Method Article

Avaliando a Prehension qualificada em camundongos usando um instrutor automático

DOI:

10.3791/59784

September 12th, 2019

In This Article

Summary

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Método para avaliar o impacto do treinamento em habilidades motoras é uma ferramenta útil. Infelizmente, a maioria das avaliações comportamentais pode ser trabalhosa e/ou dispendiosa. Nós descrevemos aqui um método robótico de avaliar a habilidade do preensão (alcance-à-preensão) nos ratos.

Abstract

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Nós descrevemos um método para introduzir ratos ingênuos a uma tarefa nova do preensão (alcance-à-preensão). Os ratos são alojados isoladamente em gaiolas com um slot frontal que permite que o mouse para alcançar fora de sua gaiola e recuperar pelotas de alimentos. Restrição alimentar mínima é empregada para incentivar os ratos a realizar a recuperação de alimentos a partir do slot. Como os ratos começam a associar vindo ao slot para o alimento, as pelotas são puxadas manualmente afastado para estimular a extensão e a pronação de sua pata para agarrar e recuperar a pelota através da ranhura frontal. Quando os ratos começam a chegar para as pelotas como eles chegam ao slot, o ensaio comportamental pode ser realizada através da medição da taxa em que eles agarram com sucesso e recuperar o pellet desejado. São introduzidos então a um auto-instrutor que automatiza o processo de fornecer pelotas do alimento para que o rato agarre, e a gravação de tentativas bem sucedidas e falhadas do alcance e do agarramento. Isso permite a coleta de dados de alcance para múltiplos camundongos com esforço mínimo, a ser utilizado na análise experimental, conforme apropriado.

Introduction

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Métodos para testar experimentalmente uma habilidade motora pré e pós-lesão neurológica, bem como modulam o tempo, quantidade e tipo de treinamento motor são importantes para a pesquisa translacional. Ao longo da última década, os camundongos, por causa da facilidade de manipulação genética, tornaram-se um sistema de modelo popular para elucidar os mecanismos de aprendizagem motora pré e pós-lesão. No entanto, os ensaios comportamentais em camundongos não foram otimizados da mesma forma que tais ensaios foram para outros mamíferos (especialmente ratos). Além disso, há diferenças importantes entre o comportamento de um rato e um rato que sugerem fortemente treinar as d....

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Protocol

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Todos os métodos aqui descritos foram aprovados pelo ACUC (Comitê de cuidados e uso de animais) da Universidade Johns Hopkins.

1. preparando gaiolas do rato para o uso

  1. Criar uma abertura com fenda com dimensões de 0,8 cm de largura e 7 cm de altura a partir da base na extremidade dianteira de cada gaiola, como ilustrado na Figura 1. Este slot serve como a abertura através da qual o animal vai chegar.
    Nota: o instrutor automático foi projetado para o uso com as dimensões padrão da gaiola do rato (como mostrado na Figura 1) fornecida pela maioria de vendedores da fonte d....

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Results

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Em geral, é recomendável que cada sessão de treinamento consista em cerca de 20-30 tentativas, que podem ser definidas pelo usuário, executadas automaticamente pelo instrutor automático e salvas em um único arquivo de log por sessão e mouse. Cada teste pode ser executado consecutivamente, logo após o outro, com 2-5 s de pausa. Os ratos treinados no auto-instrutor exibem um aumento na habilidade sobre 10 sessões de treinamento.

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Discussion

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Nosso auto-instrutor avalia o alcance-à-preensão do membro torácico (prehension) em uma maneira automatizada. Para atingir esse EndPoint, muitos dos parâmetros projetados para a tarefa de preensão do mouse, incluindo a colocação da pelota, o tamanho da pelota e os critérios de treinamento, foram iterados ao longo de vários anos e adaptados de protocolos anteriores2,5 ,6. O avanço aqui é a automação da tarefa usando um robô que .......

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Disclosures

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Dan Tasch e URI Tasch da etapa Analysis, LLC têm fabricado dispositivo de instrutor automático com o pagamento de Richard J. o ' Brien e Steven R. Zeiler.

Acknowledgements

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O dispositivo de treinamento automático foi construído por Jason Dunthorn, URI Tasch e Dan Tasch na Step Analysis, LLC, com suporte de entrada de projeto e instruções fornecidas por Robert Hubbard, Richard o ' Brien e Steven Zeiler.

Teresa Duarte, do centro Champalimaud para o desconhecido, forneceu insights e ideias valiosas sobre como descrever e categorizar ações de alcance do mouse.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Filamento ABSPersonalizado Impresso em 3D N/ Autilizado para porta-pellets, estrutura, braço e funil
Folha ABSMcMaster-Carr8586K5813/8 "de espessura; usado para componentes de plataforma, posicionamento de guias de suporte e base
Adruino MiniAdruinoA000087versão nano também compatível, bem como outros microcontroladores semelhantes
Suporte de PosicionamentoMcMaster-Carr9967T43Capacidade de carga de 35 lbs.
Tubo Redondo de Acrílico TransparenteMcMaster-Carr8532K14ID 3/8"
Baixo-Carbono  Fio de AçoMcMaster-Carr8855K140.148"  Dispensador
Pelletsde diâmetro Lafayette Instrument: Neuroscience80209-45com roda de tamanho de pellet intercambiável de 45 mg e suporte opcional
Photointerrupter Breakout Board SparkFunBOB-09322 ROHSprojetado para Sharp GP1A57HRJ00F
Sensor de Objeto ReflexivoFairchild SemiconductorQRD1113saída de fototransistor
Servo MotorSparkFunS8213engrenagem de metal genérico (tamanho micro)
Fotointerruptor TransmissivoSharpGP1A57HRJ00Fgap: 10 mm, fenda: 1,8 mm
de

References

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  1. Whishaw, I. Q. An endpoint, descriptive, and kinematic comparison of skilled reaching in mice (mus musculus) with rats (rattus norvegicus). Behavior Brain Research. 78, 101-111 (1996).
  2. Farr, T. D., Whishaw, I. Q.

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