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Artigo de método

Análise e Especificação das Distribuições de Tamanho do Granulo de Amido

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DOI:

10.3791/61586

⸱

4 de março de 2021

 ,  , 
1Cooperative Agriculture Research Center, College of Agriculture and Human Science, Prairie View A&M University

Neste artigo

Resumo

Apresentado aqui é um procedimento para determinações reprodutíveis e estatisticamente válidas de distribuições de tamanho de grânulo de amido, e para especificar as distribuições de tamanhonormal de enrasculado determinados do granulo usando uma forma multiplicativa de dois parâmetros. É aplicável a todas as análises de dimensionamento de grânulos de amostras de amido em escala grama para pesquisa em ciência vegetal e alimentar.

Resumo

Amido de todas as fontes de plantas são compostos de grânulos em uma variedade de tamanhos e formas com diferentes frequências de ocorrência, ou seja, exibindo um tamanho e uma distribuição deforma. Os dados de tamanho do grânulo de amido determinados usando vários tipos de técnicas de dimensionamento de partículas são muitas vezes problemáticos devido à baixa reprodutibilidade ou falta de significância estatística resultante de alguns erros sistemáticos intransponíveis, incluindo sensibilidade às formas de grânulo e limites de tamanhos amostrais de grânulo. Delineamos um procedimento para determinações reprodutíveis e estatisticamente válidas das distribuições de tamanho do grânulo de amido usando a técnica da zona de sensoriamento elétrico, e para especificar as distribuições determinadas de tamanho de lognormal do grânulo usando uma forma multiplicativa de dois parâmetros adotada com melhor precisão e comparabilidade. É aplicável a todas as análises de dimensionamento de grânulos de amostras de amido em escala grama e, portanto, poderia facilitar estudos sobre como os tamanhos do grânulo de amido são moldados pelo aparelho e mecanismos de biosíntese de amido; e como eles impactam propriedades e funcionalidades de amidos para alimentos e usos industriais. Os resultados representativos são apresentados a partir de análises de réplica das distribuições de tamanho de granuloso de amostras de amido de doce de pote de milho utilizando o procedimento descrito. Discutimos ainda vários aspectos técnicos fundamentais do procedimento, especialmente, a especificação multiplicativa das distribuições de tamanhonormal do granulo lognormal e alguns meios técnicos para superar o bloqueio frequente de abertura por agregados de grânulos.

Introdução

Os grânulos de amido são a estrutura física na qual dois polímeros homoglucanos de reserva principal em fotossíntese vegetal e tecidos de armazenamento, a amilolose linear ou pouco ramificada e a amilódeina altamente ramificada, são embaladas ordenadamente junto com alguns componentes menores, incluindo lipídios e proteínas. Grânulos de amido de várias espécies vegetais exibem muitas formas tridimensionais (3D) (revisadas em ref.1,2), incluindo esferas, elipsoides, poliedros, plaquetas, cubos, cuboides e tubulos irregulares. Mesmo aqueles do mesmo tecido ou tecidos diferentes da mesma espécie vegetal poderiam ter um conjunto de formas com frequências de ocorrência variadas. Em outras palavras, grânulos de amido de uma espécie de planta podem ter uma distribuição estatística característica, em vez de uma forma específica. As formas de grânulo não uniforme e não esférica dificultam a medição adequada e a definição dos tamanhos do grânulo do amido. Além disso, os grânulos de amido dos mesmos tecidos de uma espécie vegetal são de uma gama de tamanhos com diferentes proporções, ou seja, exibindo uma distribuição de tamanho característica. Essa distribuição de tamanho complica ainda mais a análise e descrição dos tamanhos do grânulo de amido.

Os tamanhos do grânulo de amido foram analisados utilizando várias categorias de técnicas de dimensionamento de partículas (revisadas no ref.3), incluindo microscopia, sedimentação/fracionamento de fluxo de campo esterico (Sd/StFFF), difração a laser e zona de sensoriamento elétrico (ESZ). No entanto, essas técnicas não são igualmente adequadas para a determinação de tamanhos de grânulos de amido na presença de uma forma de grânulo e uma distribuição de tamanho. A microscopia, incluindo microscopia eletrônica leve, confocal e de varredura, é excelente para os estudos de morfologia4,5,6,7, estrutura8,9 e desenvolvimento10,11 de grânulos de amido, mas dificilmente adequado para definir suas distribuições de tamanho devido a algumas deficiências inerentes. Medições diretas de imagens de grânulos microscópicos ou análise de imagem assistida por software de dados de microscopia óptica (IAOM), que têm sido usados para a determinação de tamanhos de grânulos de amidos de várias espécies, incluindo milho12, trigo13,14, batata15 e cevada16, pode medir apenas tamanhos 1D (geralmente comprimento máximo) ou 2D (área de superfície) de números muito limitados (dezenas a alguns milhares) de imagens de grânulo de amido. Os pequenos tamanhos de amostragem de grânulos inerentemente constrangidos pelas técnicas raramente poderiam ser estatisticamente representativos, considerando os enormes números de granulo por unidade de peso de amido (~120 x 106 por grama, assumindo todas as esferas de 10 μm em densidade de 1,5 g/cm³), e, portanto, poderia levar à baixa reprodutibilidade dos resultados. A técnica Sd/StFFF pode ter alta velocidade e resolução, e frações de tamanho estreito de grânulos de amido17,mas raramente tem sido usada provavelmente porque sua precisão pode ser severamente afetada por danos, diferentes formas e densidade de grânulos de amido. A técnica de difração a laser é a mais utilizada, e tem sido aplicada para análises de tamanho de granulo de amido para todas as principais espécies de cultura3,14,16. Embora a técnica tenha muitas vantagens, na verdade não é adequada para determinações de tamanhos de grânulo de amido na presença de uma distribuição de forma de grânulo. A maioria dos instrumentos simultâneos de difração a laser dependem da teoria de dispersão de luzMie 18 para partículas esféricas uniformes e a teoria miemodificada 18 para algumas outras formas de uniformidade. A técnica é, portanto, inerentemente muito sensível às formas de partículas, e não é inteiramente adequada mesmo para certas formas de uniformidade19, muito menos para grânulos de amido com um conjunto de formas de proporções variadas. A técnica ESZ mede a perturbação do campo elétrico proporcional ao volume da partícula que passa por uma abertura. Fornece tamanhos de volume de granulo, bem como as informações de distribuição de números e volumes, etc., em altas resoluções. Uma vez que a técnica ESZ é independente de quaisquer propriedades ópticas de partículas, incluindo cor, forma, composição ou índice refrativo, e os resultados são muito reprodutíveis, é particularmente adequado para determinar distribuições de tamanho de grânulos de amido com um conjunto de formas.

Os tamanhos do grânulo de amido também foram definidos usando muitos parâmetros. Muitas vezes foram descritos simplistamente por diâmetros médios, que em alguns casos foram os meios aritméticos dos comprimentos máximos microscopicamente medidos de imagens 2D12,20ou médias de diâmetros equivalentes da esfera3. Em outros casos, as distribuições de tamanho do grânulo foram especificadas utilizando-se faixas de tamanho21,22, o volume médio de distribuição ou diâmetro médio (equivalente de esfera, ponderado por número, volume ou área de superfície) assumindo uma distribuição normal14,23,24,25,26. Estes descritores de tamanhos de grânulo de amido de várias análises são de natureza muito diferente, e não estritamente comparáveis. Poderia ser muito enganoso se esses "tamanhos" de grânulos de amido de diferentes espécies ou mesmo os mesmos tecidos da mesma espécie fossem diretamente comparados. Além disso, o parâmetro de propagação (ou forma) das distribuições normais presumidas, ou seja, o desvio padrão σ (ou desvio padrão gráfico σg) medindo a largura da distribuição (ou seja, a disseminação dos tamanhos), tem sido ignorado na maioria dos estudos.

Para resolver os problemas críticos acima mencionados frente às análises de dimensionamento do grânulo de amido, delineamos um procedimento para determinações reprodutíveis e estatisticamente válidas das distribuições de tamanho de grânulo de amostras de amido usando a técnica ESZ, e para especificar adequadamente as distribuições de tamanho periculoso de granulo determinado usando uma forma multiplicativa de dois parametradosadotadas 27 com melhor precisão e comparabilidade. Para validação e demonstração, realizamos análises de dimensionamento de grânulos de réplica de amostras de amido de doce de pote usando o procedimento, e especificamos as distribuições de volume-volume-diâmetro de volume-quantidade equivalente de volume-equivalente de volume-equivalente lognormal usando seus meios figure-introduction-1 geométricos gráficos e desvios padrão multiplicativos s* em uma forma figure-introduction-2 x/ (multiplique e divida) s*

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Protocolo

1. Preparação de amostras de amido

  1. Prepare duas (ou três) amostras de amido de réplica em escala de grama de tecidos acumulados de amido de várias espécies vegetais seguindo os procedimentos estabelecidos (por exemplo, batatas15, potes de doce28,grãos de trigo13,29e grãos de milho30,etc.).
  2. Lave completamente amostras de amido com acetona ou tolueno 3-4x para minimizar os agregados de granulo e secá-las completamente.
    NOTA: Use procedimentos de extração que produzam mais de 1 g de amido por preparação. Uma ou duas alíquotas de 0,5 g de cada um dos três ou dois extratos de réplica, respectivamente, são amostradas para análise de tamanho de grânulo de um extrato de amido.

2. Preparação de eletrólitos

  1. Prepare 500 mL de cloreto de lítio de 50 g/L em metanol para quatro corridas de tamanho para amostras de amido de replicação (100 mL por corrida mais 100 mL extras). Preferencialmente, faça o eletrólito em lotes de grande volume, por exemplo, 4 a 8 L por vez, para minimizar a variação de concentração.
  2. Esfrie o recipiente no gelo ou em um armário de 4 °C para acelerar a dissolução do cloreto de lítio.

3. Configuração do analisador

  1. Escolha um tubo de abertura com uma faixa de diâmetro de partículas cobrindo a faixa de tamanho de grânulo conhecida (na literatura ou através de ensaios) de amostras de amido a serem analisadas, por exemplo, uma abertura de 100 μm para amidos de doces. Para amostras de amido de faixa de tamanho de grânulo desconhecida, selecione uma abertura apropriada através de testes usando vários tubos de abertura com faixas de diâmetro de partículas sobrepostas.
    NOTA: A faixa de diâmetro de partículas de um tubo de abertura é sua faixa de dimensionamento precisa entre 2 a 60% de, e com uma faixa de dimensionamento estendida para 80% do seu diâmetro orifício. A Tabela 1 lista propriedades de três tubos de abertura mais úteis para dimensionar grânulos de grandes amidos de cultura. Se a faixa de tamanho do grânulo de uma amostra de amido for maior do que a faixa de dimensionamento de um único tubo de abertura, realize uma análise de sobreposição de vários tubos combinando até cinco distribuições de tamanho de partículas medidas com aberturas de diferentes tamanhos. Cada abertura é identificável pelo seu diâmetro e número de peça rotulado no tubo. Seu diâmetro e número de série contidos em um código de barras no tubo podem ser escaneados no software do analisador usando o Leitor de Código de Barras no Painel de Controle do analisador.
  2. Escolha um béquer analítico de 100 ou 200 mL (sobre cuvetas) para a determinação dos tamanhos do grânulo de amido, e configure agitação automática (abaixo) para manter uma boa suspensão de granulo durante a medição.
  3. Crie um MÉTODO operacional padrão (SOM) para especificar configurações de execução e um arquivo Preferências para analisar, visualizar e imprimir os resultados. Combine o arquivo SOM e Preferences em um procedimento operacional padrão (SOP) conforme necessário.
    NOTA: Para análises não padronizadas, use o SOM para executar as análises e ajuste as configurações som entre as execuções através da janela Editar a janela SOM (veja abaixo) conforme necessário. Após a conclusão da execução, analise, visualize e imprima os resultados da execução alterando as Preferências conforme desejado. Para análises padronizadas de dimensionamento de grânulos, use um SOP para executar as análises.
    1. Inicie o software do analisador. Na Manu Principal, clique em SOP | Crie o MAGO SOM ou edite o SOM, ou no Painel de Status, clique em Editar SOM. Use o assistente ou a janela Editar a janela SOM para selecionar configurações para um SOM. As configurações tipicamente utilizadas para dimensionar grânulos de amostras de amido de doce de pote são resumidas na Tabela 2.
    2. Salve o SOM criado em um arquivo na janela SOM Wizard-Summary of Settings ou na janela Editar a janela SOM.
    3. Na Manu Principal, clique em SOP | Criar preferências do assistente ou editar preferências. Use o assistente ou as guias na janela de edição Preferências para selecionar configurações de preferência como as da Tabela 3 ou outras conforme desejado.
    4. Salvar as Preferências selecionadas em um arquivo na janela Criar preferências Assistente-Resumo de Configurações ou na janela Editar preferências.
    5. No menu principal, clique em SOP | Criar assistente SOP. Seguindo o guia passo a passo do assistente, digite uma descrição, selecione o arquivo SOM e Preferências para criar e salvar um SOP.

4. Análises de dimensionamento de grânulos das amostras de amido

  1. Prepare o Analisador
    1. Ligue o analisador, abra o software no computador e verifique o status Pronto na parte superior do Painel de Status após sua conexão automática com o analisador.
    2. Encha o frasco de eletrólitos com eletrólitos, esvazie o frasco de resíduos se necessário.
    3. Instale e fixe corretamente o tubo de abertura escolhido seguindo o guia no manual do usuário. Para um novo tubo de abertura não calibrado, calibra-o seguindo o guia passo-a-passo em Calibração | Calibrar a abertura no menu principal. Para obter um tubo de abertura calibrado, verifique a calibração seguindo o guia passo-a-passo do assistente do tubo de abertura de alteração sob o | de execução ou calibração Verifique a calibração da abertura no menu principal.
    4. Desbloqueie a plataforma de ensaio empurrando o clipe de liberação de bloqueio (na frente média da parede do compartimento da amostra esquerda) e baixe manualmente a plataforma para a parte inferior. Coloque um béquer analítico contendo 100 mL de eletrólito na plataforma, mova o agitador para a posição de agitação e levante manualmente a plataforma para a posição superior auto-travada para imergir o tubo de abertura e o agitador no eletrólito.
    5. Clique em Preencher na barra de ferramentas do instrumento inferior para que o analisador preencha automaticamente o sistema com o eletrólito e clique em Flush para que o analisador lave automaticamente o sistema.
    6. Carregue o SOM clicando em SOP | Carregue um SOM no Menu Principale use o SOM para executar uma análise sem um arquivo Preferências. Alternativamente, carregue um SOP clicando em SOP | Carregue um SOP no menu principal ou carregue SOP no Painel de Status e use o SOP para executar uma análise.
    7. Se estiver usando um SOP, clique em SOP | SOM Info ou Informações de Preferência no Menu Principal para verificar as configurações SOM e Preferência. Clique em | de amostra Digite Informações de exemplo no menu principal ou edite informações no painel de status para inserir as informações de amostra para a execução.
  2. Prepare a amostra de amido-metanol e as suspensões de dimensionamento
    1. Pesar duas ou uma amostra de 0,5 g de cada um dos dois ou três extratos de amido de réplica, respectivamente.
    2. Adicione cada uma das alíquotas de amido de 0,5 g a 5 mL de metanol em um tubo de centrífuga cônica de 50 mL e disperse totalmente os grânulos de amido usando vários pulsos de ultrassom de baixa intensidade (12-24 W/cm2) de um processador ultrassônico.
    3. Usando uma pipeta de transferência descartável, aplique uma pequena gota da suspensão amido-metanol (~0,2 mL) aos 100 mL de 50 g/L LiCl eletrólito de metanol sob constante agitação no béquer. Feche a porta do compartimento de amostra.
  3. Realize uma corrida de dimensionamento
    1. Clique em Visualizar na barra de ferramentas de instrumento inferior para iniciar uma execução de pré-visualização. No Painel de Status, verifique se a barra de concentração exibida dinamicamente está em verde e mostra uma faixa de concentração nominal de 5 a 8% para a suspensão.
    2. Clique em Parar na barra de ferramentas inferior para impedir a execução da pré-visualização. Se necessário, diluir a suspensão de eletrólitos de amido substituindo uma alíquota da suspensão pelo eletrólito e, em seguida, repita uma pré-visualização.
      NOTA: A faixa de concentração nominal de 5% a 8% da suspensão é fundamental para a conclusão de uma corrida sem paralisação devido ao bloqueio de abertura por grânulos agregados. Se necessário, ajuste o tamanho da amostra de gota e/ou a concentração da suspensão amido-metanol para fazer uma nova suspensão de onte-eletrólitos com a concentração nominal na faixa ideal.
    3. Após a verificação, clique em Iniciar na barra de ferramentas inferior para iniciar a execução. O analisador completa automaticamente a execução assim que a contagem total de grânulos de tamanho, que é exibida juntamente com o tempo de execução no Painel de Status em uma execução, atinge o conjunto Contagem Total (125.000 ou 250.000) pelo Modo de Controle do SOM. Dependendo da concentração de suspensão (dentro da faixa de 5-8% ou inferior), uma única corrida leva de 2 a 5 minutos ou mais.
      NOTA: Quando o analisador detectar automaticamente um bloqueio de abertura por configurações de detecção de bloqueio do SOM, ele abortará a execução, lava para desbloquear a abertura e iniciar uma nova execução. Esta ação de bloqueio é definida para repetir ao máximo por quatro vezes antes que o analisador cancele a operação de execução. Este problema de bloqueio de abortagem pode ser superado por meio de dois métodos técnicos, conforme observado na Tabela 2 e detalhado na discussão.
    4. Se necessário, execute uma repetição técnica (ver Tabela 2 e detalhado em Discussão) usando a mesma suspensão de eletrólitos de amido, simplesmente clicando em Iniciar ou Repetir na barra de ferramentas inferior.
    5. Após a conclusão de uma corrida ou repetição, esvazie o béquer, enxágue-o com metanol e recarregue-o com uma solução de eletrólito fresco de 100 mL para a próxima corrida.
    6. Durante uma execução, se uma caixa de notificação de Faixa de Tamanho Estendido aparecer quando a contagem de grânulos maiores que 60 μm exceder 0,1% da contagem total (de acordo com a configuração SOM), clique em Executar de 60% a 80% para executar uma faixa de dimensionamento dinâmico estendida para 80% do diâmetro da abertura.
      NOTA: A configuração de faixa de tamanho estendido controla ações para grânulos maiores que 60% do diâmetro de abertura (100 μm, neste caso). A configuração no SOM especifica a inclusão de grânulos de amido superiores a 60 μm quando suas contagens atingem mais de 0,1% da contagem total. A conclusão da corrida ainda é controlada pela contagem total, podendo levar um pouco menos tempo do que de outra forma sem a inclusão dos grânulos maiores totalizando menos de 0,1% (quantidade supostamente insignificante) da contagem total.
  4. Analise os resultados da execução
    1. Se um SOM foi usado para controlar as corridas, selecione Configurações de Preferências conforme desejado para visualização, impressão e análises estatísticas dos resultados usando o Assistente de Preferências de Criação ou as Preferências de Edição no SOP no Menu Principal.
    2. Os resultados de sobreposição de várias corridas em um único gráfico para comparação.
      1. Clique em Sobreposição na barra de ferramentas principal ou | de arquivos Sobreposição no Menu Principal para acessar a janela Sobreposição. Navegue e selecione vários arquivos de resultados desejados na caixa Arquivos, clique em Adicionar para movê-los para a caixa Arquivos Selecionados e clique em OK para sobrepor os resultados selecionados em um único gráfico.
      2. Para adicionar um arquivo a uma sobreposição aberta, clique em RunFile | Abra para sobreposição no Menu Executar para acessar a janela Sobreposição, navegar até o arquivo desejado e clicar para adicionar.
    3. Resultados médios de análises de replicação (2 extratos x 2 amostragem de amido ou 3 extratos x 1 amostragem de amido), e visualizar ou imprimir a distribuição média do tamanho do grânulo e estatísticas em uma lista ou gráfico.
      1. No menu principal, clique em Arquivo | FileTool | Média para abrir a janela Média. Navegue e selecione vários arquivos de resultados desejados na caixa Arquivos, clique em Adicionar para movê-los para a caixa Arquivos Selecionados e clique em OK para mediar os resultados selecionados e exibir a média em um único gráfico.
      2. Para incluir um arquivo de resultado adicional em uma distribuição média, no Menu Executar, clique em Executar | Abrir e Adicionar à Média para abrir a janela Adicionar à Média, navegar e adicionar o arquivo. A nova média aparece no gráfico na janela ou listagem de Executar (resultado).

5. Especificando a distribuição média

  1. Na janela Executar-Menu exibindo a distribuição média, clique em Calcular | Estatísticas médias no Menu Executar para abrir a janela de resumo de estatísticas, que exibe as estatísticas médias em linhas, e as estatísticas de gráficos para a distribuição média nas colunas.
  2. Use a média geométrica figure-protocol-1 gráfica () e S.D.(s*)na coluna de estatísticas de gráficos para especificar a distribuição média na forma figure-protocol-2 x/s*. Calcular as variações de medição de CV entre as distribuições médias de replicação dividindo a média (μ, a mesma figure-protocol-3 da distribuição média) das médias das distribuições médias com a média de S.D. (σ) listada na linha média estatística.
    NOTA: A média de S.D. (para μ) que avalia variações entre os meios das distribuições de replicação é diferente da S.D. geométrica gráfica (para figure-protocol-4 ) medir a propagação da distribuição média.

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Resultados

Para validar o procedimento e demonstrar a reprodutibilidade da distribuição determinada do tamanho do grânulo, foram realizadas análises de dimensionamento de amostras de amido de doces. Preparamos amostras de amido replicante (S1 e S2) de potes doces cultivados em campo de uma linha de reprodução SC1149-19 em idade de desenvolvimento semelhante usando um procedimento descrito anteriormente28. De cada extrato de amido, duas alíquotas de 0,5 g (a e b) foram amostradas, suspensas em 5 mL de metanol...

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Discussão

O procedimento delineado resolveu algumas questões críticas em vários métodos existentes para análises de tamanho de grânulo de amido, incluindo dimensionamento 1D ou 2D inadequado de grânulos 3D, distorção das medidas de dimensionamento devido a formas de grânulo não uniforme, baixa reprodutibilidade e validade estatística duvidosa devido a tamanhos limitados de amostra de granulo, especificações imprecisas ou inadequadas (especialmente o uso do tamanho médio) de tamanhos de grânulo na presença de forma de grânulo e dis...

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar

Agradecimentos

Este trabalho é parcialmente apoiado pelo Centro de Pesquisa agropecuária cooperativa e pelo Centro Integrado de Pesquisa em Segurança Alimentar da Faculdade de Agricultura e Ciências Humanas da Prairie View A&M University. Agradecemos a Hua Tian por seu apoio técnico.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Béquer AnalíticoBeckman Coulter Life SciencesA35595Béquer Smart-Technology (ST)
Tubo de abertura, 100 µ mBeckman Coulter Life SciencesA36394Para o
pipetador de transferência descartávelFisher Scientific (Fishersci.com)13-711-9AMOutros pipetadores de transferência descartáveis com orifício semelhante também podem ser usados.
Tubos de Centrífuga de Polipropileno Cônico Fisherbrand, 50 mlFisher Scientific (Fishersci.com)05-539-13Qualquer outro tipo semelhante de tubos pode ser usado.
Copos de vidro, 150 a 250 mlFisher Scientific (Fishersci.com)02-540KEsses copos são usados para conter metanol para lavar o tubo de abertura e o agitador entre as corridas.
LiClFisher ChemicalL121-100
MetanolFisher ChemicalA412-500Compre a granel, pois a análise usa uma grande quantidade de metanol.
Balanças de Precisão ML-T da Mettler Toledo30243412Mettler ToledoQualquer outra balança de precisão com resolução de 0,01 g a 1 mg funcionará.
Contador de relhas Multisizer 4eBeckman Coulter Life SciencesB23005O modelo antigo, Multisizer 3, também pode ser usado com um ligeiro ajuste de parâmetros. O modelo 4e vem com um 100 μ Tubo de abertura M. Outros tubos de abertura de diferentes diâmetros podem ser adquiridos separadamente da empresa.
Processador ultrassônico UP50HHielscher Tecnologia de ultrassomUP50HOutro sonicador de laboratório com baixa potência (< 50 Watt) também pode ser usada. Os sonotrodos MS1 e MS2 para o sonicador específico podem ser usados para dispersar grânulos de amido em 5 ml de metanol. Sempre use a configuração mais baixa primeiro, 20% de amplitude e 0,1 ou 0,2 ciclo, e aumente a configuração se os agregados persistirem em suspensão.
MS4E, da

Referências

  1. Shannon, J. C., Garwood, D. L., Boyer, C. D. Starch:Chemistry and Technology Food Science and Technology. BeMiller, J., Whistler, R. , Academic Press. Ch. 3 23-82 (2009).
  2. Singh, N., Singh, J., Kaur, L., Singh Sodhi, N., Singh Gill, B. Morphological, thermal and rheological properties of starches from different botanical sources. Food Chemistry. 81 (2), 219-231 (2003).
  3. Lindeboom, N., Chang, P. R., Tyler, R. T. Analytical, biochemical and physicochemical aspects of starch granule size, with emphasis on small granule starches: a review. Starch - Stärke. 56 (34), 89-99 (2004).
  4. Baldwin, P. M., Davies, M. C., Melia, C. D. Starch granule surface imaging using low-voltage scanning electron microscopy and atomic force microscopy. International Journal of Biological Macromolecules. 21 (1-2), 103-107 (1997).
  5. Jane, J. L., Kasemsuwan, T., Leas, S., Zobel, H., Robyt, J. F. Anthology of starch granule morphology by scanning electron microscopy. Starch-Stärke. 46 (4), 121-129 (1994).
  6. Matsushima, R. Starch: Metabolism and Structure. Nakamura, Y. , Ch. 13 425-441 (2015).
  7. Wang, S. -q, Wanf, L. -l, Fan, W. -h, Cao, H., Cao, B. -s Morphological analysis of common edible starch granules by scanning electron microscopy. Food Science. 32 (15), 74-79 (2011).
  8. Baldwin, P. M., Adler, J., Davies, M. C., Melia, C. D. Holes in starch granules: confocal, SEM and light microscopy studies of starch granule structure. Starch-Stärke. 46 (9), 341-346 (1994).
  9. Chakraborty, I., Pallen, S., Shetty, Y., Roy, N., Mazumder, N. Advanced microscopy techniques for revealing molecular structure of starch granules. Biophysical Reviews. 12 (1), 105-122 (2020).
  10. Bechtel, D. B., Wilson, J. D. Amyloplast formation and starch granule development in hard red winter wheat. Cereal Chemistry. 80 (2), 175-183 (2003).
  11. Evers, A. Scanning electron microscopy of wheat starch. III. Granule development in the endosperm. Starch-Stärke. 23 (5), 157-162 (1971).
  12. Wang, Y. J., White, P., Pollak, L., Jane, J. L. Characterization of starch structures of 17 maize endosperm mutant genotypes with Oh43 inbred line background. Cereal Chemistry. 70, 171-179 (1993).
  13. Peng, M., Gao, M., Abdel-Aal, E. S. M., Hucl, P., Chibbar, R. N. Separation and characterization of A-and B-type starch granules in wheat endosperm. Cereal Chemistry. 76, 375-379 (1999).
  14. Wilson, J. D., Bechtel, D. B., Todd, T. C., Seib, P. A. Measurement of wheat starch granule size distribution using image analysis and laser diffraction technology. Cereal Chemistry. 83 (3), 259-268 (2006).
  15. Liu, Q., Weber, E., Currie, V., Yada, R. Physicochemical properties of starches during potato growth. Carbohydrate Polymers. 51 (2), 213-221 (2003).
  16. Chmelik, J., et al. Comparison of size characterization of barley starch granules determined by electron and optical microscopy, low angle laser light scattering and gravitational field-flow fractionation. Journal of the Institute of Brewing. 107 (1), 11-17 (2001).
  17. Moon, M. H., Giddings, J. C. Rapid separation and measurement of particle size distribution of starch granules by sedimentation/steric field-flow fractionation. Journal of Food Science. 58 (5), 1166-1171 (1993).
  18. Wriedt, T. The Mie Theory: Basics and Applications. Wolfram, H., Wriedt, T. , Springer. Berlin Heidelberg. 53-71 (2012).
  19. Schuerman, D. W., Wang, R. T., Gustafson, B. ÅS., Schaefer, R. W. Systematic studies of light scattering. 1: Particle shape. Applied Optics. 20 (23), 4039-4050 (1981).
  20. Goering, K. J., Fritts, D. H., Eslick, R. F. A study of starch granule size and distribution in 29 barley varieties. Starch-Stärke. 25 (9), 297-302 (1973).
  21. Chen, Z., Schols, H. A., Voragen, A. G. J. Starch granule size strongly determines starch noodle processing and noodle quality. Journal of Food Sciences. 68 (5), 1584-1589 (2003).
  22. Dai, Z. M. Starch granule size distribution in grains at different positions on the spike of wheat (Triticum aestivum L.). Starch-Starke. 61 (10), 582-589 (2009).
  23. Edwards, M. A., Osborne, B. G., Henry, R. J. Effect of endosperm starch granule size distribution on milling yield in hard wheat. Journal of Cereal Science. 48 (1), 180-192 (2008).
  24. Karlsson, R., Olered, R., Eliasson, A. C. Changes in starch granule size distribution and starch gelatinization properties during development and maturation of wheat, barley and rye. Starch - Starke. 35 (10), 335-340 (1983).
  25. Li, W. -Y., et al. Comparison of starch granule size distribution between hard and soft wheat cultivars in Eastern China. Agricultural Sciences China. 7 (8), 907-914 (2008).
  26. Park, S. H., Wilson, J. D., Seabourn, B. W. Starch granule size distribution of hard red winter and hard red spring wheat: Its effects on mixing and breadmaking quality. Journal of Cereal Science. 49 (1), 98-105 (2009).
  27. Limpert, E., Stahel, W. A., Abbt, M. Log-normal distributions across the sciences: keys and clues. Bioscience. 51 (5), 341-352 (2001).
  28. Gao, M., et al. Self-preserving lognormal volume-size distributions of starch granules in developing sweetpotatoes and modulation of their scale parameters by a starch synthase II (SSII). Acta Physiologiae Plantarum. 38 (11), 259(2016).
  29. Wattebled, F., et al. STA11, a Chlamydomonas reinhardtii locus required for normal starch granule biogenesis, encodes disproportionating enzyme. Further evidence for a function of alpha-1,4 glucanotransferases during starch granule biosynthesis in green algae. Plant Physiology. 132 (1), 137-145 (2003).
  30. Ji, Y., Seetharaman, K., White, P. J. Optimizing a Small-Scale Corn-Starch Extraction Method for Use in the Laboratory. Cereal Chemistry. 81 (1), 55-58 (2004).
  31. Halloy, S., Whigham, P. The lognormal as universal descriptor of unconstrained complex systems: a unifying theory for complexity. Proceedings of the 7th Asia-Pacific Complex Systems Conference. , QLD. Australia. 309-320 (2004).
  32. Furusawa, C., Suzuki, T., Kashiwagi, A., Yomo, T., Kaneko, K. Ubiquity of log-normal distributions in intra-cellular reaction dynamics. Biophysics (Nagoya-shi). 1, 25-31 (2005).

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