Method Article

Um microcontrolador operado dispositivo para a geração de extratos líquidos de aerossol de cigarro eletrônico e fumo cigarro convencional

DOI:

10.3791/56709

January 18th, 2018

In This Article

Summary

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Aqui, descrevemos um aparelho de laboratório programáveis que pode ser usado para criar extratos de aerossol de cigarro eletrônico e fumaça de cigarro convencional. Este método fornece uma ferramenta útil para fazer comparações diretas entre cigarros convencionais e cigarros eletrônicos e é um ponto de entrada acessível para pesquisa de cigarro eletrônico.

Abstract

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Cigarros eletrônicos são o produto de tabaco mais popular entre os estudantes do ensino médio e médio e o produto de tabaco alternativo mais popular entre os adultos. Alta qualidade, reprodutível pesquisas sobre as consequências do uso de cigarro eletrônico é essencial para compreensão emergentes preocupações de saúde pública e elaboração de provas com base política reguladora. Enquanto um número crescente de jornais discutem os cigarros eletrônicos, há pouca consistência nos métodos através de grupos e muito pouco consenso sobre os resultados. Aqui, descrevemos um aparelho de laboratório programáveis que pode ser usado para criar extratos de aerossol de cigarro eletrônico e fumaça de cigarro convencional. Este protocolo detalha instruções para a montagem e a operação do referido dispositivo e demonstra o uso do extrato gerado em dois aplicativos de exemplo: um em vitro ensaio da viabilidade celular e cromatografia gasosa-espectrometria de massa. Este método fornece uma ferramenta para fazer comparações diretas entre cigarros convencionais e cigarros eletrônicos e é um ponto de entrada acessível para pesquisa de cigarro eletrônico.

Introduction

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Apesar de um esforço concentrado por organizações de saúde, uso do produto do tabaco continua a ser a principal causa de morte evitável em todo o mundo, com a maioria destas mortes atribuídas ao cigarro fumar1. Desde que entrou no mercado em 2003, os cigarros eletrônicos têm crescido em popularidade entre os usuários de produtos de tabaco. Atualmente, os cigarros eletrônicos são a alternativa mais popular de cigarros convencionais entre adultos americanos (~ 5%)2 e o mais popular sistema de entrega de nicotina entre médio (~ 5,3%) e estudantes do ensino médio (~ 16%)3. Se as tendências atuais cont....

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Protocol

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1. montagem do dispositivo

  1. Fixe um 100 mL frasco de Buchner (Figura 1, #4) para um anel de aço ficar e criar uma armadilha vácuo enchendo-o com 50 g de cloreto de cálcio para servir como um dessecante. Feche o frasco com uma rolha do através de-furo de borracha, enrole a junção de rolha com película de parafina e executar uma pipeta através do orifício.
  2. Usando o tubo de vinil, conectar-se a pipeta, estendendo-se desde a rolha para um conector de mangueira t-interseção.
  3. Usando o tubo de vinil, ligue o impactor dois (Figura 1, #2 e #3) uns aos outros e a saída da segunda impactor a....

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Results

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24 horas depois da exposição da veia umbilical humana células endoteliais para extrato de fumaça de cigarro convencional (CSE) ou aerossol de cigarro eletrônico extrato (EAE), há uma significativa (controle vs CSE P < 0,001; controle vs EAE P < 0,01; n = 6) redução da viabilidade celular (Figura 3A). Extratos foram gerados com um perfil de sopro de 2, 2 segundos, sopros de 55 mL por minuto e normalizada com base na concentração molar d.......

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Discussion

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Os elementos mais críticos do presente protocolo são assegurar que o dispositivo é limpo no início e fim de cada extração, e garantindo que todos os selos são mantidos assim que o fluxo de ar permanece consistente. Se o dispositivo não é devidamente limpos, há um risco de transportar sobre entre amostras. Além disso, se o dispositivo é deixado impuro por um período prolongado de aerosol condensado tempo e secas solvente pode bloquear o sistema. Nota que é normal para lá para ser uma queda de pressão quando fumando um cig.......

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Disclosures

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O programa de bolsa de pesquisa do tabaco produto regulamentar ciência administrado pela Universidade de Tulane é financiado pelos assuntos regulatórios da Altria cliente serviços.

Acknowledgements

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Os autores reconhecem a ajuda do Dr. Robert Dotson da Tulane University departamento de célula e Biologia Molecular, por sua assistência em editar o manuscrito e Dr. James Bollinger de Tulane University departamento de química por sua assistência com projeto de protocolo de espectrometria de massa. Os autores mais reconhecem a Tulane University departamento de célula e Biologia Molecular e Tulane University departamento de química por seu apoio e o uso do espaço e equipamento. Este trabalho foi financiado por uma bolsa de pesquisa do tabaco produto regulamentar ciência para C. Anderson, da escola da Universidade de Tulane da ciência e engenharia.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Adaptador de Parede AC/DC de 12 VDigi-KeyT1099-P5P-ND
Resistores de 2,2 OhmsDigi-KeyA105635-NDUsado em conjunto para gerar a resistência de 4,4 Ohm na Figura 2A
Resistores de 330 OhmDigi-Key330QBK-ND
510 Base RoscadaNJoyN/ARecuperado pela desmontagem de um cigarro
eletrônico NJoy de segunda geraçãoÁcido Acético, GlacialSigma-AldritchA6283
Acetona (Grau de Cromatografia)Sigma-Aldritch34850
Digi-Key27112-NDEsta placa contém o Microcontrolador BS1, adaptador serial, interruptor de energia e um conector de pino de barril para o Adaptador de Parede AC/DC
Stamp USB para Adaptador SerialDigi-Key28030-NDUm componente opcional para permitir que o adaptador serial BS1 se comunique através de USB
Frasco Buchner (Frasco a Vácuo) 250 mLVWR10545-854
Fita Transparente3MS-9783
Tubo de Vinil Transparente, 3/8" IDWatts443064
EGM-2 Meio de Cultura de Células EndoteliaisLonzaCC-3162
EtanolPharmco-Aaper
Varian450-GCCromatógrafo a Gás
de Vidro Z314552Sigma-Aldritch10 mL
, 10 µ LHamilton80300
Graxa de Silicone de Alto VácuoDow Corning146355D
Braçadeirade Mangueira Precision Brand35125
Células Endoteliais da Veia Umbilical HumanaATCCPCS-100-013 
Espectrômetro de MassaVarian300-MS
Midget ImpingerChemglass CG-1820-01
Vermelho NeutroSigma-AldritchN4638
Filme de Parafina3MPM-992
Rolo de Vedação de PlacaBioRadMSR0001
Vedação de Placa; Suportede 276014Térmico
20"American Educational Products7-G15-A
Válvula Solenóide (normalmente aberta)US SolidUSS2-00081
Relé de Estado SólidoDigi-KeyCLA279-ND
Stand ClampEiscoCH0688
Filtro de Seringa, PES, 0.22 umMilliporeSLGP033RS
Seringa, Seringa BD de 10 mL309604
Rolha Passante, Tamanho 6VWR59581-287
Bomba de VácuoKNF NeubergerN86KTP
Placa de Projeto de Carimbo Básico Basic Regulador de Fluxo 111000200 Seringa de Vidro para Dwyer VFA-23-BV, Seringa de de Anel de Folha

References

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  1. World Health Organization. WHO Report on the Global Tobacco Epidemic, 2011. , Italy. (2011).
  2. Weaver, S. R., Majeed, B. A., Pechacek, T. F., Nyman, A. L., Gregory, K. R., Eriksen, M. P. Use of electronic nicotine delivery systems and other tobacco products among USA adults, 2014: r....

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