Preparação, procedimentos e avaliação da injeção de Plasma rico em plaquetas no tratamento da osteoartrose do joelho

Resumo

Osteoartrose do joelho é frequentemente visto no departamento de Ortopedia. Apresentamos em detalhe o processo de tratamento de osteoartrite do joelho inteiro com injeção de plasma rico em plaquetas, incluindo preparação, procedimentos e avaliação.

Resumo

Osteoartrose do joelho (KOA) é uma das doenças mais frequentemente encontradas no departamento de Ortopedia. Tratamentos não-cirúrgicos existentes têm um efeito limitado sobre a reparação da cartilagem e regeneração óssea. Plasma rico em plaquetas (PRP) é uma substância autóloga Bioativo que pode reparar a lesão da cartilagem e acelerar a regeneração óssea efetivamente. No entanto, relatórios de protocolos de preparação PRP em estudos clínicos é altamente inconsistente, com a maioria dos estudos, fornecendo informações suficientes para permitir que o protocolo a ser reproduzida. Nós descrevemos um método reproduzível de preparação PRP visualmente, o tratamento de KOA usando injeção intra-articular de PRP e métodos de avaliação do resultado. PRP foi preparado usando manual dupla centrifugação. A camada PRP foi extraída do sangue periférico e usada para injeção de cavidade articular do joelho. Avaliações incluíram avaliações das concentrações de plaquetas do sangue e os resultados clínicos. Preparação do PRP por centrifugação manual requer menos aparelhos e é menos dispendiosa do que o plasma filtração ou centrifugação utilizando equipamentos. O tempo de centrifugação do nosso método de dupla centrifugação foi 6 e 5 minutos para os respectivos centrifugações às forças de 800 e 1400 x g, respectivamente permitir a elaboração consistente de PRP padronizado. No entanto, um método manual é suscetível a erros do operador, e preparação do lote PRP não está disponível. Injeção intra-articular de PRP provou para ser um tratamento eficaz para a osteoartrose do joelho. O procedimento de tratamento inteiro levou menos de 30 minutos, a concentração de sangue plaquetas de PRP pode ser padronizada e tratamento foi provado para ser eficaz quando avaliada pelo acompanhamento.

Introdução

Osteoartrose do joelho (KOA) é uma das doenças mais frequentemente vistas no departamento de Ortopedia; 30% - 50% das pessoas com idade superior a 65 anos de experiência nesta doença¹. Atualmente, o tratamento conservador de KOA inclui principalmente a administração oral de drogas antiinflamatórias não-esteroides e drogas nutrientes de cartilagem, a injeção intra-articular de hialuronato de sódio e fisioterapia. No entanto, esses métodos não podem parar o processo de degeneração articular de joelho². Defeitos da cartilagem articular podem causar um desgaste da superfície articular, instabilidade articular e alterações metabólicas, que são parte da patogênese de KOA³. No entanto, devido à ausência de vasos sanguíneos, nervos e tecido linfoide na cartilagem articular, a recuperação após o dano é difícil. Um método eficaz de reparação da cartilagem é especialmente importante para o tratamento de KOA. O tratamento da osteoclasia também é um foco importante no tratamento de KOA.

Plasma rico em plaquetas (PRP) é uma substância Bioativo autóloga, e a aplicação de PRP para problemas de ossos e articulação está sendo cada vez mais estudada. A justificativa biológica para o uso clínico de PRP inclui seu efeito sobre a entrega local de fatores de crescimento e modificação da resposta inflamatória e seus efeitos positivos no⁴, de proliferação e diferenciação celular. Após a ativação após injeção intra-articular, PRP libera α-grânulo através da degranulação e segrega vários fatores de crescimento, incluindo o fator de crescimento derivado de plaquetas, o fator de crescimento transformador-β, o fator de crescimento semelhante à insulina, o fator de crescimento epidérmico, o fator de crescimento vascular endotelial e o fator de crescimento. Estas promover proliferação osteoblástica e condrócitos, inibir a degeneração da cartilagem, reforçar a estabilidade do osso da cartilagem e subcondral, regular o inibidor de tecido de expressão do gene da metaloproteinase e manter o equilíbrio entre a síntese e degradação de proteoglicanos^5,6. Portanto, PRP pode reparar a lesão da cartilagem e acelerar a regeneração óssea.

O resultado da injeção de PRP é influenciado por vários fatores, incluindo o local de amostragem⁷, o tipo de centrífuga preparação método⁸e o uso de anticoagulantes⁹ e ativadores¹⁰. Há aproximadamente 3 tipos métodos centrífugas para preparar o PRP. Centrifugação manual, centrifugação com base em equipamentos ou técnicas de filtração do plasma estão disponíveis, embora métodos manuais e baseados em equipamentos são os mais comumente usados. O método manual requer menos equipamento, é conveniente, é de baixo custo e é simples de executar (Figura 1). PRP é preparado por desempenho de centrifugação manual duas vezes. Anticoagulante e sangue periférico misto são centrifugados para separar hemócitos de plasma e plaquetas sanguíneas. Depois de eliminar os glóbulos vermelhos na camada inferior, o líquido sobrenadante é centrifugado para re-separação, dividindo-a em sobrenadante plasma pobre em plaquetas PRP médio e residuais subnatant células vermelhas do sangue. A camada média é usada para a injeção da cavidade articular do joelho (se a quantidade é insuficiente, parte do sobrenadante pode ser desenhado). Avaliações do método incluem avaliações de concentração de plaquetas do sangue e os resultados clínicos.

O relato de protocolos de preparação PRP em estudos clínicos é altamente inconsistente, e a maioria dos estudos não fornecem informações suficientes para permitir que o protocolo para ser reproduzido¹¹. Aqui, descrevemos um método reprodutível de preparação PRP e tratamento de KOA com injeção intra-articular do PRP, com avaliação do resultado. Critérios de inclusão foram pacientes com osteoartrose do joelho que têm alívio da dor pobre para medicamento analgésico simples (como o paracetamol) e tratamento conservador. Critérios de exclusão foram pacientes com distúrbio de drenagem linfática ou retorno venoso; pacientes com infecções de articulação de joelho; pacientes com Dermatose ou infecção na área da injeção; pacientes com febre; pacientes com anormalidade da função coagulante; pacientes com doença cardiovascular grave. O procedimento de tratamento todo leva menos de 30 minutos, e a concentração de sangue plaquetas de PRP é comprovada para alcançar uma medida padronizada. Sua eficácia é demonstrada através da avaliação dos resultados durante o seguimento de perto.

Protocolo

Os métodos descritos foram aprovados pela Comissão ética do Hospital Geral de Guangdong.

1. obter PRP por centrifugação Manual

1. Preparar o paciente em posição supina em uma sala de cirurgia estéril fluxo laminar com uma confortável sala de temperatura e umidade: temperatura é de 22 ° C e umidade do quarto é de 60%.
2. Use uma seringa de 1 mL para desenhar 0,2 mL de heparina de sódio (2 mL = 12.500 U) e em seguida umedeça uma seringa de 50 mL.
   Nota: 3 mL de citrato de sódio também é típico nesta etapa para substituir o sódio de heparina.
3. Equipar um torniquete, esterilizar o cotovelo 2 - 3 vezes e usar a seringa de 50 mL a úmido para retirar a veia de cotovelo 30 mL de sangue periférico.
4. Realize a primeira centrifugação.
   1. Divida o sangue periférico igualmente em dois tubos de centrífuga estéril de 50 mL.
   2. Colocar dois tubos em rotores horizontais na centrífuga, sob condições assépticas.
   3. Centrífuga para 6 minutos a 800 x g.
   4. Levar os rotores horizontais para fora, desgaste luvas estéreis e tirar os tubos de centrífuga.
   5. Observe as estratificações para certificar-se de que o sangue periférico é estratificado em duas camadas.
   6. Use uma seringa de 10 mL limpa para coletar o líquido sobrenadante destes tubos de centrífuga de dois para um tubo de centrifugação limpo.
5. Realize a segunda centrifugação.
   1. Use uma seringa de 10 mL limpa para adicionar uma quantidade equivalente de água estéril ou solução salina normal para outro tubo de centrifugação limpo para o equilíbrio. Colocar os tubos nos rotores horizontais. Marque-o um com o líquido da camada sobrenadante por Emplastro adesivo.
   2. Centrifugue por 5 minutos a 1400 x g.
   3. Pegue os rotores horizontais para fora, e observando as estratificações verificar que o líquido do tubo marcado é dividido em três camadas.
   4. Use uma seringa de 10 mL para retirar a camada de células granulares médio (rico em leucócitos, PRP layer) e a camada inferior do sobrenadante de 4 mL de líquido. Se a quantidade de camada média é suficiente, apenas retire 4 mL isso.
   5. Coloque 0,4 mL do líquido em um tubo estéril de anticoagulante (EDTA de₂K, 3,6 mg) para avaliação, deixando 3,6 mL de líquido remanescente na seringa.
      Nota: O protocolo pode ser pausado aqui.

2. intra-articular de PRP

1. Deixe a paciente em decúbito dorsal na mesa de operações de mentira e dobrar o joelho a 90 graus.
2. Localize o local de punção na margem inferior da patela e 1cm de ligamento patelar lateral. Use uma caneta para marcar o local.
3. Realizar esterilização de pele no local de punção, três vezes com anerdian III, luvas estéreis e cubra com uma toalha-buraco asséptica.
4. Coloque a seringa paralela ao planalto tibial e em seguida, executar a punção em ângulo de 45 graus. Introduza completamente a agulha na pele.
5. Injete a 3,6 mL de PRP da seringa para a cavidade articular do joelho.
6. Cobrir a posição de punção com gaze estéril e corrigi-lo com Emplastro adesivo.
7. Aplique pressão sobre o ferimento por 10 minutos. Observe para qualquer reação adversa grave durante 30 minutos.
8. Administre um total de três injeções em intervalos mensais.
   Nota: O protocolo pode ser pausado aqui.

3. no pós-operatório avaliação da injeção de PRP

1. Avalie a concentração de plaquetas no PRP.
   1. Use o 0,4 mL de PRP do tubo de anticoagulação (K₂EDTA, 3,6 mg).
   2. Analise a concentração de plaquetas do sangue do PRP usando um analisador automático de células sanguíneas.
2. Avalie o resultado pós-operatório da injeção PRP.
   1. Com uma consulta 1 dia antes de cada um dos três tratamentos, conduta mais acompanhar paciente 1 dia depois de cada tratamento, 3 dias após cada tratamento, 1 semana após cada tratamento, 1 mês após o terceiro tratamento, 3 meses após o terceiro tratamento e 6 meses após o terceiro tratamento.
   2. Use uma escala análoga visual (VAS), o Western Ontario e McMaster universidades osteoartrite Index (WOMAC), joelho sociedade Pontuação (KSS) e escala funcional do joelho Lysholm para avaliar o efeito no pós-operatório.

Resultados

Como resultado, as plaquetas contagem do PRP atingiu uma concentração padrão nível de 1121 x 10³/µL. Realizamos os 15 inquéritos de seguimento descritos no protocolo de um paciente masculino de 55 anos com início KOA. Era óbvio que esse resultado clínico precoce foi satisfatório após a administração intra-articular de PRP (Figura 2). No entanto, a eficácia de médio prazo foi ligeiramente inferior. Um efeito analgésico marcadamente significativo foi...

Discussão

A concentração de plaquetas no sangue humano normal é entre 150.000 / µ l e 350.000 / µ l, e acredita-se amplamente que plaquetários concentração de PRP deve alcançar 1.000.000 / µ l, que é de 3 a 5 vezes concentrações normal⁹. De acordo com o sistema de hierarquia de pata, acredita-se que o PRP não tem nenhum efeito óbvio quando a concentração de plaquetas do sangue é inferior a três vezes a concentração normal, enquanto o PRP tem um efeito inibidor quando sua concentração de plaquetas do sangue ...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Centrífuga	Eppendorf	5702
Tubo de centrífuga	CORNING	430828
Rotor horizontal	Eppendorf	LL080
Anerdian III	Shanghai Likang Desinfetante HiTech Co., LTD	310173	Desinfetar a pele
Seringa de 1ml	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.4*13 RWLB
Seringa de 10ml	KDL  Medical Equipment Co., LTD	1.2*38 TWSB
Seringa de 50ml	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.7*32 TWLB
Torniquete Médico	Changzhou Jinli Latex Products Co., LTD	0087-2011
Luvas cirúrgicas de borracha estéril de uso único	Shanghai jinxiang Latex Products Co., LTD	17060
Agulha de Sangue Descartável	KDL  Equipamento médico Co., LTD	0.55*20 L(II) RWLB
Heparina Sódio Injeção SPH	No.1 Bioquímica & Pharmaceutical Co., LTD	1706101	2ml:12500U
Jifro Gel Antisséptico para as Mãos Sem Enxágue Shanghai	Likang Desinfetante HiTech Co., LTD	311793
Cotonete Médico	Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., LTD	KZ3-12	Desinfeta a pele
10ml Solução salina normal	Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD	140211458
Analisador Automático de Células Sanguíneas	Beckman Coulter	LH-750
Tubo de	Estéril
Sangue, K2E 3.6mg)	Becton, Dickinson and Company	CNL17-COO56	Armazene em local fresco e seco dentro de 4 a 25 graus Celsius
Pinças	RWD CIÊNCIAS DA VIDA	F12006-10
Gaze Estéril	Guangdong Ze Chang Trade Co., LTD	170915
Adesivo Gesso	3M Transpore	1527C-0
Caneta Marcador de Pele	Guangzhou Mingjia Medical Device Manufacturing Co., LTD	10110