Aqui, apresentamos um protocolo de eletrocardiografia não invasiva (ECG), otimizado para camundongos pós-natais precoces, que não requer o uso de anestésicos.
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Artigo de método
Eletrocardiografia não invasiva no Rato Perinatal
Neste artigo
Resumo
Resumo
A eletrocardiografia (ECG) tem sido confiada há muito tempo como um método eficaz e confiável de avaliação da função cardiovascular (e cardiopulmonar) em modelos humanos e animais de doença. A frequência cardíaca individual, o ritmo e a regularidade, combinados com parâmetros quantitativos coletados do ECG, servem para avaliar a integridade do sistema de condução cardíaca, bem como a fisiologia integrada do ciclocardíaco. Este artigo fornece uma descrição abrangente dos métodos e técnicas utilizados para a realização de um ECG não invasivo em filhotes de camundongos perinatais e neonatais já no primeiro dia pós-natal, sem exigir o uso de anestésicos. Este protocolo foi projetado para atender diretamente à necessidade de um método padronizado e repetível para a obtenção de ECG em camundongos recém-nascidos. Do ponto de vista translacional, este protocolo se mostra inteiramente eficaz para a caracterização de defeitos cardiopulmonares congênitos gerados usando linhas de camundongos transgênicos, e particularmente para análise de defeitos que causam letalidade nos primeiros dias pós-natal. Este protocolo também visa abordar diretamente uma lacuna na literatura científica para caracterizar e fornecer dados normativos associados à maturação do sistema de condução cardíaca pós-natal precoce. Este método não se limita a um ponto de tempo pós-natal específico, mas permite a coleta de dados de ECG em filhotes de camundongos neonatais desde o nascimento até o pós-natal 10 (P10), uma janela de importância crítica para a modelagem de doenças humanas in vivo, com ênfase especial na doença cardíaca congênita (DSP).
Introdução
A função cardíaca pode ser medida de diferentes formas, sendo a mais comum o uso de eletrocardiografia (ECG) para analisar a condução da corrente elétrica através do coração, bem como seu ciclo cardíaco e função1. A eletrocardiografia continua sendo uma ferramenta de diagnóstico útil para identificar e caracterizar anomalias cardíacas em modelos humanos e animais da doença1,2. Irregularidades na leitura de eletrocardiograma podem ser encontradas no desenvolvimento cardíaco anormal (ou seja, doença cardíaca congênita (DP)), e podem incluir arritmias manifestando-se como alterações na fre....
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Protocolo
O seguinte protocolo segue as normas do Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade de Nova Inglaterra. A observação atenta do protocolo deve fornecer leituras satisfatórias do ECG em todos os recém-nascidos examinados (n > 70).
1. Preparações do dispositivo
- Conecte o dispositivo à porta USB de um computador com o software ECG baixado nele. O dispositivo de medição começará automaticamente a aquecer até (37 °C/98.6 °F). A unidade de aquecimento interna está contida dentro da unidade de medição e aquece apenas a superfície plástica. Os eletrodos de fio prateado não são aquecidos.
- Deixe aproximadament....
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Resultados
Um ECG ideal teria um sinal claro e proeminente que permite que todas as ondas sejam analisadas em vários períodos de tempo diferentes(Figura 1). O laboratório inicialmente utilizou uma aplicação personalizada de um aparelho de eletromyografia para produzir ECGs de qualidade insatisfatória, o que só nos permitiu analisar parâmetros básicos como a frequência cardíaca(Figura S1). Este trabalho inspirado com uma empresa para desenvolver um novo protótipo de dispositivo ECG espe.......
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Discussão
Os pontos de dados coletados no perinatal dia 1 filhotes de camundongos estão ligeiramente abaixo dos valores médios esperados para camundongos adultos (500-700 batidas por minuto). 8 Há um aumento na frequência cardíaca à medida que o mouse envelhece, que cai mais na linha para os valores esperados(Tabela 1). No entanto, é importante ressaltar que os valores neonatais estavam na extremidade inferior dessa faixa, apoiando a ideia de que os valores normativos devem ser documentados.......
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Divulgações
Os autores não relatam conflitos de interesse.
Agradecimentos
Os autores reconhecem o generoso apoio da Saving tiny Hearts Society (KLT), do Programa UNE COBRE (número de subvenção do NIGMS P20GM103643; LAF), e o Sure Fellowship Program na Universidade de New England (VLB), bem como suporte técnico do paciente de Ashish More (iWorx, Dover, NH). As figuras 3, figura 4 e figura S1 foram criadas com software Biorender.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| LabScribe4 | iWorx | LabScribe4 | Software usado para registrar ECG |
| Neonatal Mouse ECG & Sistema de Respiração | iWorx | RS-NMECG : Dispositivo de ECG de ECG de Camundongo Neonatal | |
| Gel Adesivo Condutivo Tensivo Parker | Laboratories, Inc | 22-60 | Tac-gel usado como gel condutor para ECG |
Referências
- Pappano, A. J., Wier, W. G. Cardiovascular Physiology. 11, Elsevier. 40-41 (2019).
- Kaese, S., Verheule, S. Cardiac electrophysiology in mice: A matter of size. Frontiers in Physiology. 3, Semptember 1-19 (2012).
- Sisakian, H.
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Reimpressões e permissões
