Aqui, um protocolo é apresentado para a seleção não-destrutiva rápida de genótipos do algodão para a resistência do nematóide do reniformes. O protocolo envolve o exame visual das raízes de mudas de algodoeiro infectadas com nematoides para determinar a resposta da infecção. O disparo vegetativo de cada planta é então propagado para recuperar plantas para a produção de sementes.
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Artigo de método
Triagem de genótipos de algodão para resistência ao nematódeo reniforme
Neste artigo
Resumo
Resumo
Um rápido não-destrutivo reniformes nematódeo (Rotylenchulus reniformis) triagem protocolo é necessário para o desenvolvimento de algodão resistente (Gossypium hirsutum) variedades para melhorar a gestão de nematódeos. A maioria dos protocolos envolve a extração de nematoides Vermiformes ou ovos do sistema radicular do algodão ou do solo de potting para determinar a densidade populacional ou a taxa de reprodução. Essas abordagens são geralmente demoradas com um pequeno número de genótipos avaliados. Uma aproximação alternativa é descrita aqui em que o sistema da raiz é examinado visualmente para a infecção do nematoide. O protocolo envolve a inoculação de plântulas de algodão 7 dias após o plantio com nematoides Vermiformes e a determinação do número de fêmeas presas ao sistema radicular 28 dias após a inoculação. Os dados são expressos como o número de fêmeas por grama de peso de raiz fresca para ajustar para a variação no crescimento radicular. O protocolo fornece um método excelente para avaliar a resistência do hospedeiro-planta associada com a habilidade do nematoide de estabelecer um local da infecção; Entretanto, a resistência que dificulta a reprodução do nematoide não é avaliada. Assim como outros protocolos de triagem, a variação é comumente observada na infecção por nematoides entre genótipos individuais dentro e entre experimentos. Os dados são apresentados para ilustrar o intervalo de variação observado com o protocolo. Para ajustar essa variação, os genótipos de controle são incluídos em experimentos. No entanto, o protocolo fornece um método simples e rápido para avaliar a resistência da planta hospedeira. O protocolo foi usado com sucesso para identificar acessos resistentes do G. coleta de germoplasma arboreum e avalia populações Segregantes de mais de 300 indivíduos para determinar a genética da resistência. Também foi desenvolvido um método de propagação vegetativa para recuperação de plantas para melhoramento de resistência. Após a remoção do sistema radicular para a avaliação do nematoide, o disparo vegetativo é replantado para permitir o desenvolvimento de um novo sistema radicular. Mais de 95% dos brotos tipicamente desenvolvem um novo sistema radicular com plantas atingindo maturidade.
Introdução
Rotylenchulus reniformis (Linford e Oliveira), comumente referida como o nematoide reniforme, é uma das principais espécies de nematódeos parasitárias presentes nos solos do sudeste dos Estados Unidos1,2,3. O nematoide é um semi-endoparasita obrigatório e sedentário, exigindo que uma planta hospedeira Complete seu ciclo de vida2,4. Os nematoides fêmeas pré-adultos Vermiformes penetram no sistema radicular do hospedeiro para estabelecer um local de alimentação no estele2,3
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Protocolo
1. manutenção de uma fonte de R. reniformis Inóculo
- Encha os potenciômetros da argila do terracota do Terra (15 cm no diâmetro, 13,5 cm na altura) com uma mistura pasteurizada vapor do Loam arenoso de 1 parte e da areia de 2 porções. Plante um tomate suscetível (Solanum Lycopersicon) variedade em cada potenciômetro e coloc os potenciômetros em uma estufa.
Nota: outras variedades de plantas suscetíveis, como o algodão, podem ser usadas em vez de tomate. - Inocular as plantas de tomate com nematoides Vermiformes reniformes (ver passo 3,3). Manter as plantas na estufa a uma temperatura de aproximadamente 28 ° c.
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Resultados
A infecção por Rotylenchulus reniformis do sistema radicular para duas variedades é apresentada na Figura 1. Relativamente menos nematóides reniformes fêmeas são capazes de estabelecer um local de alimentação para o genótipo de algodão resistente em comparação com o genótipo suscetível. A variação no crescimento radicular é comum entre os acessos, como ilustrado na Figura 2. Essa variação medida pelo peso da raiz fresca .......
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Discussão
É necessário um protocolo de triagem eficaz para 1) a identificação de R. genótipos de algodão resistentes à reniformis , a fim de avaliar a genética da resistência e 2) a criação de variedades resistentes. A maioria dos protocolos avalia R. densidades populacionais de reniformis ou taxas de reprodução por extração de nematoides Vermiformes ou ovos do sistema radicular do algodão ou do solo potting8,11,
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Esta pesquisa foi financiada pelo departamento de agricultura dos Estados Unidos, serviço de pesquisa agrícola. Menção de nomes comerciais e produtos comerciais neste artigo são exclusivamente para fins de fornecer informações específicas e não implicam recomendações ou endossos pelo departamento de agricultura dos EUA. USDA é um provedor de oportunidades iguais e empregador. Os autores não têm conflito de interesse em declarar. A assistência técnica foi fornecida pela Kristi Jordan.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Ray Leach Empreiteiro | Stuewe and Sons Inc. | SC10U | |
| Stuewe and Sons Inc. | RL98 | ||
| Lixe | várias | ||
| bolas de algodão | várias | ||
| etiquetas de plantas Pylon 4 polegadas (4 in L x 5/8 in W) | Pylon Platics | L-4-W | Qualquer marca ou fornecedor é aceitável. |
| Recipientes de amostra de 4 oz. | Fisher Scientific | 16-320-731 | Qualquer marca ou fornecedor é aceitável. |
| Corante alimentar vermelho | McCormick & Co., Inc. | ||
| 1 mL de pontas de pipeta | vários | ||
| recipientes de 10 L | vários | baldes baratos funcionam bem. | |
| Vasos de 6 L | Suprimentos para berçário Inc. | Poly-Tainer-Can No2A | Qualquer marca ou fornecedor é aceitável. Diferentes tamanhos de vasos podem ser usados |
| Meios de envasamento | Sun Gro Horticulture | Metro-Mix 360 | Qualquer marca ou fornecedor é aceitável. |
| Fertilizante | Everris NA Inc. | Osmocote Plus | Qualquer marca ou fornecedor é aceitável. |
| Recipiente de plástico (73,6 cm C x 45,7 cm L x 15,2 cm P) | Rubbermaid | 3O29 | Qualquer marca ou fornecedor é aceitável. |
Referências
- Heald, C. M., Robinson, A. F. Survey of current distribution of Rotylenchulus reniformis. in the United States. Journal of Nematology. 22 (4), 695-699 (1990).
- Koenning, S. R., Wrather, J. A., Kirkpatrick, T. L., Walker, N. R., Starr, J. L., Mueller, J. D. Plant-parasitic nematodes attacking cotton in the United States: old and emerging ....
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Reimpressões e permissões
