Este protocolo permite avaliar a abundância total de serapilheira Marinha e a identificação das principais categorias de serapilheira ingeridas por tartarugas marinhas. É menos dispendioso em comparação com outros programas de monitorização com atividades marítimas, porque as tartarugas marinhas podiam ser recolhidas após encalhe na praia ou ser recuperado pelos pescadores. A identificação de categorias de lixo marinho é fácil e rápida, pois o limite inferior no tamanho do item é de 1 mm. Uma limitação do protocolo é o uso da tartaruga marinha, Considerando que todas as 7 espécies de tartarugas marinhas estão listadas no apêndice I da Convenção sobre o comércio internacional de espécies de fauna e flora selvagens ameaçadas de extinção27; Conseqüentemente, somente o pessoal autorizado pode segurar animais vivos e inoperantes ou partes deles. O manejo e a recuperação das tartarugas devem ser relatados e coordenados com as autoridades correspondentes. Precauções sanitárias devem ser tomadas ao manusear animais selvagens mortos ou vivos para minimizar os riscos de zoonose. Este protocolo foi testado em espécies de cabeçadas, mas é aplicável a todas as sete espécies de tartarugas. A análise dos dados deve ser realizada separadamente para cada espécie. As condições corporais do espécime como consideradas cinco níveis de vivas a tartarugas mumificadas. O nível 1 (Alive) é considerado para uma classificação mais detalhada da condição corporal do espécime, caso a tartaruga tenha morrido no centro de resgate após a recuperação. O protocolo é aplicável a indivíduos mortos dos níveis 2 a 4, mas também em indivíduos que morreram após a recuperação (circunstâncias: morto no centro de recuperação). Os níveis 2 e 3 são adequados para o protocolo, enquanto o nível 4 permite medir dados biométricos e avaliar a presença/ausência de serapilheira ingerida para a avaliação da frequência de ocorrência (FO%), e o percentual de tartarugas com lixo marinho ingerido na amostra inteira. Indivíduos do nível 5, onde geralmente o conteúdo gastrointestinal foi perdido não podem ser considerados para a coleta e quantificação da ingestão de serapilheira. Tirar fotos do animal antes de manusear, poderia fornecer informações adicionais sobre a amostra como a causa provável de morte ou lesões principais e emaranhamento. É importante incluir uma barra de escala nas imagens. Mesmo que muitas vezes as tartarugas marinhas tivessem anzóis de pesca no seu GI, os dados não têm de ser incluídos na análise porque os ganchos de pesca em que as vítimas de espinhel são ativamente capturados não são considerados como "lixo marinho". A presença de gancho deve ser registrada nas notas. A coleta de dados deve ser realizada separadamente em cada parte do GI (esôfago, estômago, intestino), a fim de avaliar o grau de tolerância à ingestão de serapilheira Marinha, considerando o bloqueio do GI ou a capacidade de eliminá-lo através da defecação, como demonstrado em estudos anteriores16,28,29,30,31,32. Uma etapa crítica do protocolo pode ser encontrada na coleção do número de itens. As partes múltiplas podiam ser derivadas da fragmentação do mesmo objeto dentro do soldado ou em conseqüência da ingestão separada. A interpretação subjetiva de um único item ou múltiplas peças separadas pode corresponder a um potencial viés no número de registro (Figura 6). Por esse motivo, os valores-limite foram elaborados utilizando-se apenas os dados de massa de serapilheira ingerida, como o Fulmar ecoqo17,25.

Figura 6 : A fragmentação de itens individuais pode ocorrer antes da ingestão ou durante o processo de alimentação, produzindo viés na contagem. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
O protocolo requer a categorização de diferentes itens de plástico de acordo com suas formas (USE SHE, USE THR). Esta subdivisão é útil para identificar a fonte de lixo marinho com uma lista de itens de acordo com a sua abundância. Ele assessores políticos em seus programas de medidas, fornecendo provas rápidas de sua eficiência na segmentação de itens, avaliando a sua força. Por exemplo, a proibição de sacolas plásticas nos mercados deve corresponder a uma redução da categoria de uso de SHE ingerida (Figura 4, Figura 5) em amostras de tartarugas marinhas coletadas no futuro. A aplicação deste protocolo permitirá que os Estados-membros da UE respondam aos requisitos da MSFD, avaliando as suas próprias linhas de base e definindo os valores-limite em que o GES é atingido. Os limiares devem ser determinados em áreas imaculadas ou próximas das zonas imaculadas. Devido à ubiqüidade do plástico no meio marinho, uma área intocada não existe. De acordo com os dados de exemplo (tabela 1), a área 5, foi a zona mais clara e poderia representar o valor (Y) a ser atingido para a bacia do Mediterrâneo. Os Estados-Membros devem decidir os limiares de acordo com a redução significativa da sua própria distância a partir deste valor. De acordo com uma revisão recente18, as unidades de ingestão de lixo marinho devem ser normalizadas para o tamanho da tartaruga, especialmente se o objetivo é comparar diferentes classes etárias. No entanto, uma relação entre a massa de serapilheira ingerida e o tamanho das tartarugas foi detectada por diferentes autores com valores positivos, negativos ou zero16,26,32,33, 34. Nosso protocolo não inclui o tamanho animal no primeiro cenário, mas poderia ser possível estimar a carga de corpo, avaliando a massa da tartaruga usando o comprimento curvado da carapaça (CCL)35 e use a relação do peso do peso plástico da tartaruga em vez de somente gramas de plástico ingerido (Y). Em qualquer caso, sugerimos verificar eventuais diferenças significativas antes de fundir as tartarugas do estágio oceânico com os nerióticos ou juvenis precoces com adultos, a fim de melhor estratificar as amostras16,26. O segundo cenário está mais relacionado ao estado de saúde individual e pode responder melhor aos critérios D10C3: "a quantidade de serapilheira e de micromaca ingerida por animais marinhos está em um nível que não afeta negativamente a saúde da espécie em causa ". De fato, o impacto dos itens plásticos ingeridos consiste mais freqüentemente em efeitos subletais, em vez de letais28,36,37,38,39. Nós igualmente encontramos raramente uma oclusão ou uma perfuração devido à ingestão plástica, que poderia causar a morte das tartarugas. Os efeitos subletais não são fáceis de serem detectados e distinguem-se dos impactos devidos a outros poluentes40. Diluição dietética ou assimilação de contaminantes acontece quando o lixo marinho está dentro do GI da tartaruga41. Assim, a amostra com mais gramas de plástico do que restos de comida poderia indicar um animal em uma condição de saúde muito ruim. A fim de permanecer em consonância com o Fulmar ecoqo17,25 usado pelos países do norte da Europa, ambos os cenários consideram o peso plástico em vez do peso do lixo marinho.
Finalmente, é importante esclarecer as diferenças entre (i) analisar a ingestão de plástico em tartarugas marinhas como indicador de impacto sobre a população com consequências para a conservação da população e (II) analisar a ingestão de plástico em tartarugas marinhas como Bio-indicador de impacto sobre o ambiente costeiro e marinho20,40. Para entender as implicações desse impacto na conservação da população de tartarugas, mais informações são necessárias e uma melhor estratificação de dados é necessária42. Confrontando a opinião de 35 especialistas de 13 nações, que são especialistas em biologia da tartaruga marinha e conservação, é evidente que as tartarugas marinhas têm sido amplamente estudadas ao longo dos anos, embora ainda seja necessário investigar as interações com o ser humano e, por conseguinte, avaliar o estado da população e as potenciais ameaças43.
Isto significa que um único protocolo não pode ser considerado exaustivo para todos os estudos temáticos e mais são necessários para compreender o impacto do plástico ao nível da população.
Mesmo plástico resistente poderia ser considerado para causar um baixo nível de danos às tartarugas marinhas, no que diz respeito à captura de capturas ou habitat, sua redução tem sido desafiador nos últimos anos e métodos rápidos de medição devem ser elaborados. Há uma controvérsia no uso de tartarugas encalhado para fins de monitoramento porque, de acordo com alguns autores, eles não são representativos de toda a população40, enquanto outros declararam que as tartarugas encalhado não representam um viés de Marinha taxas de ingestão de serapilheira na população de fundo44. Além disso, em muitos países não há uma rede de encalhe bem organizada ou um sistema que liga centros de resgate aos pescadores e há uma falta de informação sobre a mortalidade por capturas e pós-libertação por parte das pescas. Assim, as amostras ociosos nem sempre podem ser consideradas como tartarugas doentes sem comportamento alimentar normal por um período de tempo antes de morrer e chegar à praia; muitas delas são tartarugas "morte no mar" lavadas em terra e são geralmente usadas como amostras em atividades de monitoramento26,32,38,45. Nós acreditamos que as amostras encalhados são úteis em fornecer a informação no nível de abundância Marinha do lixo no ambiente e nós sugerimos excluir somente as tartarugas com o intervalo gastrintestinal completamente vazio desta análise porque poderiam ser doentes de uma longa tempo antes da morte. A utilização deste protocolo permitiria avaliar o estado ambiental e a disponibilidade de lixo marinho para os organismos marinhos. Também poderia ser útil para melhorar o nosso conhecimento sobre o comportamento da tartaruga. O significado do método em relação às diretrizes de TS-ML do MSFD22, é devido à harmonização em sete países e ao número de amostras em que foi testado (n = 700). O nível de condição corporal do espécime foi definido e as categorias de ingestão de lixo marinho foram reduzidas de acordo com os resultados preliminares. Além disso, esta é a primeira vez que os resultados representativos foram mostrados e conectados aos limiares do GES.
O protocolo é uma ferramenta eficiente para os pesquisadores entenderem o impacto do plástico no meio marinho, globalmente ou em escala local, e para comparar dados padronizados com os países vizinhos. Este resultado não pôde ser alcançado antes, devido às discrepâncias nos dados entre diferentes países, impedindo qualquer comparação espacial.