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Artigo de método

Protocolo de baixo custo de análise da pegada e caixa de teste de suspensão para ratos aplicada o retenção crônica de estresse

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DOI:

10.3791/59027

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23 de janeiro de 2019

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Neste artigo

Resumo

O protocolo de baixo custo, composto por análise de pegada e teste de caixa de suspensão após estresse de contenção é útil para avaliar os distúrbios do movimento do modelo do rato.

Resumo

Perturbação da marcha é frequentemente observada em pacientes com distúrbios do movimento. Em modelos do rato usados para distúrbios de movimento, análise da marcha é importante teste comportamental para determinar se os ratos imitam os sintomas dos pacientes. Déficit motor muitas vezes é induzida por estresse quando não fenótipo motor espontâneo é observado em modelos do rato. Portanto, a análise da marcha, seguido de estresse de carregamento seria um método sensível para avaliar o fenótipo motor em modelos do rato. No entanto, os pesquisadores enfrentam a exigência de um aparelho caro para obter resultados quantitativos automaticamente a partir da análise da marcha. Para estresse, estresse por métodos simples de carregamento sem aparelhos caros necessários para choque elétrico e forçado a correr é desejável. Portanto, apresentamos um protocolo simples e de baixo custo, consistindo em análise de pegada com papel e tinta, teste de caixa para avaliar a função motora de suspensão, e carga de estresse definido pela moderação com um tubo cónico. O déficit motor de ratos com êxito foram detectado pelo presente protocolo.

Introdução

Distúrbios do movimento são definidos como distúrbios do sistema nervoso, mostrando um excesso ou escassez de movimentos voluntários ou automática1. Em particular, distúrbio da marcha é frequentemente documentado entre os pacientes com distúrbios de movimento2,3,4. Portanto, a análise da marcha é um teste comportamental adequado para a validação de modelos animais de distúrbios do movimento. Em camundongos, análises automatizadas da marcha foram realizadas para andar em velocidade natural5 e em velocidades ajustáveis por esteira....

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Protocolo

Todos os experimentos com animais foram conduzidos de uma forma humana. O institucional Animal experimento Comité de Jichi universidade médica aprovado o estudo. O estudo foi realizado em conformidade com o Regulamento institucional para experimento Animal e diretriz Fundamental para a boa conduta do Animal experimento e actividades conexas em instituições acadêmicas de pesquisa sob a jurisdição do MEXT do Japão. Os ratos utilizados neste protocolo tem sido descrito anteriormente21.

1. caixa de teste de suspensão

  1. Registro do peso de cada rato. Marcar a cauda por caneta de marcação para a discriminação indiv....

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Resultados

Os camundongos machos heterozigotos de Atp1a3 (Atp1a3+ −) que são o modelo do rato para início rápido distonia parkinsonismo e selvagem-tipo littermates foram utilizados no presente protocolo. Atp1a3+ − mostrou significativamente menor comprimento dos passos do membro anterior e membro posterior do que aqueles do tipo selvagem em 4 semanas de idade (Figura 5A e Figura 5B, abra o cí.......

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Discussão

A análise de pegada e a caixa de suspensão de teste são simples e pouco dispendiosos testes comportamentais para a função motora dos ratos. Os fenótipos neurocomportamentais em vários modelos de mouse foram detectados com êxito por esses testes. Por exemplo, encurtou o comprimento do passo em esclerose lateral amiotrófica24, aumento do comprimento do passo assimétrico em ataxia-telangiectasia25, aumento do comprimento de sobreposição na doença de Huntington distonia de

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Divulgações

Os autores não têm nada para divulgar.

Agradecimentos

Este trabalho foi financiado pelo KAKENHI JSPS (sociedade de Japão para a promoção da ciência) (subsídio para C de investigação científica), conceder número 18K 07373 (HS) e subsídios para as universidades privadas.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Caixa suspensaO' hara e Co.http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/
Caneta marcadoraZEBRAMO-120-MC-BK
Caixa de golO' hara e Co.http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/Acessório para aparelhos de teste de feixe balanceado
CaixasO' hara e Co.-Parede lateral da pista
Tinta pretaShin-asahi-Tinta
vermelhaMaruyamakogyoBC-6
Placa de Petri descartávelCorning351008placas de Petri (35 mm de diâmetro)
Askul Multipaper Super Branco J Monocromático A3Askul701-712Papel branco (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm)
Tubo cônico de 50 mLCorning
Broca quadradaKAKURI CorporationDIY FACTORY (K32-0313)
430829

Referências

  1. Warner, T. T. Movement disorders. Practical Guide to Neurogenetics. , Elsevier Health Sciences. (2008).
  2. Brashear, A., DeLeon, D., Bressman, S. B., Thyagarajan, D., Farlow, M. R., Dobyns, W. B. Rapid-onset dystonia-parkinsonism in a second family. Neurology. 48 (4), 1066-1069 (1997).
  3. Linazasoro, G., Indakoetxea, B., Ruiz, J.,....

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Reimpressões e permissões

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