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Artigo de método

Um protocolo de estresse de imobilização crônica para induzir o comportamento semelhante à depressão em camundongos

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DOI:

10.3791/59546

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15 de maio de 2019

 ,  ,  , 

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Este artigo fornece um protocolo simplificado e estandardizado para a indução do comportamento depressivo-como em ratos cronicamente imobilizados usando um restringidor. Além disso, explicam-se comportamentos e técnicas fisiológicas para verificar a indução da depressão.

Resumo

A depressão ainda não está totalmente compreendida, mas vários fatores causais foram relatados. Recentemente, a prevalência de depressão aumentou. Entretanto, os tratamentos terapêuticos para a depressão ou a pesquisa na depressão são escassos. Assim, no presente trabalho, propomos um modelo de depressão induzida pela restrição do movimento. O estresse leve crônico (CMS) é uma técnica bem conhecida para induzir o comportamento depressivo. No entanto, ele necessita de um procedimento complexo que consiste em uma combinação de várias tensões leves. Em contrapartida, o estresse crônico de imobilização (CIS) é um modelo de estresse crônico prontamente acessível, modificado a partir de um modelo de contenção que induz o comportamento depressivo restringindo o movimento usando um retentor por um determinado período. Para avaliar os comportamentos depressivos, o teste de preferência de sacarose (SPT), o teste de suspensão de cauda (TST) e o ensaio ELISA para medir os níveis de corticosterona do marcador de tensão são combinados no presente experimento. Os protocolos descritos ilustram a indução da CIS e a avaliação das alterações no comportamento e fatores fisiológicos para a validação da depressão.

Introdução

O transtorno depressivo maior (MDD) é a principal causa de incapacidade mental em todo o mundo, com uma incidência que está aumentando mais rapidamente do que o previsto. Em 2001, a Organização Mundial de saúde previu que o MDD seria a segunda doença mais comum no mundo por 2020. No entanto, já era o segundo mais comum em 20131. Além disso, os antidepressivos atuais têm muitas limitações, incluindo efetividade tardia, resistência a drogas, recidiva e vários efeitos colaterais2,3. Os pesquisadores devem, portanto, desenvolver antidepressivos mais eficazes. No entanto, a fisiopatologia am....

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Protocolo

Todos os protocolos experimentais e cuidados com animais foram conduzidos de acordo com as diretrizes do Comitê de cuidados com animais universitários para pesquisa animal da Universidade Nacional de Gyeongsang (GLA-100917-M0093).

1. materiais

  1. Ratos
    1. Use machos do fundo da tensão de C57Bl/6 que pesa 22 – 24 g na semana pós-natal 7. Habituar-se na sala de reprodução para 1 semana antes dos experimentos.
      Nota: todos os ratos foram comprados de uma empresa de animais de laboratório.
    2. Ratos de casa individualmente em um Biotério temperatura-controlado (22 – 24 ° c) um ciclo claro/escuro de 12 horas (luzes sobre em ....

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Resultados

No experimento representativo, todos os dados foram adquiridos de 6-8 camundongos por grupo. Os materiais representativos e o método para inserir o mouse voluntariamente na restrição são mostrados na Figura 1.

Para realizar o teste comportamental e a amostragem de sangue após a indução da CIS, os camundongos foram submetidos ao procedimento experimental, conforme resumido na Figura 2a. Como mostrado na Figura 2

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Discussão

A complexidade do cérebro e a heterogeneidade do MDD fazem com que seja desafiador criar modelos animais que reproduzam completamente a condição. Muitos pesquisadores têm superado essa dificuldade usando uma abordagem baseada em endofenótipo32, em que anedonia (falta de interesse em estímulos recompensadores) e desespero são considerados comportamentos evolutivamente conservados e quantificáveis em modelos animais, que também são observados em pacientes com depressão33. No .......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Esta pesquisa foi apoiada pelo programa de pesquisa de ciência básica através da Fundação Nacional de pesquisa da Coréia (NRF) financiado pelo Ministério da educação (NRF-2015R1A5A2008833 e NRF-2016R1D1A3B03934279) e a concessão do Instituto de Ciências da saúde (IHS GNU-2016-02) na Universidade Nacional de Gyeongsang.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Seringas descartáveis de 1 mlSungshim MedicalP000CFDO
BalanceA& D CompanyFX-2000i
Bocal esféricoJeung Do B& Câmera CCTV PJD-C-88
KOCOMKCB-381
Corticosterona ELISA kitsCayman Chemical
Digital luxímetroTESTES-1330A
Ethovision XT 7.1Noldus Tecnologia
IsofluranoHANA PHARM CO., LTD.Solução Ifran
RatosKoatechC57BL/6 strain
RestrainerDae-jong Instrument IndustryDJ-428
Sacarose (sacarose)DAEJUNG7501-4400
Sistema anestésico de isoflurano para pequenos animaisSummit
BarraO aparelho foi fabricado em laboratório para teste de TST
Caixa de suspensãoO aparelho foi feito no laboratório
TimerElectronics TomorrowTL-2530
Garrafa de águaJeung Do B& PJD-C-79
da Informação de acrílico traseira

Referências

  1. Ferrari, A. J., et al. Burden of Depressive Disorders by Country, Sex, Age, and Year: Findings from the Global Burden of Disease Study 2010. PLoS Medicine. 10 (11), (2013).
  2. Trivedi, M. H., et al.

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Reimpressões e permissões

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