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Artigo de método

Quantificação da Perfusão Cerebral por Laser Speckle Imaging e Volume de Infarto por RM em um Modelo Pré-clínico de AVC de Circulação Posterior

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DOI:

10.3791/61673

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17 de novembro de 2020

Neste artigo

Resumo

Um modelo canino de AVC LVO foi utilizado para desenvolver imagens de speckle a laser para monitorar a perfusão cerebral em tempo real.  A ressonância magnética ponderada em difusão foi otimizada para obter imagens do volume do infarto utilizando um alto valor b, permitindo ADC e MRA, correlacionados com DSA no momento do AVC.  Finalmente, as reconstruções do ADC correlacionaram-se com os achados histológicos.

Resumo

Fundo: A oclusão da artéria basilar (OBA) é um subconjunto do AVC da circulação posterior que acarreta uma mortalidade de até 90%.  O padrão clínico atual para diagnosticar AVC isquêmico inclui tomografia computadorizada (TC), angiografia e perfusão por TC e ressonância magnética (RM). Faltam modelos pré-clínicos de animais grandes para refletir com precisão a doença clínica, bem como métodos para avaliar a carga de AVC e avaliar os tratamentos.

Métodos: Descrevemos um modelo canino de AVC de oclusão de grandes vasos (LVO) na circulação posterior e desenvolvemos um protocolo de imagem de manchas a laser (LSI) para monitorar as alterações de perfusão em tempo real.  Em seguida, utilizamos ressonância magnética DWI de alto valor b (b = 1800s / mm2) para aumentar a sensibilidade de detecção. Também avaliamos a capacidade da angiografia por ressonância magnética (ARM) em avaliar a oclusão arterial e correlacionar com a ADS. Finalmente, verificamos o tamanho do infarto a partir do mapeamento do coeficiente de difusão aparente (ADC) com histologia.

Resultados: A administração de tromboembolismo ocluiu a artéria basilar rastreada pela DSA (n=7).   O LSI correlacionou-se com o DSA, demonstrando uma redução na perfusão após o início do AVC que persistiu ao longo do experimento, permitindo-nos monitorar a perfusão em tempo real.  DWI com um valor b otimizado para cães ilustrou o volume sistólico e nos permitiu derivar imagens de ADC e angiografia por ressonância magnética (MRA). A ARM realizada ao final do experimento correlacionou-se com a ADS realizada após a oclusão. Finalmente, a carga sistálica na ressonância magnética correlacionou-se com a histologia.

Conclusões: Nossos estudos demonstram imagens de perfusão em tempo real usando LSI de um modelo LVO tromboembólico canino de AVC de circulação posterior, que utiliza imagens multimodais importantes no diagnóstico e tratamento de AVC isquêmico.

Introdução

A prevalência de AVC em todo o mundo é de quase 25,7 milhões, sendo a maioria isquêmica1.  O AVC de circulação posterior é responsável por 20% de todos os AVCs, sendo a oclusão da artéria basilar a mais grave, aproximando-se de 90% de mortalidade 1,2.  Em 1995, o ativador de plasminogênio tecidual recombinante (rtPA) foi a primeira terapia aguda desenvolvida para AVC isquêmico em pacientes que se apresentaram dentro de 3 horas após o início do AVC3. Mais recentemente, a trombectomia mecânica demonstrou benefício no tratamento do ....

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Protocolo

Todos os procedimentos foram realizados em conformidade com a Lei de Bem-Estar Animal e o Guia para Cuidados e Uso de Animais de Laboratório (NRC 2011), conforme aprovado pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Ohio State University (IACUC).

1. Etapa 1: Preparo do Animal e Protocolo Cirúrgico Um modelo canino de AVC de oclusão da artéria basilar (BAO) foi utilizado conforme descrito anteriormente 9,10.

  1. Beagles adultos rápidos (8-13 kg, 14-21 meses) durante a noite com acesso gratuito à água.
  2. Injetar, pré-anest....

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Resultados

Gravação e imagem de perfusão de manchas a laser: O registro da perfusão foi realizado continuamente até que o animal fosse transportado para a RM e novamente no sacrifício (Figura 1A). Os dados mostraram que a perfusão cerebral diminuiu ~ 15% para 83 ± 10% no momento anterior à oclusão da artéria basilar (pré-BAO). Esse declínio nominal é provavelmente o resultado da inserção de um microcateter na artéria vertebral distal. Após a injeção do tromboêmbolo preparado, a perfusã.......

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Discussão

As causas mais comuns de acidente vascular cerebral da circulação posterior incluem embolia, aterosclerose de grandes artérias e doença arterial pequena5. A oclusão arterial basilar (OBA) representa um subconjunto de AVCs da circulação posterior, com morbidade e mortalidadesignificativas13. Nesse contexto, foi utilizado um modelo canino de AVC posterior agudo e desenvolvemos um protocolo LSI para monitorar a perfusão da região ocluída em te.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado em parte pela #GRT00049047 de subsídios da Mayfield Education and Research Foundation e pelo Ohio Department of Services Agency Accelerator Award #TECG20180269 à SMN.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
2% de cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio (TTC em PBS, pH 7,4)Sigma AldrichT8877
EDTA K3 vacutainersBecton DickinsonBD455036
EosinSurgipath3801602
Formalina, tamponado neutro, 10%Richard-Allan Scientific5701
Hematoxilina 560Surgipath3801570
Sistema de posicionamento HUG-U-VAC  Software deDRE
Inc.
Câmera Laser Speckle ImagingPerimed Inc., Jarfalla, SuéciaPeriCam PSI HR System
Vacutainer de heparina de lítio, 4,5%Becton DickinsonBD 368056
MatlabThe MathWorks, Inc., Natick, MA
OsiriX MD v.5.0 softwarePixmeo Inc, Genebra
Paraformaldeído 4% em PBSAlfa Aesar
PimSoft v1.4 softwarePerimed Inc.software que acompanha o equipamento
Ímã Prisma Fit 3 tesla (3T)Siemen's Diagnostics
Heparina sódica para injeção (para revestir seringa de gases sanguíneos)NovaPlus402525D
LabChart Veterinário ADInstruments AAJ61899APLSI

Referências

  1. Donkor, E. S. Stroke in the 21(st) Century: A Snapshot of the Burden, Epidemiology, and Quality of Life. Stroke Research and Treatment. 2018, 3238165(2018).
  2. Kaiser, E. E., West, F. D. Large animal ischemic ....

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Imagiologia por Ressonância MagnéticaOclusão da Artéria BasilarOclusão de Grandes VasosImagem Ponderada por DifusãoAngiografia por Ressonância MagnéticaModelo Canino de Acidente Vascular Cerebral

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