Este protocolo descreve o vestibulotóxicos cirúrgico de um rato, que é um método útil para o estudo do sistema vestibular.
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Artigo de método
Vestibulotóxicos cirúrgico do rato para estudar o sistema Vestibular
Neste artigo
Resumo
Resumo
Para estudar o sistema vestibular ou o processo de compensação vestibular, vários métodos foram desenvolvidos para causar dano vestibular, incluindo vestibulotóxicos cirúrgicos ou químicos e neurectomia vestibular. Vestibulotóxicos cirúrgico é um método relativamente simples, confiável e rápido. Aqui, descrevemos a técnica cirúrgica para rato vestibulotóxicos. Uma incisão postauricular é feita sob anestesia geral para expor o canal auditivo externo e a membrana timpânica, após o qual a membrana timpânica e ossículos são removidos sem estribo. A artéria do estribo, que está localizada entre o estribo e a janela oval, é uma estrutura vulnerável e deve ser preservada para obter um campo cirúrgico limpo. Um buraco para fenestrado o vestíbulo feito com uma broca de 2,1 mm de broca superior com o estribo. Então, 100% de etanol é injetado através deste buraco e aspirada várias vezes. Minuciosa dissecação sob um microscópio e cuidadoso controle de sangramento são essenciais para obter resultados fiáveis. Sintomas de perda vestibular, como nistagmo, inclinação de cabeça e um movimento de rolamento, são vistos imediatamente após a cirurgia. O teste de cadeira rotarod ou rotação pode ser usado para objetivamente e quantitativamente avaliar a função vestibular.
Introdução
O órgão vestibular é essencial para o controle de equilíbrio e olho. Uma função vestibular normal depende de sinais aferentes simétricos de órgãos vestibulares nos dois ouvidos interno. Hipofunção vestibular ou perda induz tonturas, nistagmo e desequilíbrio postural. Depois de danos agudos, a função vestibular recupera espontaneamente dentro de alguns dias, um processo conhecido como compensação vestibular1,2. A compensação vestibular dos défices estáticos é um processo de recuperação relacionado com o desequilíbrio da atividade espontânea de descanso entre os núcleos vestibulares ipsilaterais e contralaterais....
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Protocolo
Este estudo foi realizado em conformidade com o cuidado de Animal institucional e uso Comitê de Seul nacional Hospital Universitário (14-0148-C1A1), que é credenciado pela Associação para a avaliação e acreditação do cuidado de Animal de laboratório Internacional.
Nota: Os experimentos foram realizados em ratos machos Sprague-Dawley (SD) de 7-8 semanas de idade (200/250 g). Cada animal foi aclimatado para as condições de laboratório por 1 semana antes do início do experimento. Os animais foram alojados em uma sala de controle de temperatura e umidade com uma constante 12-h:12-h luz: escuro ciclo com livre acesso à comida e água.
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Resultados
O sucesso da cirurgia foi validado por testes comportamentais. Todos os animais exibiram o comportamento típico de uma perda unilateral da função vestibular. Barril-rolamento espontâneo era evidente imediatamente após a cirurgia, sendo evocada por um sopro de ar sobre a cabeça ou um leve toque no corpo, na fase inicial de recuperação (vídeo 1). 3-d após a cirurgia, os animais movimentados mais inclinado para o lado lesado com ocasionais cai para o lado esquerdo. Nistagmo .......
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Discussão
Esta técnica é um método útil para a criação de perda súbita, permanente e completa função vestibular. Isso poderia ser usado para estudar patologias vestibulares, como neurite vestibular, um tumor acústico e a doença de Meniere. Muitos estudos têm usado essa técnica para estudar a plasticidade neuronal dos núcleos vestibulares ou o processo central relacionado5,17,18,19.
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Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Esta pesquisa foi apoiada por uma concessão da Coreia saúde tecnologia R & D projeto através da Coreia saúde indústria desenvolvimento Institute (KHIDI), financiado pelo Ministério da saúde & bem-estar, República da Coreia (número de concessão: HI15C2651).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| ASPIRADOR KB-012 | KOH BONG & CO., LTD. | KB-012 | de aspirador médico |
| : # 15 | Fine Science Tools | # 10015-00 | Lâminas para # 7 Cabos de bisturi, # 15 |
| Rebarbas de aço carbono | Ferramentas de ciências finas | # 19007-05 | Diâmetro do eixo: 2,3 mm, comprimento: 44 mm, pacote de 10 rebarbas |
| Carl Zeiss Surgical GmbH | Carl Zeiss | # 6627100863 | Microscópio cirúrgico |
| Dumont #3c | Fine Science Tools | #11231-20 | Ponta padrão 0,17 x 0,10 mm, 11 cm |
| Dumont #5SF | Fine Science Tools | #11252-00 | |
| Dumont #7B | Fine Science Tools | #11270-20 | Serrilhado 0,17 x 0,10 mm, 11 cm |
| Extra Fine Bonn: reto | Fine Science Tools | #14084-08 | Tesoura de íris, mais adequada para microdissecação sob alta ampliação |
| Tesoura de íris fina: reta | Fine Science Ferramentas | #14094-11 | Feito de aço inoxidável martensítico, combinado com molibdênio e vanádio |
| Finger Loop Ear Punch | Fine Science Tools | #24212-01 | 1 mm. Fornece estabilidade e controle para pesquisadores que usam o sistema de numeração |
| Hartman | Fine Science Tools | #13002-10 Largura da | ponta: 1 cm, serrilhada, 10 cm |
| Cabo de bisturi curto #7 Solid | Fine Science Tools | #10003-12 | #7 curto, 12 cm |
| Cauterizador de Vasos Pequenos | Fine Science Tools | #18000-03 | Ponta de substituição, faca reta, mantém o sangramento ao mínimo e, portanto, proporciona um campo cirúrgico livre de grampos e hemostáticos |
| Forte 207S | SAESHIN | 207S | Torque potente em baixa velocidade, disponível com controlador de pé de velocidade ou on/off |
| Tubos de sucção | JEUNGDO B& P CO., LTD. | H-1927-8 | Frazier, 18 cm |
| VICRYL | ETHICON | W9570T | Sutura cirúrgica estéril absorvível sintética |
| ciência fina | Weitlaner-Locktite | 17012-13 | Propagação máxima: 4,5 cm, 2 x 3 dentes rombos, 11 cm |
| Zoletil | Virbac, França | Tiletamina-zolazepam | |
| Rompun | Bayer | Xylazine | |
| Rimadyl | Pfizer | Carprofeno | |
| Septra | Pfizer | Trimetoprim-sulfonamida |
Referências
- Curthoys, I. S., Halmagyi, G. M. Vestibular compensation: a review of the oculomotor, neural, and clinical consequences of unilateral vestibular loss. Journal of Vestibular Research. 5 (2), 67-107 (1995).
- Smith, P. F., Curthoys, I. S.
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Reimpressões e permissões
