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Artigo de método

Regulação gênica e terapia-alvo em câncer gástrico metástase Peritoneal: achados radiológicos de dupla energia de CT e PET/CT

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DOI:

10.3791/56526

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22 de janeiro de 2018

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Radiology, Ruijin Hospital, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, 2Department of Nuclear Medicine, Ruijin Hospital, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, 3GE Healthcare China, 4Department of Surgery, Cedars-Sinai Medical Center

Neste artigo

Resumo

Este protocolo descreve o valor de energia dual CT e PET/CT imaging métodos em avaliação de eficácia e imagem do tumor. Este artigo demonstra os métodos de pesquisa e os resultados adquiridos por dupla energia CT e PET/CT para avaliar a regulação gênica e alvo tratamento de metástase peritoneal de câncer gástrico.

Resumo

Câncer gástrico permanece quarto na incidência de câncer em todo o mundo com uma sobrevida de cinco anos de apenas 20% - 30%. Metástase peritoneal é o tipo mais frequente de metástases que acompanha o câncer gástrico irressecável e é um definitivo determinante do prognóstico. Prevenindo e controlando o desenvolvimento de metástase peritoneal poderiam desempenhar um papel em ajudar a prolongar a sobrevida de pacientes de câncer gástrico. Uma técnica de imagem não-invasivos e eficiente nos ajudará a identificar a invasão e o processo de metástase de metástase peritoneal e para monitorar as alterações em nódulos de tumor em resposta aos tratamentos. Isto irá permitir-nos obter uma descrição exata do processo de desenvolvimento e os mecanismos moleculares do câncer gástrico. Recentemente descrevemos experimento usando plataformas de energia dual CT (DECT) e tomografia por emissão de pósitrons/computado tomografia computadorizada (PET/CT) para a deteção e monitoramento de metástases de tumor gástrico em modelos de camundongos. Mostramos que o monitoramento contínuo semanal com DECT e PET/CT pode identificar mudanças dinâmicas em metástase peritoneal. O sFRP1-superexpressão em modelos de ratos câncer gástrico mostrou positivo desempenho radiológico, uma maior captação FDG e crescente aprimoramento e o SUVmáx (valor de absorção padronizado) dos nódulos demonstraram uma tendência óbvia alteração na resposta à terapia-alvo de inibidor de TGF-β1. Neste artigo, nós descrito modalidades de imagem não-invasivos para realizar pesquisas mais complexas em metástase peritoneal de câncer gástrico usando modelos animais e forneceu resultados representativos da imagem latente. O uso de técnicas não-invasivas de imagem deverá permitir-na melhor compreender os mecanismos da tumorigênese, monitorar o crescimento do tumor e avaliar o efeito de intervenções terapêuticas para o câncer gástrico.

Introdução

Câncer gástrico (GC) continua a ser a quarto mais comum malignidade e a segunda principal causa de mortalidade de câncer em todo o mundo1. Embora a precisão no diagnóstico e tratamento do câncer gástrico foi muito melhorada, metástase peritoneal é o ponto mais chave de prognóstico de câncer gástrico ou recorrência e seja um determinante definitivo da morte no pós-operatório2. É geralmente aceite que disseminação peritoneal é um modo de vida em risco de metástase, em que a doença torna-se incontrolável e o prognóstico do paciente é pobre, uma vez que a disseminação peritoneal é estabelecida. Portanto, a deteção e a avaliação do efeito terapêutico da metástase peritoneal de câncer gástrico é crucial para a prática clínica.

A crescente incidência e mortalidade de câncer gástrico tinham estimulado os pesquisadores a identificar seus mecanismos moleculares. A alta expressão de genes como secretada proteína relacionada ao frisado 1 (sFRP1) pode levar à ativação da via sinal nos estágios iniciais de câncer gástrico, promovendo o processo de tumor de crescimento, proliferação, diferenciação e apoptose3 , 4 , 5 , 6 , 7. as células sFRP1-superexpressão mostraram um aumento na expressão de TGFβ, seus destinos a jusante e mediada por TGFβ EMT8. Estudos anteriores demonstraram que o nível de TGF-β1 é correlacionado com metástase peritoneal e os estágios TNM do câncer gástrico. Descrevemos as alterações na proliferação de célula de câncer regulada pela superexpressão de sFRP1 e inibição do TGF-β1 e animal estabelecido modelos para metástase peritoneal mostrar o desempenho da imagem do tumor sob os efeitos da regulação genética.

Modelos animais para câncer gástrico são ferramentas indispensáveis para pesquisando o desenvolvimento do tumor e experimentando várias estratégias terapêuticas sem ter que sacrificar animais. Modelos animais têm se mostrado útil para estudar os mecanismos de formação de tumores e células de origem, determinando a presença de câncer células-tronco e examinando várias estratégias terapêuticas romance. Portanto, uma técnica não-invasiva em tempo real pode fornecer uma descrição exata do desenvolvimento de tumores gástricos e tumor resposta aos tratamentos, que podem identificar o desenvolvimento de nódulos de metástase peritoneal em camundongos e monitorar as alterações de um tumor em resposta a várias intervenções terapêuticas e experimentais.

Atualmente, o detector multi CT (TCMD) desempenha um papel importante no estadiamento TNM do câncer gástrico e é útil para prever resectability de tumor no pré-operatório9. No entanto, estudos radiológicos de pacientes com carcinoma gástrico histologicamente comprovado principalmente tem sido baseados na morfologia. DECT imaging estende os parâmetros para refletir informações funcionais, fornecendo imagens monocromáticas e pode ser útil para melhorar o N estadiamento precisão para câncer gástrico. Além disso, esta técnica permitirá a aquisição de material-decomposição imagens, que podem ser úteis para diferenciar entre diferenciadas e indiferenciada carcinoma gástrico e entre metastáticos e não-metastático linfonodos10 . Com a introdução do DECT, o aspecto funcional da imagem latente de CT também foi adicionado para aplicações clínicas, contribuindo para avaliações de eficácia terapêutica e prever prognósticos paciente11,12,13. PET/CT é uma técnica de imagem útil para a detecção e estadiamento do câncer gástrico e pode avaliam a recorrência do tumor efetivamente14. Proliferação de células de tumor e angiogênese eram ambos considerados necessários no desenvolvimento de um tumor detectável15, nódulos de tumor mostraram um desempenho positivo com maior SUVmáx no PET/CT. com base na sua preferência por aeróbio glicólise, 18F-FDG, um análogo da glicose, tem sido explorada como um marcador promissor no diagnóstico de malignidades, combinado com PET/CT16. Este método baseia-se no consumo de glicose rápida do tecido do tumor e tem amplas aplicações clínicas, incluindo auxiliando na detecção, encenação e avaliação do prognóstico dos tumores, bem como a monitorização de resposta dos tumores à terapia17 , 18. como métodos não-invasivos, DECT e PET/CT têm sido utilizados para diagnosticar tumores malignos e para avaliar a resposta do tumor a várias terapias.

Nosso grupo vem utilizando este método de imagem não-invasivos com scanners DECT e PET/CT para detectar e monitorar o processo de crescimento do tumor e metástases em vida ratos19. Nós exploramos os achados de imagem induzidos pelo sFRP1-superexpressão em câncer gástrico células na vivo usando camundongos, com DECT e PET/CT e descreveu a terapia de alterações do SUVmax valor seguindo direcionadas pelo inibidor de TGF-β1 para confirmar o desenvolvimento de nódulos de tumor no peritônio após indução do gene e também estudou as alterações em nódulos de tumor em resposta aos tratamentos experimentais. Neste trabalho, apresentamos os procedimentos detalhados para modelagem metástase peritoneal do tumor gástrico nos ratos e a sua detecção e monitoramento com DECT e PET/CT.

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Protocolo

Este trabalho foi realizado em estrita conformidade com os padrões estabelecidos pelas orientações para o cuidado e o uso do laboratório de animais de Shanghai Jiao Tong University e foi aprovado pelo laboratório de ética Comissão de Ruijin Hospital de animais.

1. modelo Animal de câncer gástrico metástase Peritoneal

  1. Divida uma linhagem de células de câncer gástrico humano SGC-7901 moderadamente diferenciada em SGC-7901/vector e um um grupo SGC-7901/sFRP1. Grupos de cultura as duas células separadamente em RPMI 1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino, 100 unidades/mL Estreptomicina e penicilina 100 de µ g/mL a 37 ° C numa atmosfera umidificada com 5% de CO2.
  2. Use 4-6 semana-velho modelo feminino BALB/c camundongos com peso corporal dos animais de lugar 25 a 30 g. sob condições específicas e isentos de agentes patogénicos em instalações animais.
  3. Divida os ratos aleatoriamente em superexpressão do sFPR1 e o grupo de carregamento vazio sFPR1.
    Nota: Cada grupo tinha dez camundongos; vinte ratos foram aleatoriamente divididos em grupo de tratamento de TGF-β1 e TGF-β1 grupo de controle, com até 5 camundongos por gaiola do animal.
  4. Estabelecer o grupo de modelos sFPR1-superexpressão metástase peritoneal xenoenxertos ao administrar 150 suspensões µ l (2 x 106 células/mL) de células de SGC-7901/sFRP1 através da cavidade abdominal; SGC-7901/vetor células são administradas para estabelecer o grupo de carregamento vazio.
    Nota: Use um hemocytometer contando o método para determinar a concentração de células20.
  5. Estabelecer o grupo de modelos de enxerto heterólogo metástase peritoneal através da administração de suspensões de (2 x 106 células/mL) 150 µ l de células de SGC-7901 através da cavidade abdominal. Administre a terapia-alvo de TGF-β1 inibidor SB431542 após um período de duas semanas de crescimento por injeção intraperitoneal na dose de 100 µ l/10 g de peso corporal a cada outro dia aos ratos no grupo de tratamento.
    1. Administre soro fisiológico normal com a mesma dose de ratos no grupo de controle.
  6. Execute o DECT e PET/CT varredura 1 dia antes do tratamento e 1 dia, 7 dias, dias 14 e 21 dias após o tratamento.

2. DECT para metástase Peritoneal modelo Animal

Nota: O animal da imagem latente do experimento foi alcançado sobre a energia dual CT scanner (ver Tabela de materiais). Criamos o protocolo de imagem de DECT relacionado de acordo com os estudos anteriores.

  1. Instalação para DECT protocolo de imagem
    1. No computador de imagem console, selecione o ícone de "gestão de protocolo" para entrar na interface de próxima e, em seguida, clique na opção "gestão de protocolo" para exibir a tela de gerenciamento de protocolo.
    2. Na interface do 'Protocolo de usuário', selecione a área do abdômen para entrar na lista de protocolos de abdômen.
    3. Clique no espaço em branco na lista de protocolo e selecione o botão "New" para digitar o nome de um novo protocolo: "Animal DECT Scan". Pressione a tecla "Enter" no teclado e selecione o botão de "Scout" na janela pop-up, clique em "Okey" para configurar a série de escoteiro (primeira série).
    4. Selecione o modo "XY" para 'Anatômico ponto de referência' e a "head-first posição supina" para "Orientação do paciente". Clique na opção "auto transferência" e selecione o local de estação de trabalho onde a série de imagem será carregada. Nome "Fase Scout" na descrição da série.
    5. Na tela 'Editar modo de exibição', certifique-se que os parâmetros de verificação relevantes são definidos como o seguinte: "Start local" e "final" opções são definidas no "S50" e "I50" respectivamente, "KV" a "100", "mA" em "80", "90°" para "Posição de batedor Lateral", "0°" para "posição de escoteiro AP "e o WW/WL"scout"no"400/40".
    6. Em seguida, crie a segunda série para não aprimorada de digitalização. Clique em "Criar nova série", na janela pop-up para selecionar os ícones "Axial" e "criar depois".
    7. Nome da série como "-fase C" na descrição da série e turno "mostrar localizador" no. Na interface do tipo de varredura, selecione o tipo de varredura "helicoidal" e 0,5 s para "Tempo de rotação", clique em opção de "velocidade grosso" para definir os parâmetros (cobertura do Detector em 40 mm, espessura helicoidal em 0,625 mm, Pitch e velocidade em 0.516:1/20.62, tempo de rotação em 0.5 s) o pop-up janela, intervalo no 0,625 mm, peitos de pórtico em 0, SFOV selecione pequeno corpo, kV em 100, clique em "mA", em seguida, digite 600 para mA Manual.
    8. Clique no ícone de "Parâmetros de reconhecimento" e abrir a janela pop-up "Opção de reconhecimento". Selecione "mais" no modo de reconhecimento; Clique no ícone de "Fatia" para selecionar o modo "ss50 fatia 50%" na tela de configuração de ASiR. Definir os parâmetros restantes da seguinte forma: DFOV a 25 cm, R/L e A / P centro de 0 cm, tipo reconhecimento selecione "Stnd", tamanho de matriz em 512.
    9. Criar a terceira série de varredura para intensificar a digitalização, repetindo o passo 2.1.8, nomeie-o como "+ fase C QC" e ligar o "Localizador de Mostrar"; o primeiro grupo é a instalação da série fase arterial.
    10. Na interface de 'Scan tipo', clique em "GSI (Gemstone Spectral Imaging)" e selecione o tipo de verificação "helicoidal", selecione o protocolo "GSI-52" na janela 'Abdômen GSI pré seleção'. Conjunto começar a localização e acabar com localização de acordo com a varredura não-realçado.
      1. Clique no ícone de "Parâmetros de reconhecimento" e abrir a janela pop-up "Opção de reconhecimento". No modo de reconhecimento, seleccione "Plus" e na 'Opção de GSI', clique em "QC"; os restantes parâmetros são os mesmos passo 2.1.8.
    11. Clique no ícone "R2" e selecione "Sim" na guia "Recon habilitado" Select "espessura" em 0.625 e digite 0.625 "Intervalo". Abrir a janela pop-up "Opção de reconhecimento", no modo de reconhecimento selecione "Mais"; em opções de GSI, clique em "Mono" e defina o keV para 70 keV; na janela de configuração de ASiR, selecione o "GS40 40%" modo para a instalação de GSI ASiR. Os restantes parâmetros são definidos com passo 2.1.8. Este passo como o nome "+ C 70keV fase".
    12. Clique no ícone "R3" e selecione "Sim" na guia "Recon habilitado" Set "espessura" em 1,25 e tipo 0.625 para "Intervalo". Abrir a janela pop-up "Opção de reconhecimento", no modo de reconhecimento selecione "Plus" e "QI avançado"; nas opções de GSI, clique em "Mono", defina o keV para 70 keV e clique em "Arquivo de dados do GSI"; garantir que a instalação de ASiR GSI está em conformidade com a etapa 13. Os restantes parâmetros são definidos como na etapa 2.1.8. O nome isso como "+ Mono fase C".
    13. Clique em "Adicionar grupo" para criar dois grupos para representar a portal fase e a fase de atraso, respectivamente de varredura. Certifique-se que os intervalos de "localização Iniciar" e "Localização final" de cada fase de varredura são consistentes e os restantes parâmetros são os mesmos que a fase arterial. Digite o tempo de atraso em "Grupo de preparação": o primeiro grupo (fase arterial) em 0 s, o segundo grupo (fase portal) em 8 s e o terceiro grupo (fase de atraso), 16 s.
    14. Clique na opção de "Aceitar" para salvar o protocolo após todas as configurações são feitas.
  2. Processo de imagem DECT
    1. Selecione os camundongos aleatoriamente os grupos tratamento e controle antes de cada verificação. Coloque os animais selecionados em gaiolas novas e marcá-los separadamente.
    2. Rápido os ratos para 4h com água, mas sem comida ou roupas de cama.
    3. Remover os ratos experimentais do centro de animais de experimento 1 h antes da varredura e certifique-se de que os ratos são colocados em um novo ambiente quente até que a verificação comece.
    4. Anestesiar todos os ratos experimentais com a injeção intraperitoneal de 2,5% pentobarbital de sódio (1,0 mL/kg de peso corporal) antes DECT digitalizar a imagem e confirme a profundidade da anestesia com o reflexo de pitada de dedo do pé. Use pomada sobre os olhos para evitar ressecamento enquanto sob anestesia.
      Nota: Certifique-se que a cabeça de cada mouse nude está na posição mais baixa quando injetar as drogas, reduzindo, assim, danos nos órgãos internos. Preste atenção ao local da injeção e a profundidade da injeção. Colocar a ponta da seringa em um ângulo de 45° para o interior do abdômen inferior direita/esquerda e certifique-se de que a profundidade da agulha é tal que a injeção para o intestino e outros órgãos é evitada.
    5. Clique no ícone "Novo paciente", as informações básicas sobre o mouse, incluindo seu paciente ID e o nome de entrada. O 'protocolo de usuário', clique no "protocolo de abdômen" e selecione o protocolo "Animal DECT Scan" para entrar na interface de operação.
    6. Uma vez que é a indução anestésica, mova cada mouse para uma plataforma de dispositivo elétrico animal na posição supina e corrigir sua cauda com fita para certificar-se de que não se dobra. Esterilize a cauda com álcool para injeção de agente de contraste subsequentes na veia-cauda.
    7. Afastar a cama de tomografia computadorizada para que o laser de linha posicionamento externo é ao longo do abdômen inferior do animal. Clique o botão "reset", quando o posicionamento é concluído.
      Nota: A colocação de linhas de posicionamento externas ao longo do abdômen inferior do animal garante que os animais estão localizados na medida do possível, do lado de fora da máquina para a administração de agente de contraste fácil na veia da cauda.
    8. Clique no ícone de "Confirmar" e seguir a ordem intermitente dos botões do teclado para completar o scout de digitalização. Selecione a série de"próximo" ícone após o scout digitalização for concluída e entrar na interface para não aprimorada de digitalização.
    9. Na tela da direita, defina a "localização Iniciar" e "Localização final" sobre o scout vistas para definir o intervalo de varredura. Manter a mesma faixa em 'scout Lateral' e 'AP scout' e cobrir o volume de todo o corpo do animal.
    10. Clique no ícone de "Confirmar" e seguir a ordem intermitente dos botões do teclado para completar o scout de digitalização.
    11. Injete cada rato com iopamidol com uma dose de 0,2 mL/100 g na veia da cauda.
      Nota: Nós escolhemos administrar o meio de contraste manualmente e manter a taxa de injeção mais estável possível. É mais propício para capturar o realce precoce do tumor durante a imagem latente.
    12. Clique em "próxima série" para realizar a digitalização melhorada. Definir "localização Iniciar" e "Localização final" conforme o scan não aprimorado. Clique no ícone "confirmar" e seguem a ordem de piscamento dos botões do teclado para completar a dinâmicas melhoradas varreduras, fase includingarterial, fase portal e fase retardada.
      Nota: Clique no ícone de "Confirmar" para imediatamente iniciar a digitalização depois que o agente de contraste é injetado. Isto é essencial e crucial para a digitalização melhorada para garantir que a melhor imagem da fase arterial é capturada. No entanto, alguns atrasam o tempo depois de clicar no ícone "confirmar" pode assegurar que os funcionários experimental tem retirado com segurança da sala de digitalização.
    13. Clique em "Terminar o exame" para sair do interface de digitalização, depois que a varredura está completa; a série de imagem serão automaticamente enviada para a estação de trabalho.
    14. Coloque o animal em uma gaiola vazia após a conclusão da digitalização com todos os mouses e observá-los até que eles tenham recuperou a consciência. Não abandone um animal até que ele recuperou a consciência suficiente para manter a prostração esternal. Depois de transferir os ratos em uma sala limpa de animais.
  3. Postar DECT, análise de imagem
    1. Localize a série de ratos em workstationinterface o DECT (ver Tabela de materiais) e selecionar o "+ Mono fase C" listas de série. Abra "GSI Volume Viewer" e selecione "GSI VV geral" protocolo da interface do ' Gestor de protocolos GSI'.
    2. Clique em anotação ativa "Tipo de exibição" no canto superior esquerdo das viewports imagem e selecione "coronal" orientação do menu drop-down.
    3. Para visualização de uma imagem, clique em anotação ativa "Volume 1" no canto superior esquerdo e selecione volumes "Mono" do menu drop-down. Da mesma forma, em outra imagem viewport, selecione volumes "Iodo (água)". Clique e segure o botão esquerdo do mouse, arraste a imagem da viewport "Iodo (água)" para "Mono" e marque a caixa "misturar as vistas" para obter as imagens de cor fundido.
    4. Clique e arraste no centro do ícone "Rolar imagem" para observar imagens. Salve as imagens que mostram resultados positivos como imagens coloridas fundidas.

3. PET/CT para metástase Peritoneal modelo Animal

Nota: Consulte a tabela de materiais para o gerador de imagens de PET/CT usado. Criamos o PET/CT relacionado imagem protocolo de acordo com o artigo21.

  1. Configuração de protocolo de Micro-PET/CT Imaging
    1. Para um corpo inteiro tomografia computadorizada, conjunto atual em 500 µA, tensão de 80 kV, tempo de exposição em 200 ms e 240 passos para 240° de rotação. Detector de raio-x, selecione resolução "ampliação de sistema de baixo" com o campo de imagem axial de 78 mm e o modo de cama de solteiro. Use o método de "reconstrução de Cone-Beam comum" e selecione a opção "reconstrução em tempo real", para que o PC host pode conectar com o computador de reconstrução em tempo real dedicado (Cobra) para iniciar a tarefa.
    2. Para PET aquisição, na opção "adquirir por tempo" conjunto "tempo de varredura fixo" para 600 s (10 min). Defina "isótopo de estudo" F-18 e "nível de energia" para 350-650 keV.
    3. Para produzir o histograma de PET, defina o quadro"dinâmico" como "negro" para processar os dados como um quadro durante todo o tempo alcançar a verificação estática. Definir tipo de histograma para "3D" e selecione a opção "nenhuma correção de dispersão".
    4. Para a reconstrução de PET, reconstruir imagens usando um algoritmo de OSEM3D seguido pelo mapa ou rápido mapa22 fornecido pelo workstationsoftware de PET/CT (ver Tabela de materiais).
  2. Preparação antes de imagens de PET/CT
    1. Rápido os ratos que foram submetidos a experiências DECT para 4h e transferir os ratos para novas gaiolas animais 30 min antes de imagem.
    2. Pesar os ratos e registar o seu peso.
    3. Siga os procedimentos de segurança do Instituto para adquirir e carregar o pacote contendo materiais radioactivos (RAM). Usar um escudo protetor para transportar os 18F-FDG (5 mCi), e medir a radioatividade do total 18F-FDG com um calibrador de dose.
    4. Dilua a 18F-FDG com solução salina normal para a radioactividade apropriada da injeção de ratos.
      Nota: A atividade diluída de 18F-FDG deve estar disponível em 100-200 µCi/100 µ l de cada rato.
      1. Desenhe a 200 µ l 18solução F-FDG em uma seringa de 1 mL. Medir a radioactividade da seringa inteira com um calibrador de dose e registrar o tempo de preparação de 18F-FDG.
    5. Injetar cada rato com 200 µ l 18solução F-FDG através da rota de injeção intravenosa de cauda e registrar o tempo de injeção de 18F-FDG. Após a injeção de todos os mouses, medir a radioatividade residual da seringa com o calibrador de dose imediatamente e registrar o tempo em que as medidas foram feitas após a conclusão da injeção.
    6. Calcular a atividade injetado 18F-FDG para cada mouse pela seguinte fórmula: injetado atividade (µCi) = atividade na seringa antes da injeção - atividade na seringa após a injeção.
  3. Processo de geração de imagens de PET/CT
    1. Colocar o animal em uma câmara de indução da anestesia; anestesiar o rato usando inalado 3% isoflurano em oxigênio após a conclusão da injeção de 18F-FDG.
      Nota: Siga todas as orientações do bem-estar animal apropriadas para a operação; aquece os ratos usando a compressa. Use a pomada nos olhos para evitar ressecamento enquanto sob anestesia.
    2. Uma vez que é a indução anestésica, mova o mouse para a cama de digitalização de micro-CT, mantendo a anestesia contínua e aquecimento. Posicione a cabeça do rato dentro de uma máscara de rosto de cone que oferece continuamente isoflurano (2%) em oxigênio a uma vazão de 2 L/min. colocar o mouse na posição supina, para garantir que a postura é consistente com a em scans DECT.
    3. Mova o animal para a entrada do scanner PET/CT, clique no ícone de "laser" a partir do Visualizador de barra de ferramentas e usar a interface de controle do touchpad para mover a cama para que o abdômen do mouse está localizado no centro do animal de estimação e CT campo de visão (FOV) durante a digitalização. Na janela "Laser Align", selecione "primeiro tipo de digitalização" como "TC" e "PET aquisição incluída no fluxo de trabalho" como a opção.
    4. Abra a janela de "Scout View" e adquirir um modo de escoteiro radiografia raio-x. Ajuste a posição da cama animal para que o centro do campo de visão de CT está localizado no centro do corpo do mouse.
    5. Selecione o protocolo estabelecido anteriormente (na etapa 3.1). O número de ratos para ser fotografado (sucessivamente) na janela pop-up e clique na opção "Setup" de entrada e, em seguida, digite o peso. Em seguida, clique na opção "Setup" novamente e siga as instruções da janela pop-up para concluir a configuração.
    6. Clique no ícone de "Trabalho" para iniciar a digitalização.
    7. Avalie a qualidade das imagens adquiridas CT e PET após todos os exames sejam concluídos. Transferi os dados através da rede para o post de imagem análise para um estudo mais aprofundado.
      Nota: Ajuste a largura da janela e nível de janela da imagem para garantir que o contraste dos órgãos é exibido corretamente. Verifique a resolução dos órgãos nas imagens para confirmar a qualidade de imagem.
    8. Remova o tonalizador do animal e imediatamente eutanásia por deslocamento cervical. Use o sistema de imagem para o próximo animal sucessivamente.
  4. Post de análise de imagens de PET/CT
    1. Abra o software de estação de trabalho de PET/CT, importar os dados de série de imagem CT e PET para o software. Na janela de "Registro", clique na opção "Análise geral" para registrar imagens de CT e PET juntos e escolher o modelo de "Céu" sob a janela de "Revisão" para mostrar um perfeito alinhamento entre imagens de CT e PET.
    2. Identifica os nódulos peritoneais com referências fornecidas pelas imagens co registradas na janela de "Região de interesse (ROI) quantificação".
    3. Na janela "Região de interesse (ROI) quantificação", desenhar ROI com ferramentas sobre as imagens fundidas, edite o tamanho e forma do ROI, registro o valormáximo de SUV, em seguida, saída e salvar as imagens selecionadas mescladas.

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Resultados

DECT e PET/CT varredura foram realizados em camundongos, após duas semanas de injeções de linha celular. Imagens GSI renderam excelentes resultados para exibir subcutâneo metástase além do contorno do abdômen para o grupo de superexpressão de sFRP1, e metástase com realce periférico foi confirmado pela imagem de escala de cores (Figura 1a-c). Imagens de PET/CT retratado captação FDG focally anormal de metástase, incluindo as metástases perito...

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Discussão

Modelos animais têm sido utilizados amplamente no estudo dos mecanismos moleculares subjacentes câncer gástrico e fazer experiências com várias estratégias terapêuticas23,24,25. Neste estudo, descrevemos um protocolo detalhado para câncer gástrico metástase peritoneal camundongos modelagem, usando DECT e PET/CT para tumores gástricos de imagem para identificação de proliferação de célula de tumor em metástase peritoneal em tempo...

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Divulgações

Os autores têm sem conflitos de interesse para declarar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pela NSFC (n. º U1532107) e a engenharia biomédica Shanghai Jiao Tong University project (n. º YG2014MS53). Os autores gostaria de reconhecer Jianying Li e Yan Shen para seus comentários úteis e os esforços de apoio técnico no desenvolvimento do DECT e PET/CT, método de imagem.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
IohexolBEJING BEILU PHARMACEUTICAL CO,LTDNMPN:meio de contraste não iônico para varredura DECT
salina normalHUNAN KELUN PHARMACEUTICAL CO,LTDNMPN:placebo do grupo controle
BALB/c camundongos nus SLAC LABORATORY ANIMALBALB/cASlac-numodelo animal
SGC-7901  célulasBiblioteca de cultura típica da academia chinesa de ciênciasTCHu 46células de câncer gástrico
SB431542SelleckNo.S1067TGF-β 1 inibidor
GE Discovery CT750 HDGE Healthcarescanner espectral de dupla energia para tomógrafos
AW Volumeshare5de trabalho de TC espectral de dupla energiada GE Healthcare
Siemens Inveon micro-PET/CTSiemens Preclinical SolutionTomografia por emissão de pósitrons/
scanner de tomografia computadorizada 
Estaçãotrabalho PET-CTSiemens Acquisition
H20053800 soluçãoH43020455 Estação de da Workplace

Referências

  1. Ferlay, J., et al. Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012. Int J Cancer. 136 (5), 359-386 (2015).
  2. Kobayashi, D., Kodera, Y. Intraperitoneal chemotherapy for gastric cancer with peritoneal metastasis. Gastric Cancer. 20, (Suppl 1) 111-121 (2017).
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