Preparação de Complexos modelo sns cobalto(ii) de álcool hepático desidrogenase

Resumo

A preparação de complexos de cobalto pincer SNS (II) de álcool hepático desidrogenase é apresentada aqui. Os complexos podem ser preparados reagindo ao precursor do ligante com CoCl₂·6H₂O e podem então ser recristalizados permitindo que o éter dietil se difunde lentamente em uma solução de acetonitrilo que contém o complexo de cobalto.

Resumo

Complexos de modelos químicos são preparados para representar o local ativo de uma enzima. Neste protocolo, uma família de precursores de ligadores de pinça tridentato (cada um possuindo duas funcionalidades de átomo de doador de nitrogênio (SNS) e baseada sinuosa (compostos de bis-imidazole ou bis-triazole) são metalizadas com cocl₂·6H₂O para pagar complexos de cobalto de pinça sns tridentado(II). A preparação dos complexos do modelo de cobalto(II) para álcool hepático desidrogenase é fácil. Com base em uma rápida mudança de cor ao adicionar o CoCl₂·6H₂O à solução acetonitrila que contém o precursor do ligante, o complexo se forma rapidamente. A formação do complexo metálico é completa depois de permitir que a solução reflua durante a noite. Estes complexos de cobalto (II) servem como modelos para o local ativo de zinco no álcool hepático desidrogenase (LADH). Os complexos são caracterizados por difração de raios-X de cristal único, espectrometria de massa eletrospray, espectroscopia visível ultravioleta e análise elementar. Para determinar com precisão a estrutura do complexo, sua estrutura cristalina única deve ser determinada. Cristais únicos dos complexos adequados para a difração de raios-X são então cultivados através da difusão lenta de vapor de éter dietil em uma solução de acetonitrilo que contém o complexo de cobalto(II). Para cristais de alta qualidade, a recristalização normalmente ocorre durante um período de 1 semana, ou mais. O método pode ser aplicado à elaboração de outros complexos de coordenação de modelos e pode ser utilizado em laboratórios de ensino de graduação. Finalmente, acredita-se que outros possam encontrar esse método de recristalização para obter cristais únicos benéficos à sua pesquisa.

Introdução

O objetivo do método apresentado é preparar análogos de pequenas moléculas de LADH para entender melhor a atividade catalítica das metaloenzimas. LADH é uma enzima dimérica que contém um domínio de ligação cofator e zinco(II) domínio catalítico contendo metal¹. LADH, na presença do co-fator NADH, pode reduzir cetonas e aldeídos aos seus respectivos derivados de álcool². Na presença de NAD⁺, LADH pode realizar catálise reversa de oxidação de álcoois a cetonas e aldeídos². A estrutura cristalina do local ativo da LADH mostra que seu centro metálico de zinco (II) está ligado a um átomo de ....

Protocolo

1. Síntese de cloro-(n³-S,S,N)-[2,6-bis(N-isopropyl-N'-metilleneimidazol-2-thione)piridina]cobalto(II)tetraclorocobaltato [4]

1. Para preparar o complexo 4, adicione 0,121 g (3,12 x 10^-4 mol) de 2,6-bis (N-isopropyl-N'-metileneimidazol-2-thione)piridina (C₁₉H₂₅N₅S₂)⁶ a 15 mL de acetonitrile em um frasco de fundo redondo de 100 mL. Em seguida, a esta solução, adicione 0,0851 g (3,58 x 10^-4 mol) de cloreto de cobalto hexahidrato (CoCl₂·6H₂O). A solução de reação deve mudar de cor de amarelo claro para verde esmeralda imediata....

Resultados

Síntese
As sinestes dos complexos 4 e 5 foram realizadas com sucesso reagindo a uma solução de acetonitrilo contendo um precursor de ligante bis-thione com hexahidrato de cloreto de cobalto(II) (Figura 2). Esta reação ocorreu a uma temperatura de refluxo na presença de ar. Em geral, os complexos 4 e 5 foram observados como solúveis em acetonitrila, sulfóxido de dimetila, diclorometano e metanol. Complexo .......

Discussão

A preparação dos complexos 4 e 5 é fácil. O passo chave é adicionar o sólido CoCl₂·6H₂O a uma solução acetonitrila que contém o respectivo precursor do ligante. A solução fica verde escuro em segundos após a adição de CoCl₂·6H₂O para formar o complexo 4. A solução fica azul brilhante após a adição de CoCl₂·6H₂O para formar o complexo 5. Para garantir uma reação completa, a solução é coloca.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Frasco de fundo redondo de 100 mL	Chem Glass	CG150691	100mL Frasco de fundo redondo de gargalo único, 19/22 Junta externa
Acetonitrila	Fisher	HB9823-4	Resfriador de grau HPLC
para roto-vap	Lauda	L000638	Alpha RA 8
Cloreto de cobalto hexahidratado	Acros Organics	AC423571000	Acros Organics
Éter	dietílicoFisher	E-138-1	Diethyl Ether Anhydorus
cilindro graduado	Fisher	S63456	25 mL de placa de aquecimento de cilindro graduado
	Fisher	11-100-49SH	Isotemp Basic Agitando
Frascos	Fisher	05-719-481	Frascos de 250 mL
Ligante	-----	-----	Sintetizado anteriormente pelo professor Miecznikowski
meio bolas de algodão	Fisher	22-456-80	bolas de algodão médio
frascos de uma dram	Fisher	03-339	frascos de uma dram com pipeta de tampa forrada TFE
	Fisher	13-678-20B	5,75 polegadas
	Fisher	03-448-21	Lâmpada de látex da marca Fisher para
prato de recristalização	Fisher	08-741 D	325 mL prato de recristalização para condensador de refluxo de banho de areia
	Condensador de vidro químico	CG-1218-A-22	com junta interna 19/22
Rotovap	Heidolph Collegiate	36000090	Brinkmann; Evaporador Rotativo Heidolph Collegiate com banho ecológico Heidolph WB Evaporador Rotativo Heidolph
do mar para banho de areia	Acros Organics	612355000	areia do mar lavada para banho de areia
Barra de agitação	Fisher	07-910-23	Barra de agitação magnética em forma de ovo
Graxa a vácuo	Fisher	14-635-5D	graxa de alto vácuo Dow Corning
para rotovap	Heidolph Collegiate	36302830	Controle de Válvula Heidolph Rotovac

de placa de aquecimento Bulbos de pipeta de de pipeta para banho de areia areia Bomba de vácuo de