A estimulação vestibular Galvanic nos seres humanos exibe melhorias na função vestibular. No entanto, não se sabe como esses efeitos ocorrem. Aqui, nós descrevemos como aplicar o ruído elétrico sinusoidal e estocástico e avaliar amplitudes apropriadas do estímulo em neurônios vestibular medial individuais do núcleo no rato C57BL/6.
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Artigo de método
Aplicação do ruído estocástico para avaliação da sensibilidade do Neuron do núcleo vestibular medial in vitro
Neste artigo
Resumo
Resumo
A estimulação vestibular Galvanic (GVS) foi mostrada para melhorar medidas do contrapeso nos indivíduos com contrapeso ou prejuízos vestibulares. Este é proposto para ser devido ao fenômeno da ressonância estocástica (SR), que é definido como a aplicação de um estímulo de baixo nível/sublimiar a um sistema não-linear para aumentar a deteção de sinais mais fracos. No entanto, ainda é desconhecido como o SR apresenta seus efeitos positivos sobre o equilíbrio humano. Esta é uma das primeiras manifestações dos efeitos do ruído sinusoidal e estocástico em neurônios individuais. Usando a electrofisiologia da braçadeira de remendo da todo-pilha, o ruído sinusoidal e estocástico pode ser aplicado diretamente aos neurônios individuais no núcleo vestibular medial (MVN) de C57Bl/6 ratos. Aqui nós demonstramos como determinar o limiar dos neurônios MVN, a fim de garantir que os estímulos sinusoidais e estocásticos são sublimiares e, a partir disso, determinar os efeitos que cada tipo de ruído tem sobre o ganho neuronal MVN. Nós mostramos que o ruído sinusoidal e estocástico do subthreshold pode modular a sensibilidade de neurônios individuais no MVN sem afetar taxas de acendimento basais.
Introdução
O sistema vestibular (ou equilíbrio) controla nosso senso de equilíbrio integrando informações auditivas, proprioceptivas, somatossensoriais e visuais. A degradação do sistema vestibular tem demonstrado ocorrer em função da idade e pode resultar em déficits de equilíbrio1,2. No entanto, as terapias direcionadas ao funcionamento do sistema vestibular são escassas.
A estimulação vestibular Galvanic (GVS) foi mostrada para melhorar medidas do contrapeso, funcionamento autonômico e outras modalidades sensoriais dentro dos seres humanos3,
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Protocolo
Todos os protocolos experimentais descritos foram aprovados pelo Comitê de ética animal da Universidade de Sidney (número de protocolo aprovado: 2018/1308).
1. os animais
Nota: Os camundongos foram obtidos do centro australiano de roedores (ARC; Perth, Austrália) e realizada na Fundação médica edifício animal Facility na Universidade de Sydney.
- Mantenha os camundongos em um ciclo normal de luz/escuridão de 12 h com enriquecimento ambiental.
- Use machos e fêmeas C57BL/6 camundongos (3 – 5 semanas de idade) para todos os experimentos.
2. preparação....
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Resultados
As gravações iniciais podem fornecer informações sobre os efeitos que o ruído sinusoidal e estocástico tem sobre as taxas de queima basal de neurônios MVN individuais e como os estímulos efetuam o ganho de neurônios. A Figura 2 mostra que nem sinusoidal nem ruído estocástico alteram as taxas de queima basal dos neurônios MVN quando comparadas às gravações de controle (sem ruído). Esta informação é crucial para determinar o limiar dos neurônios individuais. Durante a aplic.......
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Discussão
Os efeitos da estimulação vestibular Galvanica (GVS) no sistema vestibular têm sido destacados in vivo em humanos3,13,23, cobaias14, roedores18 e primatas não humanos24. Entretanto, nenhum desses estudos avaliou o impacto direto do ruído elétrico na sensibilidade dos neurônios individuais no sistema vestibular. Aqui nós Demonstramos a primeira aplicação in v.......
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Divulgações
Os autores não declaram conflitos de interesse.
Agradecimentos
A SPS foi apoiada pela bolsa de estudos de pós-graduação da Universidade de Sydney.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| CaCl | Scharlau | CA01951000 | usado para ACSF e sACSF |
| D-(+) -glicose | Sigma | G8270 | usado para ACSF e sACSF |
| EGTA | Sigma | E0396-25G | usado para solução intracelular à base de K |
| HEPES | Sigma | H3375-25G | usado para solução intracelular à base de K |
| KCl | Chem-supply | PA054-500G | Usado para ACSF, sACSF e solução intracelular |
| K-gluconato | Sigma | P1847-100G | Usado para solução intracelular à base de K |
| Mg-ATP | Sigma | A9187-500MG | Usado para solução intracelular à base de K |
| MgCl | Chem-supply | MA00360500 | Usado para ACSF e sACSF |
| Na3-GTP | Sigma | G8877-100MG | Usado para solução intracelular à base de K |
| NaCl | Chem-supply | SO02270500 | Uso para ACSF e solução intracelular |
| NaH2PO4• 2H2O | Ajax | AJA471-500G | Usado para ACSF e sACSF |
| NaHCO3 | Sigma | S5761-1KG | Usado para ACSF e sACSF |
| Sucarose | Chem-supply | SA030-500G | Usado para sACSF |
| Isoflurano | Henry Schein | 1169567762 | Usado para anestesiar camundongos |
| EQUIPAMENTO | |||
| Capilares de vidro borossilicato | Instrumentos Warner | GC150T-7.5 | 1,5 mm OD, 1,16 mm ID, 7,5 cm de comprimento |
| Software de aquisição de dados | Axógrafo | Usado para eletrofisiologia e análise | |
| Friedmen-Pearson Rongeurs | Instrumentos de precisão mundiais | 14089 | Usado para dissecação |
| Extrator de micropipetas | Narishige | PP-830 | Usado para micropipeta |
| Amplificador Multiclamp | Instrumentos axônicos | 700B | Usado para eletrofisiologia |
| Medidor de pH | Sper científico | 860033 | Usado para solução interna |
| Tesoura padrão | padrão FST | 14028-10 | Usado para dissecação |
| Micromanipulador Sutter | Sutter | MP-225/M | Usado para eletrofisiologia |
| Microscópio vertical | Olympus | BX51WI | Usado para eletrofisiologia |
| Vibratome | Leica | VT1200 | Usado para cortar tecido cerebral |
Referências
- Amiridis, I. G., Hatzitaki, V., Arabatzi, F. Age-induced modifications of static postural control in humans. Neuroscience Letters. 350 (3), 137-140 (2003).
- Iwasaki, S., Yamasoba, T. Dizziness and imbalance in the elderly: age-related decline in the vestibu....
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Reimpressões e permissões
