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Artigo de método

Utilizando o ultra-som de alta resolução para o aparecimento de Tumor de Monitor e crescimento em modelos de câncer pancreático geneticamente modificados

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DOI:

10.3791/56979

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7 de abril de 2018

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Neste artigo

Resumo

Este artigo descreve a utilização de ultra-som de alta resolução em camundongos geneticamente modificados câncer pancreático. O objetivo principal é fornecer uma instrução detalhada para detecção e avaliação de tumores pancreáticos endógenas.

Resumo

O LSL-Kras G12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modelo de mouse (KPC) representa um modelo transgênico estabelecido e usado com frequência para avaliar novas terapias em câncer pancreático. Aparecimento de tumor é variável no modelo KPC entre 8 semanas e vários meses. Portanto, ferramentas de imagem não-invasivos são obrigadas a tela para o aparecimento de tumor e monitor para resposta ao tratamento. Para resolver esse problema, diferentes abordagens têm surgido nos últimos anos. Ultra-som de alta resolução tem grandes vantagens como não-invasividade, tempos de sessão rápida e uma alta resolução de imagem sem exposição à radiação. No entanto, ultra-som em ratos não é trivial e suficiente conhecimento anatômico e habilidades práticas são necessárias para executar com êxito o ultra-som de alta resolução em modelos pré-clínicos de câncer pancreático. Com o artigo a seguir, é apresentado um guia detalhado de hands-on para ecografia abdominal em murino modelos com um foco particular em modelos de câncer no pâncreas endógeno. Além disso, é fornecido um resumo dos erros comuns e como evitá-los.

Introdução

Modelos de rato geneticamente ganharam uma importância crescente em pesquisa de câncer, devido à sua capacidade intimamente recapitular a natureza complexa de carcinogênese humana1,2,3. Um dos mais frequentemente usados modelos para estudar o desenvolvimento de câncer no pâncreas, progressão e resposta terapêutica é caracterizada por uma mutação ativando o oncogene Kras combinado com uma inativação do tumor supressor p534. Este LSL-Kras G12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modelo de mouse (KPC) imita a progressão por e....

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Protocolo

Este protocolo está em conformidade com as orientações de cuidados com animais na universidade médica centro de Goettingen, Alemanha (33,9-42502-04-15/2056). Dependendo dos requisitos específicos de cada animal comissões de inquérito, algumas das etapas do protocolo podem ser modificadas em conformidade.

1. abdominal palpação dos ratos KPC

  1. Para evitar exames desnecessários ultra-som, palpe o abdome do mouse para identificar os ratos que possivelmente podem suportar uma lesão intraabdominal e posteriormente devem ser submetidos a ecografia abdominal.
    1. Realize a palpação abdominal semanais a partir de 8 semanas de idade, no m....

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Resultados

Ecografia é uma técnica não-invasiva e versátil que é usada para resolver vários problemas em murino modelos de doenças humanas. Em comparação com todos os outras de imagem abordagens principais vantagens são eficiência alta produtividade, custo, tempo curto de aquisição e geração de imagens em tempo real. No entanto, esta ferramenta precisa de expertise para gerar imagens precisas e de alta qualidade. Particularmente no caso de artefatos indesejados pelo menos alguma experiência com ultr.......

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Discussão

Com este protocolo, é fornecida uma descrição detalhada para quantificação dos tumores pancreáticos, utilizando imagens de ultra-som abdominal de alta resolução em modelos do rato geneticamente modificados. Recentemente, Sastra et al . publicaram uma descrição detalhada como quantificar tumores pancreáticos em modelos do rato, mas não visualizadas instruções sobre a preparação e manipulação como pré-requisito para todos os novos passos foram mostrados11. O objetivo geral do presente manus.......

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Divulgações

Os autores não têm nada para divulgar.

Agradecimentos

Esta pesquisa foi apoiada pelo Deutsche Krebshilfe (grupo de Eder Max para AN: 110972), uma bolsa de tese de doutorado de DGVS (para SMB) e uma bolsa de Else Kröner Fresenius-Fundação- (para RGG) na Universidade Medical Center Goettingen. Agradecemos a Jutta Blumberg e Ulrike Wegner para assistência técnica especializada. Agradecemos também a todos os técnicos de animais nas instalações da Universidade Medical Center Goettingen para mouse mantendo animais. Todos os experimentos foram realizados de acordo com normas de bem-estar animal alemão.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Sistema de ultrassom de alta resolução Visual Sonics Vevo2100, incluindo estágio de imagem e linha de anestesiaFUJIFILM VisualSonics Inc, CanadáVS-11945
Vevo 2100 MicroScan Transdutor MS-550-D (22-55MHz)FUJIFILM VisualSonics Inc, CanadáVS-11874
Vevo Anesthesia System (câmara de indução de anestesia com entrada de gás fresco e residual)FUJIFILM VisualSonics Inc, CanadáSA-12055
Vevo Imaging Station (estágio de trabalho com cone de nariz para fornecimento de anestesia)FUJIFILM VisualSonics Inc, CanadáSA-11982
  aparadores eletrônicos para animais de estimaçãoPanasonic Marketing Europe, Germany5025232484324Panasonic ER-PA10-s
Labotect Placa quenteLabor tech Gö ttingen, Alemanha13854
creme para os olhos (pomada oftálmica)Schü lke& Mayr, Alemanha9080249
isoflurano veterinárioAbbvie, Alemanha4831867
creme depilatórioRB healthcare UK, Reino Unido8218535
70% de etanol (v/v) em água destiladaTH. Geyer, Alemanha22941000
gel de ultrassomAsmuth, Alemanha13477
lenços de tecidoKimberly-Clark Alemanha, Alemanha7558
pontas de algodãoMeditrade, Alemanha75481116
tigela de vidro para gel de ultrassomARC França, FrançaH1149
tigela de águaW & P Trading Co., EUAB00K2P6PLQ
esponjas de gazeFuhrmann, Alemanha960504

Referências

  1. Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine. EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).
  2. Olive, K. P., Politi, K. Translational therapeutics in genetically engin....

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Reimpressões e permissões

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