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Artigo de método

Meso-escala Particle Image Velocimetry estudos de Neurovascular flui em Vitro

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DOI:

10.3791/58902

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3 de dezembro de 2018

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* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Aqui nós apresentamos métodos simplificados para fabricar fantasmas neurovascular transparente e caracterizando o fluxo nele. Destaca-se vários parâmetros importantes e demonstrar sua relação com a precisão do campo.

Resumo

Velocimetria por imagem (PIV) é usada em uma ampla variedade de campos, devido a oportunidade que prevê precisamente Visualizar e quantificar os fluxos através de uma grande gama de spatiotemporal. No entanto, sua implementação geralmente requer o uso de instrumentação caro e especializado, o que limita sua utilidade mais ampla. Além disso, dentro do campo da bioengenharia, em vitro estudos de visualização de fluxo também são frequentemente mais limitado pelo alto custo dos espectros de tecido comercialmente origem que recapitular desejadas estruturas anatômicas, particularmente para aqueles que abrangem o regime de mesoescala (ou seja, submillimeter para escalas de comprimento milímetro). Neste documento, apresentamos um protocolo experimental simplificado desenvolvido para lidar com essas limitações, os elementos-chave dos quais incluem 1) um método de custo relativamente baixo para a fabricação de mesoescala espectros de tecido usando impressão 3-d e carcaça do silicone e 2) uma quadro de análise e processamento de imagem de código-fonte aberto que reduz a demanda sobre a instrumentação para medir os fluxos de mesoescala (ou seja, velocidades de até dezenas de milímetros/segundo). Coletivamente, isso diminui a barreira de entrada para nonexperts, aproveitando recursos já à disposição de muitos pesquisadores de bioengenharia. Nós demonstratethe aplicabilidade do presente protocolo no âmbito da caracterização do fluxo neurovascular; no entanto, espera-se que seja relevante para uma ampla gama de aplicações de mesoescala em Bioengenharia e além.

Introdução

PIV é amplamente utilizado na mecânica de fluidos experimental para a visualização fluxo e investigações quantitativas de movimentos fluidos que variam em escala de comprimento de atmosférico a fluxos microcirculatory1,2,3. Enquanto os detalhes de sua implementação podem variar tão amplamente como suas aplicações, um aspecto comum a quase todos os estudos PIV é o uso da imagem de vídeo de partículas de traçador semeado dentro do fluido de trabalho, seguido por uma análise por pares de quadros de imagens consecutivas para extrair as características de fluxo desejada. Normalmen....

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Protocolo

1. fabricação do molde Sacrificial ABS-baseado

  1. Desenha um modelo inverso do fantasma tecido desejado utilizando software CAD.
  2. Imprima o modelo usando uma impressora 3-d com ABS como o material de construção.

2. com base em PDMS Vascular fabricação de fantasma

  1. Mistura
    1. Misture a base prepolymer PDMS e agente de cura em uma proporção de 10:1 (por peso); uma mistura de 66G fornece material suficiente para a fabricação de fantasmas com volumes de até 50 cm3.
    2. Coloque a mistura num exsicador de vácuo para 60 min para desgaseificar e minimizar o aprisionamento de ....

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Resultados

A Figura 2 ilustra o processo de fabricação de fantasma de tecido PDMS. Os phantoms projetados neste documento destinam-se para o estudo do fluxo em aneurismas idealizados de pescoço largo, sacular, intracranianas, bem como artérias de perforator ramificação proximal. Design adicional importantes características incluem 1) um reservatório comum que todos os navios que desaguam, para garantir o egresso fluido livre do phantom - caso contrário, formação de gotí.......

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Discussão

O protocolo descrito aqui contornos de um método simplificado para a realização de estudos PIV para visualizar neurovascular flui em dimensões fisiologicamente relevantes e de condições de fluxo em vitro. Ao fazê-lo, serve para complementar protocolos relatados por outras pessoas que também têm focado simplificando a quantificação de campos vetoriais, mas dentro de contextos muito diferentes que exigem que a consideração de muito maior comprimento escalas de25 ou menor fluxo taxas de

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Divulgações

Os autores não têm nada a declarar.

Agradecimentos

Os autores reconhecem suporte parcial para este projeto fornecido por uma concessão de semente colaborativo do escritório de pesquisa e desenvolvimento económico em UC Riverside.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Software CAD Solidworks 2015Dassault SystemsN/A 
Kit Dow Corning Sylgard 184 AdesivoEllsworth184 SIL ELAST KIT 3.9KGKit PDMS
Impressora 3DStratasys Dimension EliteStratasys9180-00105
P430 Modelo Material CartuchoStratasys340-21202 
P400 SR Material de Suporte Solúvel CartuchoStratasys340-30200Material de Suporte
CleanStation DT3PM3 Technologies00-00300RBase bath
Lindberg Blue M LGO Box Furnace Thermo ScientificLB305745MForno
21G BD PrecisionGlide AgulhaBetcon DickensonBD 305167Segmento de molde perfurador ramificado
Dessecador (Vácuo)Polylab55205Dessecador
Branson 1800 Utrasonic LimpezaBransonCPX-952-116RSonicador
AcetonaFisher ChemicalA9494Acetona
Álcool IsopropolFisher ChemicalA4514Álcool Isopropol
GlicerolFisher ChemicalGW33500Glicerol
10um Poliestireno Amarelo-Verde Partículas FluorescentesMagspherePSF-010UMContas fluorescentes
Phantom Miro Vision ResearchMiro M310Microbomba de câmera de alta velocidade
Cole-Parmer81101Bomba de recirculação
Leica DM2000Leica MicrosystemsDM2000Microscópio fluorescente
Leica 10X ObjetivaLeica Microsystems506259Objetiva para perfurador
Objetiva Leica 2.5X ObjetivaLeica Microsystems11506083 saco de aneurisma
Leica Blue Filter Cube L5Leica Microsystems513840Blue filter cube
Leica EL6000Leica Microsystems11504115Fonte de luz
AlconoxAlconox Inc1104-1Detergente
ImageJNIHN/ASoftware de análise de imagem de código aberto
https://imagej.nih.gov/ij/
Velocimetria de imagem de partículas Plugin PIVQingson TsengN/Ahttps://sites.google.com/site/qingzongtseng/piv
Material de construção ABS

Referências

  1. Grant, I. Particle image velocimetry: A review. Proceedings of the Institution of Mechanical Engineers, Part C: Journal of Mechanical Engineering Science. 211 (1), 55-76 (1997).
  2. Lindken, R., Rossi, M., Große, S., Westerweel, J.

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Reimpressões e permissões

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