
- Loeser, J. D., Treede, R. D. The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology. Pain. 137 (3), 473-477 (2008).
- Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002(2017).
- Vranken, J. H. Mechanisms and treatment of neuro....
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Reimpressões e permissões
