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Pesquisa sobre a consolidação da fratura é necessária para resolver um grande problema clínico e económico. Cada ano mais 12 milhões de fraturas são tratadas no Estados Unidos1, custando US $ 80 bilhões por ano2. A probabilidade de um macho ou fêmea a sofrer uma fratura ao longo da vida é de 25% e 44%, respectivamente3. Problemas associados com a consolidação da fratura são esperados para aumentar com comorbidades mais que a população envelhece. Para estudar e resolver este problema, modelos sólidos de geração da fratura e estabilização são necessários. Modelos de roedores são ideais para essa finalidade. Eles fornecem a relevância clínica e podem ser modificados para as condições específicas do endereço(ou seja, múltiplas lesões, fracturas abertas, fechadas, isquêmicas e infectadas). Além de replicar cenários clínicos, modelos animais de fratura são importantes para a compreensão da biologia óssea e em desenvolvimento de terapêuticas e dispositivos. No entanto, as tentativas para estudar as diferenças entre as intervenções podem ser complicadas pela variabilidade introduzida pela geração de fratura inconsistente. Assim, gerar fraturas reproduzíveis e consistentemente fechadas em modelos animais é essencial para o campo de pesquisa músculo-esquelética.
Apesar de controlar corretamente para potenciais heterogeneidade do assunto, garantindo o fundo genético apropriado, sexo, idade e condições ambientais, a produção de lesões ósseas consistentes clinicamente relevante é uma variável significativa que afectam reprodutibilidade que deve ser controlada. Comparações estatísticas usando inconsistentes fraturas são atormentadas com ruído experimental e uma alta variabilidade4; Além disso, a variabilidade de fratura pode resultar em morte desnecessária de animais devido à necessidade de aumentar o tamanho da amostra ou a necessidade de eutanásia em animais com fraturas cominutivas ou malpositioned. O objetivo do método aqui descrito é otimizar os parâmetros de geração de fratura que são específicos para o tipo de amostra e produzir uma fratura consistente localização e padrão.
Modelos atuais de geração de fratura caem em duas categorias amplas, cada um com suas próprias forças e fraquezas. Modelos de aberto-fratura (osteotomia) se submeter à cirurgia para expor o osso, após o qual uma fratura é induzida pela corte do osso ou enfraquecimento isso e depois quebrá-lo manualmente5,6,7,8. Os benefícios deste método são a visualização directa do local da fratura e um local de fratura mais consistente e padrão. No entanto, a relevância clínica e fisiológica da abordagem e mecanismo de lesão são limitadas. Além disso, o open métodos de geração de fratura requerem uma abordagem cirúrgica e encerramento com períodos prolongados, durante o qual os roedores estão expostos a um risco aumentado de contaminação.
Técnicas fechadas abordar muitas das limitações da técnica aberta. Fechado técnicas produzem fraturas usando um aplicados externamente um traumatismo que provoca lesão no osso e tecidos circundantes, mais semelhantes aos observados em lesões clínicas humanas. O método mais comum foi descrito por Bonnarens e Einhorn em 19849. Eles descreveram uma guilhotina ponderada, sendo usada para transmitir um trauma para quebrar o osso, sem causar quaisquer feridas de pele externa. Este método tem sido amplamente adotado para estudar o efeito da genética10,11, terapia farmacológica12,13,14,15, mecânica16, 17e fisiologia18,19,20 na consolidação óssea em camundongos e ratos. Enquanto o benefício de métodos fechados é fisiologicamente relevantes fraturas, rigor e reprodutibilidade experimental são limitados pela heterogeneidade de fratura. A geração de fratura inconsistente resulta em uma diferenciação entre grupos limitada, espécimes perdidos e um aumento em animais necessários para alcançar significância estatística.
Controlar a variabilidade na geração de fratura e estabilização é essencial para produzir resultados significativos. A fim de estudar adequadamente a biologia do reparo de fratura, é necessário um modelo de fratura simples, porém robusta. O modelo deve ser traduzível para roedores, tipos de osso (fêmur ou tíbias, por exemplo) e através de origens genéticas do mouse variável e induzidas mutações. Além disso, o procedimento ideal deve ser tecnicamente simples e produzir resultados consistentes. A heterogeneidade de fratura de endereço, o método descrito neste documento é a construção de um dispositivo de fratura bem controlados que pode ser usado para otimizar parâmetros e gerar fraturas consistentemente fechadas, independentemente da idade, sexo ou genótipo.