Aqui, apresentamos um protocolo para coletar os voláteis de fragrâncias florais de flores florescendo, usando um procedimento de amostragem não destrutivo.
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Artigo de método
Coleção rápida de voláteis florais da fragrância usando uma técnica da coleção do volatile do Headspace para a amostragem térmica da desorção de GC-MS
Neste artigo
Resumo
Resumo
As fragrâncias de muitas famílias da flor foram amostradas e os temporários analisados. Conhecer os compostos que compõem as fragrâncias pode ser um passo importante para a conservação de flores que estão ameaçadas ou ameaçadas de extinção. Porque a fragrância floral é crítica para atrair polinizadores, este método poderia ser usado para compreender melhor ou realçar a polinização. Apresentamos um protocolo usando um filtro portátil de ar a carvão e vácuo para coletar voláteis de fragrâncias florais, que são então analisados por um GC-MS. Usando este método, os voláteis da fragrância podem ser amostrados usando um método não destrutivo com uma máquina que seja transportada facilmente. Esta metodologia utiliza um procedimento de amostragem rápida, reduzindo o tempo de amostragem de 2-3 horas para aproximadamente 10 minutos. Usando GC-MS, os compostos de fragrância saem podem ser identificados individualmente, com base em padrões autênticos. As etapas utilizadas para a coleta de dados de fragrâncias e controle são apresentadas, desde a configuração de material até a coleta da saída de dados.
Introdução
As flores produzem tipicamente uma fragrância usada para atrair polinizadores. Estas fragrâncias são compostas de muitos compostos químicos todos agindo juntos como uma mistura floral1,2,3. Sem estas fragrâncias, as flores seriam menos prováveis passar sobre sua informação genética usando polinizadores. A fragrância floral foi documentada em muitas famílias de plantas com flores, com orchidaceae sendo uma das famílias mais comuns estudadas4. Para compreender o papel da fragrância floral na polinização, é importante coletar e analisar nondestru....
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Protocolo
NOTA: Perfumes ou loções perfumadas e produtos não devem ser usados durante qualquer um desses procedimentos.
1. Seleção de flores
NOTA: As flores usadas podem naturalmente crescer no ambiente ou mantidas condições ambientais artificiais. Temperatura, umidade e nível de luz durante a coleta podem variar com base nas espécies de flores específicas usadas e que tipo de dados está sendo coletado. Por exemplo, os dados foram coletados durante o dia e à noite para a mesma flor para determinar se a fragrância varia ao longo da hora do dia, e coletados a partir de flores in situ e estufa.
- Selecione uma flor qu....
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Resultados
Os dados representativos do GC-MS são mostrados como um cromatograma na Figura 1. Além do cromatograma, também é fornecido um arquivo de dados de resultados(Arquivo Suplementar 1). Este arquivo de dados fornece o tempo de retenção para cada pico (RT), e uma identificação do composto que é composto (Biblioteca / ID). Picos entre 10:00 e 15:00 minutos são voláteis florais, devido ao peso molecular dos compostos10. Os números acima dos picos significam o.......
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Discussão
Embora esta técnica seja incrivelmente valiosa para sua velocidade de amostragem e portabilidade, uma limitação é usá-la para espécies epifíticas, ou aquelas que crescem em árvores e não do solo. No estudo original10,uma das flores amostradas foi epifífita. Porque a máquina é demasiado pesada pendurar livremente, uma base estável, elevada deve ser feita para a amostragem. Além disso, a máquina pode ser conectada a uma tomada elétrica ou a bateria, por isso, se houver amostragem de campo prolongada.......
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Divulgações
Os autores declaram nenhum conflito de interesses.
Agradecimentos
USDA-ARS Research Project número 6036-22000-028-00D. O uso de nomes de comércio, empresa ou corporação nesta publicação é para a informação e conveniência do leitor. Tal uso não constitui um endosso oficial ou aprovação pelo Departamento de Agricultura dos Estados Unidos ou pelo Serviço de Pesquisa em Agricultura de qualquer produto ou serviço com exclusão de outros que possam ser adequados. Além disso, o Departamento de Biologia da Universidade da Flórida,Lewis e a Varina Vaughn Fellowship em Orchid Biology (2017) e uma Bolsa de Pesquisa de Pós-Graduação da Universidade da Flórida (2014-2018) também forneceram financiamento. Agradecemos também Cindy Bennington da Uni....
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| União de anteparo | Cole-Palmer | UX-06390-10 | |
| FEP tubulação | Cole-Palmer | UX-06407-60 | |
| Cromatografia gasosa | Hewlett Packard | 6890 | |
| Lã de vidro, Silanized | Sigma-Aldrich | 20411 | |
| Forro de entrada | Agilent | 5062-3587 | |
| Espectrômetro de massa | Hewlett Packard | 5973 | |
| Saco de forno Reynolds Reynolds | Consumer Products | Tamanho Turquia Tenax | |
| Adsorvente de polímero poroso | Sigma-Aldrich | 11982 |
Referências
- Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques. Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).
- Dudareva, N. A., Pichersky, E. Biology of floral scent. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).
- Altenburger, R., Matile, ....
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Reimpressões e permissões
