É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Um modelo minimamente invasivo para analisar a fratura endocondral cura em ratos sob condições biomecânicas padronizadas

7.8K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/57255

⸱

22 de março de 2018

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

Neste artigo

Resumo

Este protocolo descreve uma técnica de osteossíntese minimamente invasiva usando um parafuso de haste intramedular padronizada estabilização de fraturas de fêmur, o que pode ser usado para analisar endocondral consolidação óssea em ratos.

Resumo

Modelos de cura óssea são necessários para analisar os mecanismos complexos de fratura cura para melhorar o tratamento clínico da fratura. Durante a última década, um aumento da utilização de modelos de rato em pesquisa ortopédica observou-se, muito provavelmente porque os modelos do rato oferecem um grande número de variedades geneticamente modificadas e anticorpos especiais para a análise dos mecanismos moleculares de consolidação da fratura. Para controlar as condições biomecânicas, técnicas de osteossíntese bem caracterizadas são obrigatórias, também em ratos. Aqui, nós relatamos no design e na utilização de uma modelo de consolidação fechada para estabilizar fraturas de fêmur em ratos. O parafuso da haste intramedular, feito de aço inoxidável de grau médico, fornece através da compressão da fratura uma estabilidade axial e rotacional, em comparação com os pinos intramedular simples mais utilizado, que mostram uma completa falta de estabilidade axial e rotacional. A estabilidade alcançada pelo parafuso intramedular permite a análise de endocondral cura. Uma grande quantidade de tecido de calo, recebido após a estabilização com o parafuso, oferece as condições ideais para a colheita de tecidos para análises bioquímicas e moleculares. Uma vantagem adicional do uso do parafuso é o fato de que o parafuso pode ser inserido em fêmur com uma técnica minimamente invasiva sem induzir danos no tecido macio. Em conclusão, o parafuso é um implante exclusivo que pode ser usado idealmente na fratura fechada modelos oferecendo condições biomecânicas padronizadas de cura.

Introdução

Estudos de cura óssea em ratos estão em grande demanda por causa de um amplo espectro de anticorpos e animais geneticamente modificados. Estes factos permitem estudar os mecanismos moleculares do osso cura1. Nos últimos anos, osso de diferente modelos de cura para os ratos foram desenvolvidos2. Estes modelos podem ser divididos em modelos abertos, em que o osso é osteotomizado usando uma abordagem cirúrgica lateral aberta e em modelos fechados, baseados no modelo apresentado por Bonnares e Einhorn3fratura em que o osso está fraturado. Usando esta técnica, uma fractura transversal padronizada pode ....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

Todos os procedimentos foram realizados de acordo com as diretrizes do National Institutes of Health para o uso de animais experimentais e seguiram as orientações institucionais (turismo für Verbraucherschutz, Zentralstelle Amtstierärztlicher Dienst, Saarbrücken Alemanha).

1. preparação de instrumentos cirúrgicos e implantes

  1. Selecione uma lâmina de bisturi (tamanho 15), um pequeno cotonete, pinça fina, agulha 27G, uma sutura não absorvível de 5-0, tesoura e um porta-agulha da caixa instrumento microcirúrgico.
  2. Descompacte o parafuso da haste intramedular, o fio-guia (0,2/0,3 mm de diâmetro, 10 cm de comprimento), o bocado....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

O tempo de funcionamento da incisão de pele para fechamento de ferida foi de 20 min. A cirurgia pode ser realizada sem um estereoscópio. No pós-operatório, os animais foram monitorados diariamente. Analgesia pós-operatória foi finalizado depois de 2 dias, porque nenhum dos animais apresentou evidência de dor após este período de tempo. Os animais também mostraram peso-rolamento normal dentro de 2 dias após a cirurgia. Infecção da ferida não foram observadas durante o período de observação.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Passos críticos do procedimento cirúrgico são para encontrar o ponto de entrada correta para implantação do parafuso no meio os côndilos do fêmur no entalhe intercondilar, bem como a orientação ideal da agulha paralela ao eixo do osso para fresagem do cavidade intramedular. Para evitar uma posição de entrada incorreta, o cirurgião deve preparar o entalhe até que seja alcançada uma visão ideal. Para controlar a orientação durante a fresagem, o fêmur dos ratos deve ser realizado com os dedos em uma posição estável. Um pass.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Os autores declaram que eles têm não tem interesses financeiro concorrente.

Agradecimentos

Este trabalho foi financiado pela RISystem AG, Davos, Suíça.

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Parafuso de ratoRISystem AG221.100
Fio guiaRISystem AG521.100
Broca de centragemRISystem AG590.205
Broca manualRISystem AG390.130
Cotonete (150 mm, cabeça pequena)Fink Walter GmbH8822428
Sutura (5-0 Prolene)Ethicon8614H
PinçaBraun Aesculap AG & Tesoura CoKGBD520R
Braun Aesculap AG & CoKGBC100R
Porta-agulhasBraun Aesculap AG & Agulha CoKGBM024R
27 GBraun Melsungen AG9186182
Lâmina de bisturi tamanho 15Braun Aesculap AG & CoKG16600525
Radiador de calorSanitas605.25
Creme depilatórioAsid bonz GmbHNDXZ10
Lubrificante ocularBayer Vital GmbH2182442
XylazineBayer Vital GmbH1320422
KetamineSerumwerke Bernburg7005294
TramadolGr& uuml; nenthal GmbH2256241
Solução de desinfecção (SoftaseptN)Braun Melsungen AG8505018
camundongos CD-1Charles River22
Dispositivo de raios-XFaxitron MX-20, Faxitron X-ray Corporation2321A0988
Dispositivo de fratura pequenoRISystem AG891.100

Referências

  1. Jacenko, O., Olsen, B. R. Transgenic mouse models in studies of skeletal disorders. J Rheumatol Suppl. 43, 39-41 (1995).
  2. Histing, T., et al. Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting. Bone.....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Explorar mais artigos

Modelo de Fratura em CamundongoParafuso IntramedularCirurgia Minimamente InvasivaEstabilidade BiomecânicaFormação de Tecido de CaloAnálise RadiológicaAnálise HistológicaMedição da Rigidez à Flexão