Imagem de ultra-som de alta frequência do mouse fetal melhorou a resolução de imagem e pode fornecer precisa caracterização não-invasivo do desenvolvimento cardíaco e defeitos estruturais. O protocolo descrito neste documento é projetado para executar em tempo real de ratos fetal ecocardiografia na vivo.
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Artigo de método
Imagem cardiovascular fetal de camundongo usando um sistema de ultrassom de alta frequência (30/45MHZ)
Neste artigo
Resumo
Resumo
Defeitos cardíacos congênitos (CHDs) são a causa mais comum da infância morbi -mortalidade precoce. A detecção pré-natal dos mecanismos moleculares subjacentes do CHDs é crucial para inventar novas estratégias preventivas e terapêuticas. Modelos de rato mutante são ferramentas poderosas para descobrir novos mecanismos e modificadores de estresse ambiental que impulsionam o desenvolvimento cardíaco e sua potencial alteração no CHDs. No entanto, os esforços para estabelecer a causalidade destes putativos contribuintes foram limitado a estudos histológicos e moleculares em experiências com animais não-sobrevivência, no qual monitoramento de parâmetros fisiológicos e hemodinâmicos chaves é frequentemente ausente. Tecnologia de imagem ao vivo tornou-se uma ferramenta essencial para estabelecer a etiologia do CHDs. Em particular, ultra-sonografia pode ser usada de pré-Natal sem expor cirurgicamente os fetos, permitindo a manutenção de sua fisiologia de base enquanto monitora o impacto do estresse ambiental sobre os aspectos estruturais e hemodinâmicos da câmara cardíaca desenvolvimento. Aqui, usamos o sistema de ultra-som de alta frequência (30/45) para examinar o sistema cardiovascular em ratos fetais no E18.5 no utero na linha de base e em resposta à exposição de hipóxia pré-natal. Podemos demonstrar a viabilidade do sistema para medir o tamanho da câmara cardíaca, morfologia, função ventricular, ritmo cardíaco fetal e índices de fluxo da artéria umbilical e suas alterações em fetais camundongos expostos a hipóxia crônica sistêmica no utero no real está na hora.
Introdução
Malformações congênitas do coração são heterogêneos defeitos estruturais que ocorrem durante o desenvolvimento cardíaco precoce. Os avanços técnicos atuais dos procedimentos operacionais levaram a melhorias significativas nas taxas de sobrevivência de crianças com CHDs1,2. No entanto, qualidade de vida é muitas vezes comprometida secundária à hospitalização prolongada e necessidades dos encenado reparo cirúrgico procedimentos1,2,3,4,5. A detecção pr....
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Protocolo
A Universidade da Califórnia, Los Angeles, cuidado Animal e uso comitê aprovou todos os procedimentos mostrados neste protocolo. Os experimentos foram realizados como parte de um estudo em curso sob ativos animais protocolos aprovados pelo cuidado Animal institucional e uso Comitê da Universidade da Califórnia, Los Angeles, Califórnia, EUA. Cuidados e tratamento de animais seguiram as normas do guia para o cuidado e o uso de animais de laboratório.
1. preparar o ultra-som de alta frequência, sistema de imagem
- Ligue o sistema de imagens de ultra-som e a unidade de monitorização de fisiologia.
- Conecte o transdutor de 30/45....
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Resultados
Análises estatísticas de índices cardíacas e hemodinâmicas foram realizadas off-line. Calcularam-se os meios de 5 medições consecutivas em 3 imagens ideais. Os dados foram expressos como média ± SEM. Student t-teste foi usado para inferir comparações intergrupais. Um valor de P de ≤0.05 foi considerado estatisticamente significativo.
Seguindo o protocolo acima, temos caracterizado o impacto da exposição crônica.......
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Discussão
Doenças e malformações cardiovasculares são substancialmente influenciadas por fatores genéticos e ambientais elementos19. Nós demonstramos anteriormente um impacto significativo de restrição calórica materna, iniciada durante o segundo trimestre, no feto-placentária fluxo circulatório e a função cardíaca fetal9.
Hipoxia pré-natal é outro factor comum de stress durante o desenvolvimento fetal que pode afetar enormemente a fisiologia feto-placentá.......
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Divulgações
Não há conflito de interesse declarado.
Agradecimentos
Agradecemos o núcleo de fisiologia animal, divisão de medicina molecular na UCLA para fornecer suporte técnico e acesso aberto ao sistema Vevo 2100 ultra-som biomicroscopia (UBM). Este estudo foi suportado pelo centro de pesquisa de saúde NIH/filho (5K12HD034610/K12), a UCLA-crianças Discovery Institute e hoje e amanhã da criança e o prêmio David Geffen escola de medicina pesquisa inovação para M. Touma.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Vevo 2100 | VisualSonics, Toronto, Ontário, Canadá | N/A | Biomicroscopia de ultrassom de alta frequência. A configuração está disponível na instalação central de fisiologia animal, divisão de medicina molecular, UCLA. Camundongos |
| endogâmicos dos EUA (c57 / BL6) | Charles River Laboratories | N / A | Linhagem de camundongos do tipo selvagem Inbread |
Referências
- Touma, M., Reemtsen, B., Halnon, N., Alejos, J., Finn, J. P., Nelson, S. F., Wang, Y. A Path to Implement Precision Child Health Cardiovascular Medicine. Front Cardiovasc Med. 4, 36(2017).
- Triedman, J. K., Newburger, J. W. Trends in Congenital Heart Disease. The Next Decade. Circulati....
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Reimpressões e permissões
