Processo de moldagem baseados em molhado-fiação de gelatina para regeneração de tecidos

Resumo

Desenvolvemos e descrever um protocolo baseado no conceito de fiação úmida, para a construção de biomateriais baseados em gelatina, usada para a aplicação da engenharia de tecidos.

Resumo

Este artigo apresenta um método de baixo custo para fabricar gelatina, como um polímero natural, em fibras monofilamento ou outras formas adequadas. Através da fiação método molhado, fibras de gelatina são fabricadas por extrusão suave em um meio adequado de coagulação. Para aumentar a superfície funcional destas fibras de gelatina e sua capacidade de imitar as características dos tecidos, a gelatina pode ser moldada em forma de tubo referindo-se a este conceito. Examinado por testes in vitro e in vivo, os tubos de gelatina demonstram um grande potencial para aplicação em engenharia de tecidos. Atuando como um material de enchimento adequado lacuna, gelatina de tubos podem ser usados para substituir o tecido na área danificada (por exemplo, no sistema nervoso ou cardiovascular), bem como a promover a revitalização, fornecendo uma substituição direta de células-tronco e circuitos neurais. Este protocolo fornece um procedimento detalhado para a criação de um biomaterial, baseado em um polímero natural, e sua implementação deverá beneficiar muito o desenvolvimento de polímeros naturais correlativos, que ajudam a perceber as estratégias de regeneração do tecido.

Introdução

O mais recente desenvolvimento na regeneração de tecidos envolve a aplicação de engenharia de tecidos, o que representa um desafio para a melhoria de novas estratégias terapêuticas em tratamentos médicos. Por exemplo, o limitado potencial de regeneração do sistema nervoso, seguir lesão ou doença, coloca um problema de saúde significativo em todo o mundo. Devido à complexidade dos processos fisiopatológicos associados com o sistema nervoso, o uso de auto-enxerto tradicional ou a execução de cirurgia de estabilização tem sido mostrada para oferecer benefícios em termos de resultados funcionais, mas não há nenhuma evidência forte para os efeitos de fixação da coluna vert....

Protocolo

Os tecidos gordos foram obtidos em cirurgias ortopédicas como certificada pelo institucional Review Board do Tri-serviço geral Hospital, Taipei, Taiwan, R.O.C. procedimentos envolvendo assuntos animais foram aprovados pelo Comitê de cuidado Animal nacional Centro médico de defesa, Taiwan (R.O.C).

1. Umedeça girando o processo

1. Preparação da solução
   1. Dissolva 5 g de gelatina em pó em 100 mL de água bidestilada para obter a concentração da solução de 5% (p/v).
   2. Agite a mistura lentamente a 60-70 ° C durante a noite para conseguir uma dispersão homogênea completamente sem quaisquer bolhas.

Resultados

Neste estudo, temos desenvolvido com sucesso a gelatina em fibras(Figura 2)e tubos (Figura 2B, C), através do conceito de fiação úmida user-friendly. Estes materiais à base de gelatina podem ser utilizados como qualquer ferramenta médica, dependendo de suas formas. Considerando que a superfície funcional e quadro de tais materiais são mais apropriados para a regeneração dos tecidos, examinamos a .......

Discussão

Apresentamos o desenvolvimento de biomateriais baseados em gelatina usando um simples molhado girando a técnica que pode ser aplicada no estudo de polímeros naturais para a regeneração de tecidos. Este trabalho demonstrou a possibilidade de fabricação de gelatina como fonte de proteína excelente, sem adição de outras fontes, com o objetivo de otimizar as propriedades da gelatina em si. O desenvolvimento de biomateriais baseados em gelatina foi inteiramente realizado em temperatura ambiente (22-26 ° C). Uma preparação de .......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Preparação da solução:
Gelatina tipo B (suína)	Ferak	Art. -Nr. 10733 Frasco de	500 g
Processo de fiação úmida:
Bomba peristáltica	Gilson	Modelo M312	Minipuls*3
Conector de tubo de plástico	World Precision Instruments	14011	1 caixa
Seringa	Sterican	5A06258541	26Gx1/2"(0.45 x 12mm)
Acetona	Ferak	Art. -Nr. 00010	2.5 L vial
Policaprolactona CAPA 6500	Perstorp	24980-41-4-Diclorometano
	Scharlau	CL03421000	frasco de 1 L
Pipeta Pasteur de vidro	Fisher Scientific	13-678-20A-Hemostat
	Shinetec instruments	ST-B021-Cateter
venoso periférico (Introcan Certo)	B. Braun	1B03258241	24Gx3/4"(0,7 x 19mm)
Morfologia do tubo de gelatina:
Máquina de revestimento por pulverização catódica de íons	Hitachi	e1010-Microscopia
eletrônica de varredura	Hitachi	S-3000N	-
Cultivo de células no tubo de gelatina:
Tripsina-EDTA	Gibco	488625	frasco de 100 mL Soro
fetal bovino	Gibco	923119	frasco de 500 mL
Meio de Eagle modificado de Dulbecco	Gibco	31600-034	Pó
Queratinócitos-SFM médio	Gibco	10744-019	frasco de 500 mL
T25	de cultura TPP	90025	VENT tipo
placa de 6 poços	Falcon	1209938	-
Imunocitoquímica:
Phospate-buffered salina	Gibco	654471	Frasco para injetáveis de 500 ml
Ácido acético glacial	Ferak	Art. -Nr. 00697	Frasco de 500 mL
NP-40 surfactante (solução de Tergitol)	Sigma	056K0151	Frasco de 500 mL
Soro de cabra normal	Vector Laboratories	S-1000-20 Frasco de	20 mL, concentrado
Nestin (anticorpo primário)	Santa Cruz Biotechnology	SC-23927-Donkey
anti-mouse-fluoresceína isotiocianato ( anticorpo secundário)	Santa Cruz Biotechnology	SC-2099-Hoechst
33342	Anaspec	AS-83218	frasco de 5 mL
In vivo teste de biocompatibilidade:
Tiletamine+zolazepam	Virbac	BC91	frasco de 5 mL
Xilazina	Bayer Coreia	KR03227	frasco de 10 mL
Cetoprofeno	Astar	1406232 frasco de	2 mL
Solução de iodopovidona	Everstar	HA161202	Barril de 4 L
Cefazolina	China Chemical & Farmacêutico	18P909	1 g
frasco Lâmina de bisturi	Shinetec instrumentos	ST-B021-Surgical
scissor	instrumentos Shinetec	ST-B021	-

frasco