Descrito aqui é o uso de várias ferramentas caseiras para transferir, Chill, e matar a Drosophilaadulta, bem como para limpar frascos de cultura de vidro e coletar ovos. Estas ferramentas são fáceis de fazer e são bastante eficientes no manuseio da Drosophila.
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Artigo de método
Ferramentas caseiras simples para lidar com moscas de frutas —Drosophila melanogaster
Neste artigo
Resumo
Resumo
A mosca-das-frutas, Drosophila melanogaster, é amplamente utilizada tanto na pesquisa biológica quanto na educação em biologia. Manipulação de moscas adultas é comum, mas difícil na prática, como moscas adultas voam. Demonstrado aqui é como fazer algumas ferramentas simples e rentáveis para abordar problemas difíceis no manuseio da Drosophila. Furos em rolhas de espuma são feitas e pontas de pipeta ou funis são inseridos nos furos. As moscas movem-se então somente em uma direção na ponta da pipeta/assemblage do funil, permitindo o controle eficiente da transferência da Drosophila adulta dentro ou fora de um frasco. Protocolos existentes foram modificados para cool-anestesiando moscas por refrigeração em gelo esmagado e transferi-los para uma superfície fria, dura IcePack. O IcePack é coberto com uma parte de gaze médica que mantem moscas imobilizadas da água condensada quando examinado um stereomicroscope. As moscas são finalmente eutanasiado para a contagem e triagem ou descartados por microondulação. Uma gaiola em forma de garrafa também foi desenvolvida para a coleta de ovos, bem como um dispositivo de poupança de mão de obra e protocolo de acompanhamento para frascos de cultura de vidro de limpeza.
Introdução
A mosca-das-frutas, Drosophila melanogaster, é um organismo modelo amplamente utilizado na educação biológica de pesquisa e biologia para estudar uma ampla gama de tópicos1,2. Os problemas básicos de manipulação de Drosophila são a transferência de adultos de frasco para injetáveis e imobilização das moscas para que eles são mais fáceis de manusear, como todos os adultos (exceto para alguns mutantes3,4) pode voar.
Convencionalmente, um pesquisador transfere moscas de um frasco para outro, segurando dois fra....
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Protocolo
1. preparando ferramentas e acessórios
- Pontas/rolhas de funil
- Obter duas fichas de esponja (o diâmetro das fichas deve ser ligeiramente maior do que o diâmetro interno dos frascos utilizados para transferir moscas). Faça um furo nos centros das fichas de esponja com um ferro de solda elétrico aquecido.
- Obter duas pontas de pipeta de 1 mL, cortar um ao meio transversalmente com uma faca afiada, e descartar a extremidade pontiaguda. Em seguida, corte 1,5 cm da extremidade pontiaguda da segunda ponta da pipeta. Cole as sobras das duas pontas da pipeta junto com um adesivo para todos os fins para fazer uma ponta de pipeta al....
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Resultados
As rolhas T e F foram desenvolvidas como um conjunto de ferramentas simples que podem ser adaptadas e utilizadas em qualquer atividade de transferência de mosca. A transferência de moscas de uma cultura antiga em várias culturas frescas envolve a remoção dos plugues dos frascos frescos, substituindo-os por F-rolhas, em seguida, batendo as moscas no frasco velho, removendo rapidamente o plugue, e substituindo-o por um T-rolha. Se o alimento velho é compacto, a seguir é importante lanç o fr.......
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Discussão
Algumas ferramentas caseiras para lidar com atividades básicas envolvidas na criação e experimentação de Drosophila são descritas neste artigo. Estas ferramentas são simples, mas bastante eficaz. Virtualmente, qualquer laboratório pode fazer essas ferramentas com facilidade, e uma pesquisa ou um laboratório de ensino não precisa encontrar uma alternativa pronta que talvez não esteja disponível localmente.
Fly transferência é a prática mais comum e uma tarefa difícil em experimentos de.......
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Divulgações
O autor não tem nada a revelar.
Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Um par de alicates | |||
| Furadeira | velocidade máxima: 500 rpm | ||
| Ferro | |||
| Lima | |||
| funil | do disco< 60mm | ||
| Caixa | |||
| Pinos | |||
| Termômetro | HCIYET HT-830 | ||
| Luvas | |||
| Lapiseiras | |||
| Gaze | |||
| Tubo | 100 ul | ||
| de micro-ondas | |||
| Parafilm | |||
| Peri dish | diâmetro interno 60 mm | ||
| Pontas | 1 ml | ||
| Filme | |||
| Plástico Peri dish | Φ 36 mm usado para cobrir o frasco vazio | ||
| Pinças pontudas | |||
| Luvas | |||
| Pacotes de gelo duros | 26,5&vezes; 14,5 vezes; 2,5 cm ou maior | ||
| de ar de borracha | |||
| Cortador | |||
| Garrafa de | 500 ml, diâmetro interno c.a. 65 mm | ||
| Tampa | |||
| Esponjas | |||
| Escova de | |||
| Vial | & Fi; 34 mm e vezes; 90 milímetros |
Referências
- Jennings, B. H. Drosophila – a versatile model in biology & medicine. Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).
- JoVE Science Education Database. Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , JoVE. Cambridge, MA. (2018).
- Ashburner....
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Reimpressões e permissões
