Após a verificação pelo sangue-oxigénio-dependente de nível funcional de ressonância magnética (fMRI bold (realce)) que a área correspondente do córtex campo barril somatossensorial (chamada S1BF) corretamente é ativado, o principal objetivo deste estudo é quantificar o teor de lactato flutuações nos cérebros rato ativado por espectroscopia de ressonância magnética de prótons localizados (1H-MRS) em 7 T.
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Artigo de método
Funcionais de ressonância magnética espectroscopia em 7 T no córtex de barril de rato durante a ativação dos whiskers
Neste artigo
Resumo
Resumo
Espectroscopia de ressonância magnética nuclear (NMR) oferece a oportunidade de medir metabólito cerebral conteúdo em vivo e de forma não invasiva. Graças a evolução tecnológica ao longo da última década e o aumento da intensidade do campo magnético, é agora possível obter boa resolução espectros na vivo no cérebro de ratos. Neuroenergetics (ou seja, o estudo do metabolismo cerebral) e, especialmente, metabólicas interações entre os diferentes tipos de células têm atraído cada vez mais interesse nos últimos anos. Entre estas interações metabólicas, a existência de um serviço de transporte de lactato entre neurônios e astrócitos ainda é debatida. É, assim, de grande interesse para realizar espectroscopia de ressonância magnética funcional próton (1H-MRS) em um modelo do rato de lactato de monitor e ativação do cérebro. No entanto, o pico de lactato de metila sobrepõe-se picos de ressonância de lipídios e é difícil de quantificar. O protocolo descrito abaixo permite metabólico e lactato flutuações para ser monitorado em uma área do cérebro ativada. Ativação cerebral é obtida pela estimulação dos whiskers e 1H-MRS é executada no córtex ativado barril correspondente, cuja área é detectada usando sangue-oxigénio-dependente de nível ressonância magnética funcional (fMRI bold (realce)). Todas as etapas são descritas: a escolha dos anestésicos, bobinas e sequências, alcançar a estimulação eficiente whisker diretamente no ímã e processamento de dados.
Introdução
O cérebro possui mecanismos intrínsecos que permitem a regulação do seu principal substrato (ou seja, glicose), tanto por sua contribuição e sua utilização, dependendo de variações na atividade cerebral local. Embora a glicose é o substrato principal energia para o cérebro, experimentos realizados nos últimos anos têm mostrado que lactato, que é produzido pelos astrócitos, poderia ser um substrato de energia eficiente para os neurônios. Isto levanta a hipótese de uma nave de lactato entre astrócitos e neurônios1. Conhecido como ANLS, para transporte de lactato neurônio astrocyte2, a teoria é ainda altamente cont....
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Protocolo
Todos os procedimentos de animais foram conduzidos em conformidade com as diretrizes de Experimentação Animal da Directiva do Conselho das Comunidades Europeias de 24 de novembro de 1986 (86/609/CEE). O protocolo conheceu as diretrizes éticas do Ministério francês de agricultura e florestas e foi aprovado pelas comissões de ética locais (Comitê d 'éthique pour l'' expérimentation Animale Bordeaux n ° 50112090-A).
Nota: Durante as medições do senhor, um nível adequado de anestesia e monitorização fisiológica (temperatura corporal, frequência respiratória) são requisitos indispensáveis.
1. os animais
- Use ....
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Resultados
Este protocolo permite a quantificação das flutuações do metabólito durante a ativação cerebral, que é obtida pela estimulação dos whiskers certo diretamente no imã.
Neste estudo, o objetivo geral de fMRI bold (realce) foi verificar que a estimulação dos whiskers era eficiente, para visualizar a área de S1BF registrada e para localizar corretamente o voxel para 1H-fMRS. O dispositivo construído para ativação whisker é.......
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Discussão
O córtex de tambor, também chamado S1BF para o córtex somatossensorial ou barril de campo, é uma região dentro da camada cortical IV que pode ser observada usando o citocromo c oxidase coloração9, e sua organização é bem conhecida, uma vez que foi amplamente descrito 10,11. Um vibrissa é conectado a um barril, no qual cerca de 19.000 neurônios organizam-se em uma coluna de12. O caminho do córtex whisker-para-barril .......
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Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Este trabalho foi financiado pela subvenção LabEx trilha, referência ANR-10-LABX-57 e um franco-suíço ANR-FNS concede referência ANR-15-CE37-0012. Os autores Aurélien Trotier agradecer seu suporte técnico.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Seringa de 0,5 mL com agulha | Becton, Dickinson and Company, EUA | 2020-10 | 0,33 mm (29 G) x 12,7 mm |
| 1H bobina de superfície de espectroscopia | Bruker, Ettlingen, Alemanha | T116344 | |
| 7T Sistema Bruker Biospec | Bruker, Ettlingen, Alemanha | 70/20 USR | |
| Arduino Uno baseado em dispositivo pulsante | feito sob medida | ||
| Atipamezol | Vé toquinol, S.A., França | V8335602 | Antisedan, 4,28 mg |
| Máscara respiratória | feita | ||
| Pomada para os olhos | TVM laboratoire, França | 40365 | Gel Ocry 10 g |
| Câmara de indução | feita sob medida | 30x17x15 cm | |
| Tubo flexível de entrada | Gardena, Alemanha | 1348-20 | 4,6 mm de diâmetro, 3m de comprimento |
| Bomba de isoflurano, vaporizador da série Modelo 100, T3 Surgivet clássico | , Harvard Apparatus | WWV90TT | da OH 43017, EUA |
| Isoflurano, líquido para inalação | Vertflurano, Virbac, França | QN01AB06 | 1000 mg/mL |
| KD Scientific bomba de seringa | KD sientific, Holliston, EUA | Legato 110 | |
| LCModel software | LCModel Inc., Ontário, Canadá | 6.2 | |
| Cloridrato de medetomidina | Vé toquinol, S.A., França | QN05CM91 | Domitor, 1 mg/mL |
| Rolo de micropore de gesso adesivo | 3M micropore, Minnesota, Estados Unidos | MI912 | |
| Rolo de micropore de gesso adesivo | 3M micropore, Minnesota, Estados Unidos | MI925 | |
| Sistema de monitoramento de parâmetros fisiológicos | SA Instruments, Inc, Stony Brook, NY, EUA | Modelo 1025 | |
| NaCl | Fresenius Kabi, Alemanha | B05XA03 | 0,9 % 250 mL |
| Tubo flexível de saída | Gardena, Alemanha | 1348-20 | 4,6 mm de diâmetro, 4 m de comprimento |
| Software Paravision | Bruker, Ettlingen, Alemanha | 6.0.1 | |
| Cateter intravenoso periférico | Terumo, Shibuya, Tóquio, Japão | SP500930S | 22 G x 1", 0,85x25 mm, 35 mL/min |
| Bobina de cabeça de rato | Bruker, Ettlingen, Alemanha | ||
| Heparina sódica, solução injetável | Choai, Sanofi, Paris, França | B01AB01 | 5000 UI/mL |
| Válvulas solenóides de controle, válvula de êmbolo 2/2 vias de ação direta | Burkert, Alemanha | 3099939 | Tipo de modelo 6013 |
| Seringa Terumo de 2 ml | Terumo, Shibuya, Tóquio, Japão | SY243 | com agulha de 21 g x 5/8" |
| Seringa Terumo 5 mL | Terumo, Shibuya, Tóquio, Japão | 05SE1 | |
| Ratos Wistar RJ-Han | Janvier Laboratories, França |
Referências
- Pellerin, L., et al. Activity-dependent regulation of energy metabolism by astrocytes: an update. Glia. 55, 1251-1262 (2007).
- Pellerin, L., Magistretti, P. J.
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Reimpressões e permissões
