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Artigo de método

Aprendizagem avançada stress medo, um modelo robusto de roedor do transtorno de estresse pós-traumático

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DOI:

10.3791/58306

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13 de outubro de 2018

Neste artigo

Resumo

Aqui descrevemos a metodologia detalhada necessária para realizar experiências de aprendizagem (Autoprodutores) medo stress avançado, um modelo pré-clínicos de transtorno de estresse pós-traumático, em ratos e camundongos. O modelo utiliza aspectos do pavloviano medo condicionado e congelar-se como um índice do medo reforçado em roedores.

Resumo

Comportamentos de medo são importantes para a sobrevivência, mas desproporcionalmente altos níveis de medo podem aumentar a vulnerabilidade para o desenvolvimento de distúrbios psiquiátricos como transtorno de estresse pós-traumático (TEPT). Para entender os mecanismos biológicos da desregulação de medo no TEPT, é importante começar com um válido modelo animal da doença. Este protocolo descreve a metodologia necessária para realizar experiências de aprendizagem (Autoprodutores) medo stress avançado, um modelo pré-clínicos de PTSD, em ratos e camundongos. Autoprodutores foi desenvolvido para recapitular aspectos críticos de stress pós-traumático, incluindo a sensibilização a longo prazo da aprendizagem de medo causada por um estressor agudo. Aspectos de usos de Autoprodutores pavloviano medo condicionado mas produz uma resposta de medo sensibilizadas distintas e robusta muito maior do que o normal medo condicional respostas. O procedimento de trauma envolve a colocação de um roedor em uma câmara de condicionamento e administrar 15 choques sinalizados aleatoriamente distribuídos mais de 90 minutos (para experimentos de rato; para experimentos de rato, 10 sinalizado são utilizados choques aleatoriamente distribuídos mais de 60 minutos) . No dia 2, roedores são colocados em um romance de condicionamento contexto onde recebem um único choque; Então, no dia 3 são colocados no mesmo contexto como no dia 2 e testados para alterações em níveis de congelamento. Roedores que anteriormente receberam a exibição de trauma maior níveis de congelamento no teste dia comparado àqueles que receberam sem choques, no primeiro dia. Assim, com este modelo, uma experiência altamente estressante (trauma) produz medo extremo dos estímulos associados com o evento traumático.

Introdução

O medo é um comportamento crítico para a sobrevivência, permitindo que os indivíduos a reconhecer e responder às ameaças. No entanto, respostas de medo exagerado podem contribuir para o desenvolvimento de distúrbios psiquiátricos como transtorno de estresse pós-traumático (TEPT). Uma característica de stress pós-traumático é uma resposta exagerada a estressores suaves, particularmente aqueles que relembram o trauma original e uma tendência a desenvolver novos medos1,2. No laboratório, o medo é medido frequentemente através de congelamento de comportamento, que é um índice confiável e ethologically válido do me....

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Protocolo

1. temas

  1. Ratos
    1. Ordem de ratos a chegar quando eles são aproximadamente 90 dias velhos e single-alojados em gaiolas de rato padrão.
      Nota: É aconselhável alojamento simples, como o alojamento em grupo produz variabilidade devido a interações entre os animais na jaula para casa, particularmente após a exposição de estresse. Autoprodutores foi demonstrada em ratos machos e fêmeas, em Long-Evans e ratos Sprague Dawley e em ratos com 19 dias de idade7,10.
    2. Atribuir aleatoriamente animais pelo menos duas condições: trauma (n = 8) e nenhum trauma (n = 8) (ver Rao et al.

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Resultados

Resultados do teste de contexto de trauma no dia 2 são mostrados na Figura 1. Animais na condição de trauma apresentaram níveis significativamente mais elevados de congelamento no contexto A em comparação com os controles sem trauma, indicando a aquisição do medo para o contexto de trauma [ratos: F(1,17) = 23.58, p < 0,01; ratos: F(1,14) = 666.50, p < 0,0001]. Congelamento durante o período de base antes que o único choque no contexto .......

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Discussão

Autoprodutores é um robusto modelo comportamental de PTSD, o que pode ser instaurada em ratos e camundongos e pode ser usado para estudar as respostas de medo sensibilizadas que caracterizam PTSD. Após estresse pós-traumático, roedores mostram uma resposta de medo aumento num contexto distintamente diferente somente após esse contexto é emparelhado com um estressor suave que serve como um lembrete de uma experiência traumática anterior. Após o estresse pós-traumático roedores sem surpresa apresentam altos níveis de medo,.......

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Divulgações

Dr. Fanselow é membro fundador do Conselho de Neurovation Labs.

Agradecimentos

Este trabalho foi financiado pela National Instituto de saúde R01AA026530 (MSF), centro de Staglin para o cérebro e saúde comportamental (MSF), NRSA-F32 MH10721201A1 e NARSAD 26612 (AKR) e NSF DGE-1650604 (SG).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Câmara de Condicionamento de Medo para Pisos de Baixo PerfilMed Associates Inc.VFC-008-LPCâmara de condicionamento do medo
Cubículo atenuante de somMed Associates Inc.NIR-022SDCabine de atenção de som para evitar a intrusão de ruído externo
NIR/Caixa de Controle de Luz BrancaMed Associates Inc.NIR-100VRcapaz de fornecer luz branca e infravermelha
próxima NIR VFC Light BoxMed Associates Inc.NIR-100L2Luminária de casa branca
Windex Limpador de Vidros OriginalWindexSolução para limpeza e perfumação de câmaras de condicionamento de medo entre animais
Ácido acéticoFisher ScientificA38-212Solução para limpeza e perfumação de câmaras de condicionamento de medo entre animais
A-Frame Chamber InsertMed Associates Inc.ENV-008-IRTInserto triangular de acrílico preto para diferenciar o layout interno dos contextos A e B
Inserto de parede curvoMed Associates Inc.VFC-008-CWIFolha de plástico branco para diferenciar o layout interno dos Contextos A e B
Piso de grade contextual de baixo perfil com hastes de grade de 1/8" para MouseMed Associates Inc.VFC-005APiso de grade plana para ratos
Piso de grade contextual de baixo perfil com hastes de grade alternadas de 1/8 "e 3/16" MouseMed Associates Inc.VFC-005-SPiso de grade escalonado para mouses
Piso de grade contextual de baixo perfil com hastes de grade escalonadas de 1/8" para mouseMed Associates Inc.VFC-005A-LPiso de grade alternada para
camundongos Piso de grade contextual de baixo perfil com hastes de grade de 3/16" para RatMed Associates Inc.VFC-005 Piso degrade plana para ratos
Piso de grade contextual de baixo perfil com hastes de grade alternadas de 3/16 "e 3/8"Med Associates Inc.VFC-005-LPiso de grade alternada para ratos
Piso de grade contextual de baixo perfil com hastes de grade escalonadas de 3/16" para RatMed Associates Inc.VFC-005-SPiso de grade escalonada para ratos
Panelas de metalMed Associates Inc.Panelas de metal para coletar excrementos sob o piso da grade
Estimulador Aversivo Autônomo / ScramblerMed Associates Inc.ENV-414SGerador de choque e embaralhador para aplicação de choque no pé
MultímetroFluke87-5Ferramenta para medir a amplitude do choque no pé
VideoFreeze SoftwareMed Associates Inc.Software SOF-843VideoFreeze para controlar a entrega de choques
Câmera de vídeo monocromática Firewire de alta velocidadeMed Associates Inc.VID-CAM-MONO-4Câmera de vídeo capaz de gravar em luz infravermelha próxima
Caixa de controle de luz

Referências

  1. Bremner, J. D., Krystal, J. H., Southwick, S. M., Charney, D. S. Functional neuroanatomical correlates of the effects of stress on memory. Journal of Traumatic Stress. 8 (4), 527-553 (1995).
  2. Dykman, R. A., Ackerman, P. T., Newton, J. E. ....

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Reimpressões e permissões

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