Protokollen fokuserer på innsamling av havskilpadde prøver, som beskriver alle trinnene fra dyret utvinning og obduksjon til klassifisering og kvantifisering av svelget Marine kullet. Videre viser representative resultatene hvordan du bruker de innsamlede dataene til å utdype mulige terskler for god miljø status.
Følgende protokoll er ment å tilfredsstille de krav som stilles av EUs ramme direktiver for Marine strategi (DIREKTIVET) for D10C3-kriteriene som er rapportert i Kommisjonens avgjørelse (EU), relatert til mengden søppel som svelges av marine dyr. Standardiserte metoder for å trekke ut søppel elementer inntatt fra døde havskilpadder sammen med retningslinjer for dataanalyse er gitt. Protokollen starter med innsamling av døde havskilpadder og klassifisering av prøver i henhold til ned brytings status. Turtle obduksjon må utføres i autoriserte sentre og protokollen som er beskrevet her forklarer den beste prosedyren for Gastrointestinal (GI) luftveiene isolasjon. De tre delene av GI (spiserør, mage, tarm) bør skilles, åpnet langsgående og innhold filtrert ved hjelp av en 1 mm mesh sil. Artikkelen beskriver klassifisering og kvantifisering av svelget søppel, klassifisere GI innholdet i sju ulike kategorier av marine kull og to kategorier av naturlige levninger. Mengden av svelget søppel skal rapporteres som total tørr masse (vekt i gram, med to desimaler) og overflod (antall elementer). Protokollen foreslår to mulige scenarier for å oppnå god miljø status (GES). Først: “det bør være mindre enn X% av havskilpadder har Y g eller mer plast i GI i prøver av 50-100 døde skilpadder fra hver sub-regionen”, der Y er den gjennomsnittlige vekten av plast inntatt og X% er andelen av havskilpadder med mer vekt (i gram) av plast enn Y. Den andre, som vurderer maten forblir versus plast som en proxy av individuelle helse, er: “det bør være mindre enn X% av havskilpadder har mer vekt av plast (i gram) enn mat forblir i GI i prøver av 50-100 døde skilpadder fra hver sub-regionen”.
Marine kullet er et komplekst problem å ta opp siden det kan komme inn i havene via flere kilder og former. Over 80% av kullet som oppdages i marine miljøer består av plast1. Rollen til dette materialet fra et økonomisk perspektiv har økt de siste 50 årene. Som en konsekvens, har produksjonen også økt tjuedoblet siden 1960, nådde 335 000 000 tonn i 2016. Denne verdien er forventet å doble over de neste 20 årene2. Videre har det blitt anslått at rundt 5 til 13 000 000 tonn plast ende opp i havene hvert år (som er lik 1,5 til 4% av global plastproduksjon)2,3. Plast bevegelsen er påvirket av dens fysiske egenskaper (f. eks, oppdrift) eller miljømessige variabler (for eksempel tidevann og strøm), og plast kan akkumuleres i alle marine rom4,5. For å møte plast problemet, er det viktig å huske på at, som mange andre miljøspørsmål, er det grenseoverskridende og derfor governance løsninger er komplekse å møte6. For bedre å nå dette målet må vi ta hensyn til regionale og internasjonale rammeverk, slik som å forbedre eller opprettholde Marine miljøbevissthet og beskyttelse over hele verden7. Det endelige målet for EUs maritime strategi rammeverk direktiv (DIREKTIVET) er å oppnå en god miljø status (GES) i europeiske farvann innen 2020, for å beskytte marint biologisk mangfold, og for å fremme bærekraftig bruk av marine miljøer. Dette vil bli gjort gjennom 11 kvalitative beskrivelser, hvorav Descriptor 10 fokuserer på marint kull og er definert som “egenskaper og mengder Marine kull ikke forårsaker skade på kyst-og marine miljøer”. Innenfor denne beskrivelsen, besluttet New Commission vedtak8 for å legge til kriterier D10C3-“mengden søppel og mikro-kull inntatt av marine dyr er på et nivå som ikke negativt påvirke helsen til de berørte artene”-siden det var relevante kriterier i evalueringen av GES. Som følge av dette ble medlemslandene bedt om å produsere en liste over arter, utvikle metodisk standarder og definere terskelverdier gjennom regionalt eller sub-regionalt samarbeid.
Etter den første vitenskapelige publikasjonen i 18389, på Storm-Petrel med en inntatt stearinlys Stick, over 500 marine arter har vært oppført for inntak av marinekull 10,11,12,13 ,14, og havskilpadder var blant de første dyr som ble tatt opp for å innta plast rester15. Gitt sin tilbøyelighet for inntak av kull, deres brede distribusjon og det store spekteret av habitater som brukes i løpet av livet, havskilpadder, spesielt de Loggerhead artene Caretta Caretta (von Linné 1758), ble valgt som en potensiell indikator for Middelhavsbassenget16, som sjø fuglen Fulmarus glacialis (von Linné, 1761) for nord-europeiske farvann17. Selv etter fem ti år med forskning, diskusjon av metode standardisering har vært svært begrenset18 og en sammenhengende tilnærming av det vitenskapelige samfunnet til å kvantifisere plast inntak av dyreliv mangler19. Standardiserte sampling protokoller, og analytiske gjenkjenningsmetoder og beregninger for å vurdere plast inntak av marine biota er nødvendig; en fersk papir viste de potensielle fordelene og begrensningene ved å bruke marine arter som bio-indikatorer på plast forurensning20. Etter Matiddi et al. forslag i 201121 for å bruke Loggerhead som bio-indikator, og teknisk gruppe på Marine kull Report22, en bestemt protokoll for å vurdere Marine kull inntatt av havskilpadde er utviklet og testet av ti partnere i syv land i Middelhavet og Atlanterhavet innenfor det europeiske prosjektet INDICIT (GA n ° 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2). Denne protokollen gir standardiserte metoder for analyse av marint kull inntatt av havskilpadder for å støtte den nye kommisjonen Decision (EU)8, kriterier D10C3, der terskelverdier er forespurt. I henhold til definisjonen levert av COM8, terskelverdien er et tall eller et område som gjør det mulig å vurdere om kvalitetsnivået kriteriet ble oppnådd, derfor hjelpe i VURDERINGEN av ges. Den foreslåtte protokollen for å vurdere kullet inntatt av havskilpadder, vil være nyttig i å samle inn data om sammensetningen og overflod av søppel og evaluere dens innvirkning på Marine miljøer. Videre innsamling av denne typen standardiserte data vil bidra til å definere terskelverdier. Her ser vi på to typer scenarioer. Det første scenariet tar hensyn til Fulmar kullet EcoQO overvåking, som er implementert for OSPAR området: “det bør være mindre enn X% av havskilpadder har Y g eller mer plast i GI i prøver av 50-100 døde skilpadder fra hver sub-regionen, der Y er averag e vekt av plast inntatt vurderer alle prøvene og X% er andelen av havskilpadder med mer vekt (i gram) av plast enn Y. Den andre tar sikte på å vurdere en proxy av individuelle helse nivå: “det bør være mindre enn X% av havskilpadder har mer vekt av plast (i gram) enn matrester i GI i prøver av 50-100 døde skilpadder fra hver sub-regionen”, der vekten av inntatt plast sammenlignes med matrester i hver enkelt.
Denne protokollen tillater evaluering av den totale overflod av marine kull, og identifisering av de viktigste kullet kategorier inntatt av havskilpadder. Det er rimeligere i forhold til andre overvåkingsprogrammer med sjø aktiviteter fordi havskilpadder kan samles etter stranding på stranden eller bli utvunnet av fiskere. Identifisering av marine kullet kategoriene er enkel og rask som den nedre grensen på element størrelsen er 1 mm. En begrensning av protokollen er bruk av havskilpadde med tanke på at alle de 7 artene av marine skilpadder er notert på vedlegg i av konvensjonen om internasjonal handel i truede arter av Wild fauna og flora27; Derfor kan bare autorisert personell håndtere levende og døde dyr eller deler av dem. Turtle Management og utvinning skal rapporteres og koordineres med de tilsvarende myndighetene. Sanitære forholdsregler må tas ved håndtering av døde eller levende ville dyr for å minimere risikoen for huden. Denne protokollen har blitt testet på Loggerhead arter, men det gjelder for alle de syv skilpadde arter. Data analyse bør utføres separat for hver art. Prøven er kroppens forhold som vurderes under fem nivåer fra levende til mumifiserte skilpadder. Nivå 1 (Alive) er vurdert for en mer detaljert klassifisering av prøven kropp tilstand i tilfelle skilpadden døde på rednings senteret etter oppgangen. Protokollen gjelder for døde individer fra nivå 2 til 4, men også på personer som døde etter utvinning (omstendigheter: død i utvinningen sentrum). Nivå 2 og 3 er tilstrekkelige for protokollen, mens nivå 4 gjør det mulig å måle biometriske data og vurdere tilstedeværelsen/fraværet av inntatt søppel for evaluering av hyppigheten av forekomst (FO%), og prosentandelen av skilpadder med inntatt Marine kull på hele prøven. Individer på nivå 5, hvor generelt mage-innhold har gått tapt kan ikke vurderes for innsamling og kvantifisering av søppel inntak. Ta bilder av dyret før håndtering, kan gi ytterligere informasjon om prøven som den sannsynlige dødsårsaken eller hoved skader og forviklinger. Det er viktig å inkludere en skala bar på bildene. Selv om ofte havskilpadder hadde fiskekroker i deres GI, data trenger ikke å bli inkludert i analysen fordi fiskekroker som line ofrene er aktivt fanget er ikke betraktet som “Marine søppel”. Hook tilstedeværelse skal registreres i notatene. Innsamling av data bør utføres separat i hver del av GI (spiserør, mage, tarm), for å evaluere graden av toleranse for Marine kull inntak vurderer GI blokkering eller evne til å eliminere det gjennom avføring, som demonstrert i tidligere studier16,28,29,30,31,32. Et kritisk trinn i protokollen ble funnet i samlingen av antall elementer. Flere brikker kan være avledet fra fragmentering av det samme objektet inne i GI eller som en konsekvens av separate inntak. Subjektiv tolkning av et enkelt element eller flere separate brikker kan tilsvare en potensiell skjevhet i opptaksnummeret (figur 6). Av denne grunn har terskelverdiene blitt utarbeidet ved hjelp av bare svelget Marin søppel masse data, som Fulmar EcoQO17,25.
Figur 6 : Fragmentering av enkeltelementer kan oppstå før inntak eller under fôring prosessen, produsere bias i telling. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Protokollen krever kategorisering av ulike plast elementer i henhold til deres former (bruk SHE, bruk THR). Denne sub-divisjonen er nyttig å identifisere kilden til Marine søppel med en liste over elementer i henhold til deres overflod. Det hjelpere beslutningstakere i sine programmer av tiltak, som gir rask bevis på deres effektivitet i målretting elementer ved å evaluere deres styrke. For eksempel bør forbudet av plastposer i markedene tilsvare en reduksjon av bruk hun kategori inntatt (Figur 4, figur 5) i havskilpadde prøver samlet i fremtiden. Anvendelsen av denne protokollen vil tillate EUs medlemsland å besvare DIREKTIVET krav, evaluere sine egne opprinnelige planer og definere terskelverdiene GES er oppnådd. Terskler bør fastsettes i uberørte eller ved siden av uberørte områder. På grunn av ubiquity av plast i det marine miljø, et uberørt område ikke eksisterer. I henhold til eksempeldataene (tabell 1), område 5, var den klareste sonen og kunne representere verdien (Y) som skal nås for Middelhavet bassenget. Medlemsstatene bør bestemme terskler i henhold til den betydelige reduksjonen av sin egen avstand fra denne verdien. Ifølge en fersk gjennomgang18, bør Marine kull inntak enheter være normalisert til størrelsen på skilpadden, spesielt hvis målet er å sammenligne ulike aldersgrupper klasser. Likevel har et forhold mellom massen av svelget kull og skilpadder størrelse blitt oppdaget av forskjellige forfattere med positive, negative eller nullverdier16,26,32,33, i 34. Vår protokoll inkluderer ikke dyr størrelse i det første scenariet, men det kan være mulig å anslå kroppen byrden, evaluere massen av skilpadden ved hjelp av buede ryggskjoldet lengde (CCL)35 og bruke forholdet mellom vekten av plast vekt på skilpadde i stedet for bare av svelget plast (Y). I alle fall anbefaler vi å verifisere eventuelle vesentlige forskjeller før sammenslåing Oceanic Stage skilpadder med neritic seg eller tidlig yngel med voksne, for å bedre Stratify prøvene16,26. Det andre scenariet er mer relatert til den enkelte helsetilstand og kunne bedre svar på kriteriene D10C3: “mengden av søppel og microlitter inntatt av marine dyr er på et nivå som ikke negativt påvirke helsen til artene bekymret “. Faktisk, virkningen av svelget plast elementer består hyppigst i sub-dødelige effekter snarere enn dødelige de28,36,37,38,39. Vi har også sjelden funnet en okklusjon eller perforering på grunn av plast inntak, som kan føre til døden av skilpadder. Sub-dødelige effekter er ikke lett å bli oppdaget og å skilles fra virkninger på grunn av andre forurensende stoffer40. Kosttilskudd fortynning eller assimilering av forurensninger skjer når marint kull er inne i GI av skilpadden41. Således prøven med flere gram av plastikk enn næringen restene kunne gi uttrykk for en dyr inne en meget dårlig sunnhet forfatning. For å forbli i tråd med Fulmar EcoQO17,25 som brukes av de nordlige europeiske landene, begge scenariene vurdere plast vekt i stedet for Marine søppel vekt.
Endelig er det viktig å avklare forskjellene mellom (i) analysere inntak av plast i havskilpadder som indikator på innvirkning på befolkningen med konsekvenser for befolknings bevaring og (II) analysere inntak av plast i havskilpadder som Bio-indikator på påvirkning på kyst og marine miljø20,40. For å forstå implikasjonene av denne effekten på bevaring av skilpadder befolkning, mer informasjon er nødvendig og bedre data lagdeling er nødvendig42. Ved å konfrontere den oppfatning av 35 spesialister fra 13 nasjoner, som er eksperter på havskilpadde biologi og bevaring, er det klart at havskilpadder har blitt mye studert gjennom årene, selv om det fortsatt er nødvendig å undersøke samspillet med menneskelige aktiviteter og derfor vurdere befolknings status og potensielle trusler43.
Dette betyr at en enkelt protokoll ikke kan betraktes som uttømmende for alle de tematiske og flere studier er nødvendig for å forstå effekten av plast på befolkningsnivå.
Selv tøff plast kan anses å forårsake et lavt nivå av skader på havskilpadder, med hensyn til av-fangst eller habitat ødeleggelse, har sin reduksjon vært utfordrende de siste årene og raske metoder for måling må utarbeides. Det er en kontrovers i bruk av strandet skilpadder for overvåking formål fordi, ifølge noen forfattere er de ikke representative for hele befolkningen40, mens andre har erklært at strandet skilpadder ikke representerer en skjevhet av marine søppel svelging priser i bakgrunnen befolkningen44. Videre, i mange land er det ikke en godt organisert stranding nettverk eller system linking redning sentre til fiskere og det er en mangel på informasjon om by-fangst og post Release dødelighet ved fiskeri. Derfor kan strandet prøver ikke alltid betraktes som syke skilpadder uten normal fôring oppførsel for en tidsperiode før døende og nå stranden; mange av dem er “død på sjøen” skilpadder vasket i land og er vanligvis brukt som prøver i overvåking aktiviteter26,32,38,45. Vi tror at strandet prøvene er nyttige i å gi informasjon om nivået av marine kull overflod i miljøet, og vi foreslår å ekskludere bare skilpadder med helt tomme mage-tarmkanalen fra denne analysen som de kan være syke fra en lang tid før døden. Bruken av denne protokollen ville sette i stand bedømmelse av miljømessig rang og marine søppel anvendelighet for Marine organisere. Det kan også være nyttig i å forbedre vår kunnskap om skilpadde atferd. Betydningen av metoden med hensyn til DIREKTIVET TS-ML retningslinjer22, skyldes harmonisering i syv land og antall prøver som den har blitt testet (n = 700). Kroppens tilstands nivå for prøver er definert, og kategoriene for maritim kull inntatt er redusert i henhold til de foreløpige resultatene. Videre er dette første gang representative resultater har blitt vist og koblet til GES terskler.
Protokollen er et effektivt verktøy for forskere å forstå virkningen av plast på det marine miljøet, globalt eller på en lokal skala, og for å sammenligne standardiserte data med naboland. Dette resultatet kan ikke nås før, på grunn av avvik i data mellom ulike land, og hindrer en romlig sammenligning.
The authors have nothing to disclose.
Forfattere er takknemlige for den franske Rescue Centres (Jean-Batiste Senegas), stranding nettverk (Jacques Sacchi) og veterinær laboratorier (Joanne Belfort) og Jessiaca Martin og Marie Sabatte, cetacean og havskilpadde stranding nettverk av Valencia Community, inkludert Marine zoology Unit av Cavanilles Institute (Universitetet i Valencia) og biologisk mangfold service av Generalitat Valenciana, den portugisiske regionale fondet for vitenskap og teknologi av Azorene (Maria Vale), den italienske Rescue Sentre (Stazione Zoologica “Anton Dohrn” Napoli og sardinske CREs) den veterinær laboratorier (IZSLT M. Aleandri Roma; IZSAM G. Caporale Teramo; IZSS G. Pegreffi Otistano;. IZS CReTaM Palermo), medlemmer av INDICIT Advisory Board og PO for deres forslag, og Environmental Ministries og regionale myndigheter i deltakerlandene for deres støtte.
To anonyme anmeldere for deres forslag og kommentarer.
Den nåværende protokollen har blitt utført av INDICIT Consortium i rammen av den europeiske DG-ENV prosjektet GA no. 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2.
For the recovery of the animal and the collection of samples at the discovery site | |||
Boots | |||
Bottle/ziploc bags | |||
Camera | |||
Cooler | |||
Cut-resistant gloves | |||
Garbage bag | |||
Glasses and protective mask or shield | |||
Gloves | |||
Integral protective suit | |||
Measuring tape | |||
Observation sheet | |||
Pen | |||
Permanent marker | |||
Rope (to marke-off the zone) | |||
Transport bins or containers for the turtle | |||
For the collection of samples on dead individuals in laboratory and the extraction of the ingested litter from the digestive tract | |||
In the laboratory room | |||
Cold chamber or chest freezers (-20°C) with large storage capacity | |||
Garbage bags | |||
Proofer (not mandatory) | |||
For manipulators | |||
Boots | |||
Cut-resistant gloves | |||
Glasses and protective mask or shield | |||
Gloves | |||
Integral protective suit | |||
For notes and report | |||
Camera | |||
Observation sheet | |||
Pen | |||
Permanent marker | |||
For biometric measurements | |||
Measuring tape | |||
Sliding calliper | |||
For the necropsy and the collection of samples | |||
Clamps (at least 6) and/or kistchen string or plastic cable clamps | |||
Clips with claws | |||
Containers for samples (Bottle/zipped bags) | |||
Metal containers | |||
Scalpel (possible with interchangeable blade) | |||
Scissors | |||
For the analysis of ingested litter | |||
Binocular (optional) | |||
Measuring cylinders (10 ml, 25 ml, 50 ml) | |||
Measuring decimetre | |||
Precision balance (0.01 g) | |||
Sieve with 1 mm mesh | |||
Sieve with 5 mm mesh (optional – for the study of the ingested micro-plastics (1-5 mm)) |