O comprimento do fascículo é um parâmetro importante da arquitetura muscular esquelética, que no geral é indicativo da capacidade de um músculo de produzir força1,2. Especificamente, o comprimento do fascículo de um músculo fornece uma visão sobre a amplitude absoluta de comprimentos sobre os quais um músculo pode gerar força ativa3,4. Por exemplo, dado dois músculos com valores idênticos para todos os parâmetros geradores de força isométrica (ou seja, comprimento médio de sarcomere, ângulo de pennação, área transversal fisiológica, estado de contração, etc.) exceto pelo comprimento da fascícula, o músculo com fascicles mais longo produziria sua força máxima em um comprimento mais longo e produziria força sobre uma faixa mais ampla de comprimentos do que o músculo com fascicles mais curtos3 . A quantificação do comprimento do fascículo muscular é importante para entender tanto a função muscular saudável quanto as alterações na capacidade de geração de força de um músculo, que pode ocorrer como resultado do uso muscular alterado (por exemplo, imobilização5,6, intervenção de exercício7,8,9, desgaste do salto alto10) ou uma mudança no ambiente do músculo (por exemplo, cirurgia de transferência de tendão11, distração do membro12 ). As medidas de comprimento do fascículo muscular foram originalmente obtidas através de experimentos ex vivo cadavéricos que permitem a medição direta de fascicles dissecados13,14,15,16. As informações valiosas fornecidas por esses experimentos ex vivo levaram ao interesse em implementar métodos in vivo17,18,19 para abordar questões que não puderam ser respondidas em cadáveres; métodos in vivo permitem quantificação de parâmetros musculares em um estado nativo, bem como em diferentes posturas articulares, diferentes estados de contração muscular, diferentes estados de carga ou descarga, e em populações com condições diferentes (ou seja, saudáveis/feridos, jovens/velhos, etc.). Mais frequentemente, o ultrassom é o método utilizado para a obtenção de comprimentos de fascículo muscular in vivo18,19,20; é mais rápido, menos caro e mais fácil de implementar do que outras técnicas de imagem, como a imagem do tensor de difusão (DTI)18,21.
O ultrassom de campo de visão estendido (EFOV-US) demonstrou ser um método válido e confiável para medir o comprimento do fascicle muscular in vivo. Embora comumente implementado, o ultrassom tradicional (T-US) tem um campo de visão que é limitado pelo comprimento da matriz do transdutor de ultrassom (tipicamente entre 4 e 6 cm, embora existam sondas que se estendem até 10 cm10)18,20. Para superar essa limitação, Weng et al. desenvolveram uma tecnologia EFOV-US que adquire automaticamente uma imagem "panorâmica" composta e bidimensional (até 60 cm de comprimento) de um scan dinâmico e de longa distância22. A imagem é criada por encaixar, em tempo real, uma sequência de imagens tradicionais de ultrassom no modo B, à medida que o transdutor digitaliza dinamicamente o objeto de interesse. Como as imagens sequenciais de T-US têm grandes regiões sobrepostas, as pequenas diferenças de uma imagem para outra podem ser usadas para calcular o movimento da sonda sem o uso de sensores de movimento externos. Uma vez calculado o movimento da sonda entre duas imagens consecutivas, a imagem "atual" é fundida sucessivamente com as imagens anteriores. O método EFOV-US permite a medição direta de fascicles musculares longos e curvos e tem sido demonstrado ser confiável entre músculos, ensaios e sonografistas23,24,25 e válido para superfícies planas e curvas23,26.
Implementar ultrassom para medir o comprimento da fascícula muscular in vivo não é trivial. Ao contrário de outras técnicas de imagem que envolvem protocolos mais automatizados (ou seja, ressonância magnética, tomografia computadorizada), o ultrassom depende da habilidade sonografista e do conhecimento anatômico27,28. Há preocupação de que o desalinhamento da sonda com o avião fascicle possa causar um erro substancial nas medidas de fascicle. Um estudo demonstra pouca diferença (em média < 3 mm) em medidas de comprimento de fascículo tomadas por ultrassom e ressonância magnética DTI, mas também mostra que a precisão de medição é baixa (desvio padrão de diferença ~12 mm)29. Ainda assim, foi demonstrado que um sonografista novato, com prática e orientação de um sonografista experiente, pode obter meaures válidos usando EFOV-US23. Assim, devem ser feitos esforços para demonstrar protocolos adequados para reduzir o erro humano e melhorar a precisão das medições obtidas usando o EFOV-US. Em última análise, o desenvolvimento e o compartilhamento de protocolos apropriados podem ampliar o número de experimentadores e laboratórios que podem reproduzir dados de comprimento de fascículo da literatura ou obter novos dados em músculos que ainda não foram estudados in vivo.
Neste protocolo, demonstramos como implementar o método EFOV-US para obter imagens musculoesqueléticos de alta qualidade que podem ser usadas para quantificar o comprimento do fascicle muscular. Especificamente, abordamos (a) a coleta de imagens EFOV-US de um único membro superior e um único músculo do membro inferior (b) determinando, em tempo real, a "qualidade" da imagem EFOV-US, e (c) quantificando parâmetros de arquitetura muscular offline. Fornecemos este guia detalhado para incentivar a adoção do método EFOV-US para a obtenção de dados de comprimento de fascículo muscular em músculos que não foram estudados in vivo devido aos seus longos fascicles.