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Artigo de método

Um Método Laboratorial para Medir o Bocejo Contagioso em Ratos

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DOI:

10.3791/59289

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14 de junho de 2019

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Neste artigo

Resumo

O método descrito aqui tem como objetivo obter curvas de contágio de bocejo em pares de ratos machos familiares ou desconhecidos. As gaiolas com furos separados por divisórias desobstruídas ou opacas com (ou sem) furos são usadas para detectar se Visual, olfactory, ou ambos os tipos de sugestões sensoriais podem estimular o contágio do bocejo.

Resumo

A comunicação é um aspecto essencial da vida social animal. Os animais podem influenciar uns aos outros e se reúnem em escolas, rebanhos e rebanhos. A comunicação também é a forma como os sexos interagem durante o namoro e como os rivais resolver disputas sem lutar. No entanto, existem alguns padrões comportamentais para os quais é difícil testar a existência de uma função comunicativa, pois vários tipos de modalidades sensoriais provavelmente estão envolvidos. Por exemplo, o bocejo contagioso é um ato comunicatório em mamíferos que potencialmente ocorre através da visão, audição, cheiro, ou uma combinação desses sentidos, dependendo se os animais são familiares uns aos outros. Portanto, para testar hipóteses sobre o possível papel comunicatório de tais comportamentos, é necessário um método adequado para identificar as modalidades sensoriais participantes.

O método proposto aqui visa obter curvas de contágio de bocejo para ratos familiares e desconhecidos e avaliar a participação relativa de modalidades sensoriais visuais e olfatórios. O método usa materiais baratos, e com algumas pequenas alterações, ele também pode ser usado com outras espécies de roedores, como camundongos. Globalmente, o método envolve a substituição de divisores claros (com ou sem furos) com divisores opacos (com ou sem furos) que permitem ou impedem a comunicação entre ratos colocados em gaiolas adjacentes com furos em lados adjacentes. Conformemente, quatro circunstâncias podem ser testadas: uma comunicação olfactory, uma comunicação visual, uma comunicação visual e olfactory, e nem uma comunicação visual nem olfactory. Como a interação social ocorre entre os ratos, essas condições de teste simulam o que pode ocorrer em um ambiente natural. A este respeito, o método proposto aqui é mais eficaz do que os métodos tradicionais que dependem de apresentações de vídeo cuja validade biológica pode suscitar preocupações. Não obstante, não discrimina entre o papel potencial da audição e os papéis do cheiro e da visão no contágio do bocejo.

Introdução

Tradicionalmente, o comportamento comunicatório tem sido estudado a partir de duas perspectivas. De uma perspectiva, os etologistas observam e registram o comportamento dos animais em configurações naturais e tentam reconhecer seu valor adaptativo1. O sentido particular ou os sentidos envolvidos não foram o interesse preliminar destes estudos. De outra perspectiva, os fisiologistas estão mais interessados em desvendar os mecanismos pelos quais os animais se comunicam1; assim, estudos laboratoriais têm proporcionado métodos para abordar o papel que as modalidades sensoriais desempenham na comunicação2,3<....

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Protocolo

Os protocolos experimentais e a criação de animais foram conduzidos de acordo com as diretrizes institucionais.

1. materiais

  1. Encontre uma lista completa dos materiais usados para implementar o método na tabela de materiais. Use a Figura 1 e procure aconselhamento especializado para construir uma tabela em forma de T invertida, gaiolas de observação e divisores de gaiola. Siga as indicações de segurança para o uso de ferramentas afiadas e materiais potencialmente perigosos.
  2. Faça uma tabela em forma de T invertida, colando duas barras de madeira como trilho (45 cm de comprimen....

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Resultados

Os ratos foram selecionados de uma sublinha previamente produzida de ratos Sprague-Dawley que foram selecionados para o bocejo frequente (aproximadamente 22 bocejos por hora31). No entanto, os nove pares de desconhecidos e nove pares de ratos machos familiares (entre 2,5 e 3 meses de idade) utilizados por situação de teste bocejou aproximadamente 12 vezes por hora, em média18. Portanto, as situações de teste para medir o contágio do bocejo i.......

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Discussão

Há etapas críticas no método que devem ser levados em conta para obter resultados bem-sucedidos. Ratos familiares devem compartilhar gaiolas domésticas por pelo menos 1,5 meses após o desmame e antes de executar os experimentos. Entretanto, os ratos desconhecidos devem viver em gaiolas Home separadas. Em ambos os casos, os pares de ratos devem vir de diferentes ninhadas, mas ser tão semelhantes na idade possível. Em relação às gaiolas de observação, seus furos devem corresponder àqueles nos divisores, porque esta é a úni.......

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Divulgações

Os autores não declaram conflitos de interesse.

Agradecimentos

A. M. foi parcialmente financiada pela Vicerrectoría de Docencia, benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Estamos especialmente endividados para o pessoal da instalação animal "Claude Bernard" para o uso dos ratos para a filmagem. Agradecemos aos árbitros anônimos por seus comentários sobre as primeiras versões deste manuscrito. A apresentação é menos estridente e mais equilibrado por causa de seus comentários pensativos

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Divisórias de acrílicoFeitas à mãoNão disponíveisDuas divisórias, uma transparente e outra opaca, terão 24 furos cada. Os outros dois divisores, um transparente e outro opaco, não terão furos. Veja o texto principal para detalhes da construção.
Um programa baseado em RBenemé rita Universidad Autó noma de PueblaNão disponívelEste é o programa usado para avaliar o contágio do bocejo em ratos. Consulte o texto principal para obter informações sobre a forma como o programa é usado.
Fichas técnicasO usuário pode elaborá-lasNão disponívelEsses formulários serão usados para que o observador registre a frequência do comportamento de bocejar visualizando as gravações de vídeo. Alternativamente, um caderno pode ser usado desde que você siga as sugestões dadas no texto principal.
Computador de mesaQualquer fabricanteNão disponívelCertifique-se de que o computador tenha uma placa de vídeo capaz de processar convenientemente as gravações de vídeo do comportamento de bocejo. 
Filmadoras digitaisQualquer fabricanteNão disponívelEles serão usados para gravar em vídeo o comportamento de bocejar de cada par de ratos; haverá 2 pares de ratos por sessão experimental.
flashQualquer fabricanteNão disponívelCada sessão experimental durará 60 minutos e, portanto, você precisará de memória suficiente para armazenar a gravação de vídeo.
Gaiolas de vidroArtesanalNão disponívelCada gaiola (19 X 19 X 10 cm de altura) terá 24 orifícios (0,5 cm de diâmetro) formando três fileiras no meio de um de seus lados. Veja o texto principal para mais detalhes sobre sua construção. Recomenda-se fabricar uma gaiola extra no caso de uma delas ser quebrada acidentalmente. 
MarcadoresSharpie ou qualquer outro fabricanteNão disponívelMarcadores permanentes para numerar os ratos. Veja o texto principal para ver uma maneira de usar símbolos de pintura na cauda do rato.
LápisQualquer fabricanteNão disponívelEles são usados pelo observador para registrar a frequência de bocejos. É importante que o observador tenha sido previamente treinado para reconhecer o comportamento de bocejo e operar o sistema de reprodução de vídeo.
Software REquipe principal de desenvolvimento RNão disponívelBaixar R em: http://cran.r-project.org/  
Barras de madeira semelhantes a trilhosArtesanalNão disponívelEles serão fixados no meio da folha de madeira retangular formando um trilho, onde uma segunda folha de madeira é colocada. Consulte o texto principal para obter instruções adicionais para construção.
Mesa retangularQualquer fabricanteNão disponívelEsta é a mesa (aproximadamente 2 x 1 m) onde será colocada a mesa em forma de T invertido para realizar a observação do comportamento de bocejo.
Ratos machos Sprague-DawleyQualquer fornecedor local de animais de laboratórioNão disponívelSão necessários nove pares de ratos machos por situação de teste para cada grupo, ratos familiares e não familiares, pois com esse tamanho de amostra a variação interindividual que pode existir na frequência de bocejos não afetará severamente as conclusões tiradas da análise estatística realizada aos dados.      
Software de planilhaMicrosoftNão disponívelO Excel será o software usado para armazenar as gravações de bocejos inicialmente registradas nas folhas de dados. Revise o texto principal para obter instruções sobre a maneira recomendada de fazer a transcrição.
Papéis de filtro quadradosQualquer fabricanteNão disponívelEles são usados para cobrir o fundo da gaiola.
TripésQualquer fabricanteNão disponívelEles serão usados para fixar as filmadoras na frente de cada par de gaiolas de observação.
Mesa de madeira em forma de T invertidoArtesanalNão disponívelLeia as instruções no texto principal para ver a forma de construí-la. Se preferir, um material diferente da madeira pode ser usado. Certifique-se de que qualquer material seja o mais resistente possível à transmissão de ultrassons, que os ratos podem usar para comunicação.  
Unidade

Referências

  1. Cézilly, F. A. History of Behavioural Ecology. Behavioural Ecology. Danchin, E., Giraldeau, L. A., Cézilly, F. , Oxford University Press. 3-27 (2008).
  2. Medina, L. M., Garcia, C. M., Urbina, A. F., Manjarrez, J., Moyaho, A. Female vibration discourages male courtship behaviour in the Amarillo fish (Gira....

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Reimpressões e permissões

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