Um modelo pré-clínico para avaliar a recuperação do cérebro após acidente vascular cerebral agudo em ratos

Resumo

O objetivo deste estudo é estabelecer e validar um modelo animal para pesquisa nos estágios de recuperação e sequela da isquemia cerebral testando infarto cerebral e função sensóriomotor após oclusão/refusão da artéria cerebral média (MCAO/R) após 1-90 dias em ratos.

Resumo

O objetivo deste estudo foi estabelecer e validar um modelo de isquemia cerebral animal nos estágios de recuperação e sequela. Um modelo de oclusão/refusão da artéria cerebral média (MCAO/R) em ratos machos sprague-dawley foi escolhido. Ao alterar o peso do rato (260-330 g), o tipo de parafuso de linha (2636/2838/3040/3043) e o tempo de infarto cerebral (2-3 h), uma pontuação maior de Longa, um volume maior de infarto e uma maior relação de sucesso do modelo foram rastreados usando a pontuação da Longa e manchas ttc. A condição ideal do modelo (300 g, 3040 parafuso de linha, 3 h tempo de infarto cerebral) foi adquirida e utilizada em um período de observação de 1-90 dias após a refusão através da avaliação das funções sensório-motoras e volume infarto. Nestas condições, o teste bilateral da assimetria teve uma diferença significativa de 1 a 90 dias, e o teste grid-walking teve uma diferença significativa de 1 a 60 dias; ambas as diferenças podem ser um teste funcional sensorimotor adequado. Assim, a condição mais adequada de um novo modelo de rato nos estágios de recuperação e sequela da isquemia cerebral foi encontrada: 300 g de ratos que se submeteram ao MCAO com um parafuso de linha 3040 para um infarto cerebral de 3 h e depois reperfundido. Os testes funcionais sensorimotores apropriados foram um teste bilateral de assimetria e um teste de caminhada em grade.

Introdução

A isquemia cerebral é dividida em três etapas com diferentes indicadores pós-AVC: o estágio agudo (dentro de 1 semana), a fase de recuperação (1 semana a 6 meses) e a fase sequelae (mais de 6 meses). Atualmente, a maioria dos estudos se concentra no estágio agudo da isquemia cerebral por causa de seu efeito significativo e modelos de pesquisa multi-relativos^1,2,3. No entanto, os estágios de recuperação e sequelas da isquemia cerebral não podem ser ignorados devido à sua complicação a longo prazo das deficiências. Portanto, o objetivo deste estudo é explorar um modelo animal e....

Protocolo

O procedimento e o uso de indivíduos animais foram aprovados pelo Instituto Nacional de Saúde para o cuidado e uso de animais de laboratório. Este protocolo é ajustado especificamente para os testes de oclusão/refusão da artéria cerebral média (MCAO/R) e função sensóriomotora.

1. Design experimental e agrupamento

1. Use um modelo mcao/r de rato para rastrear um método de modelo isquêmico cerebral de rato com lesão cerebral mais grave e maior relação de sucesso do modelo usando a pontuação de Longa e coloração TTC.
   1. Realize o experimento em ratos sprague-dawley machos pesando 260 a 330 g que têm 7 a 9 semanas de idade. O peso r....

Resultados

Usando o procedimento acima mencionado para um modelo MCAO/R com escore de Longa e coloração TTC, diferentes tratamentos de peso médio (275/300/320 g), tipos de parafuso (2636/2838/3040/3043; Tabela 1) e os tempos isquêmicos (2-3 h) e a refusão de 1 dia foram usados para selecionar para o modelo óptimo da isquemia do cérebro nos ratos. Parâmetros de modelo de 300 g de peso, 3040 parafuso de linha e 3 h de tempo de infarto cerebral foram os mais adequados para o maior infa.......

Discussão

Muitos modelos que estabelecem métodos e indicadores comportamentais que são bem utilizados na isquemia cerebral aguda podem não ter mudanças significativas nos estágios de recuperação e sequela da isquemia cerebral^16,17. No entanto, o número de pacientes com isquêmico cerebral nos estágios de recuperação e sequela é o maior. É essencial selecionar um modelo animal adequado para os estágios de recuperação e sequela do acidente vascular cerebral da isquemia.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Microscópio anatômico	Leica (Alemanha)	S8	Instrumento operacional microscópico
Lâmina	Gellette	/	Corte de seções cerebrais
Cama de agitação de temperatura constante	Taicang Fábrica de equipamentos experimentais	THZ-C	Para manter as seções cerebrais coradas uniformemente e a uma temperatura constante
Câmera digital	Canon	700D	Para tomar fotos de TTC coloração
Barbeador elétrico	Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.	3000 #	Remoção de pêlos do pescoço de ratos
Fórceps Hamostático	Xangai Medical device Co., Ltd.	14 cm	Usando para remoção do cérebro
Image Pro Plus Software	Media Cybernetics Inc.	6.0	Analise o volume do infarto
Isoflurano	RWD Ciências da Vida	217170702	Gás anestésico
Microfórceps	Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.	Microshear vascular de Microshear de micromanipulação de	10 cm
	Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.	10 cm	Micromanipulação
vascular fórceps oftálmico	Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.	Pphthalmic auxiliar da anatomia da pele e do músculo	10 cm
	Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd.	10 cm	Usando-se para cortar a pele do molde da fatia do cérebro do rato
	do pescoço Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.	400 g	Para o corte padrão e uniforme do tecido cerebral
Aparelho de fadiga de barra rotativa de rato	Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd.	ZH-300B	Para testar a função sensório-motora,
a máquina de anestesia de pequenos animais	Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd.	ABM3000	Uma máquina anestésica de gás
Termostato de animais pequenos	Beijing Damida Technology Co., Ltd.	DM.7-YLS-20A	Para manter a temperatura corporal do animal constante durante a operação
Tesoura cirúrgica	Shanghai Medical device Co., Ltd.	16 cm	Usando-se para decapitar e remover o cérebro
Sutura	Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd.	4-0 / 5-0	Uso para suturas de pele e músculo / Uso para ligaduras vasculares
Parafuso de rosca	Beijing Cinontech Co., Ltd.	2636/2838/3040/3043-A4	Bloqueio da artéria cerebral média em ratos
5-trifenil-2H-cloreto de tetrazólio (TTC)	Sigma	LOT#BCBP3272V	Reagente de coloração de seção cerebral

Tesoura de