Lesão cerebral traumática (TCE) é comumente associada com prejuízo de memória. Aqui, apresentamos um protocolo para avaliar a memória de trabalho espacial após o TBI através de uma tarefa métrica. Um teste métrico é uma ferramenta útil para estudar o prejuízo de memória de trabalho espacial após o TBI.
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Artigo de método
Um teste métrico para avaliar a memória espacial de trabalho em ratos adultos após lesão cerebral traumática
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Prejuízos à memória sensorial, de curto e longo prazo são efeitos colaterais comuns após lesão cerebral traumática (TCE). Devido às limitações éticas dos estudos humanos, os modelos animais fornecem alternativas adequadas para testar métodos de tratamento e estudar os mecanismos e complicações relacionadas da condição. Modelos experimentais de roedores têm sido historicamente os mais utilizados devido à sua acessibilidade, baixo custo, reprodutibilidade e abordagens validadas. Um teste métrico, que testa a capacidade de recordar a colocação de dois objetos a várias distâncias e ângulos um do outro, é uma técnica para estudar o comprometimento na memória de trabalho espacial (SWM) após o TBI. As vantagens significativas das tarefas métricas incluem a possibilidade de observação dinâmica, baixo custo, reprodutibilidade, relativa facilidade de implementação e ambiente de baixo estresse. Aqui, apresentamos um protocolo de teste métrico para medir o comprometimento do SWM em ratos adultos após a TBI. Este teste fornece uma maneira viável de avaliar a fisiologia e a fisiopatologia da função cerebral de forma mais eficaz.
Introdução
A prevalência de déficits neurológicos como atenção, função executiva e certos déficits de memória após lesão cerebral traumática moderada (TCE) é superior a 50%1,2,3,4,5,6,7,8. O TCE pode levar a graves prejuízos na memória espacial de curto prazo, de longo prazo e de trabalho9. Estes prejuízos de memória têm sido observados em modelos de roedores de TCE. Os modelos de roedores p....
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Protocolo
Os experimentos foram realizados seguindo as recomendações das Declarações de Helsinque e Tóquio e das Diretrizes para o Uso de Animais Experimentais da Comunidade Europeia. Os experimentos foram aprovados pelo Comitê de Cuidados Com Animais da Universidade Ben-Gurion do Negev. Um cronograma de protocolo é ilustrado na Figura 1.
1. Procedimentos cirúrgicos e tbi de percussão de fluido
- Selecione ratos adultos machos e femininos Sprague-Dawley, alojados a uma temperatura ambiente de 22 ± 1 °C, e umidade de 40%-60%, com ciclos claro-escuros de 12-12 h.
- Fornecer comida como chow e ad libitum....
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Resultados
A significância das comparações entre os grupos foi determinada por meio do teste De Mann-Whitney. A significância estatística dos resultados foi considerada em P < 0,05, enquanto a relevância estatisticamente alta foi medida em P < 0,01.
Os resultados não mostraram diferenças no INSS entre todos os grupos antes da intervenção e 28 dias após o TCE. Cada grupo era composto por 12 fêmeas ou 12 ratos machos. As pontuações do NSS obtiveram 48 h após a apresentação do TCE na Tabela 1<.......
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Discussão
Ao direcionar especificamente o processo de informações espaciais métricas, este teste métrico fornece uma ferramenta necessária para entender a deficiência de memória após o TBI. O protocolo apresentado neste artigo é uma modificação das tarefas comportamentais descritas anteriormente11. Uma tarefa métrica descrita anteriormente utilizou dois paradigmas diferentes, cada um consistindo de três sessões de habituação e uma sessão de teste. O primeiro paradigma consistia em aproximar os objetos famil.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Agradecemos à Professora Olena Severynovska; Maryna Kuscheriava M.Sc; Maksym Kryvonosov M.Sc; Daryna Yakumenko M.Sc; Evgenia Goncharyk M.Sc; e Olha Shapoval, doutorando no Departamento de Fisiologia, Faculdade de Biologia, Ecologia e Medicina, Universidade Oles Honchar Dnipro, Dnipro, Ucrânia por suas contribuições solidárias e úteis. Os dados foram obtidos como parte da dissertação de doutorado de Dmitry Frank.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 2% de clorexidina em solução alcoólica 70% | SIGMA - ALDRICH | 500 cc | Para antissepsia geral da pele no campo operatório |
| Bupivacaína 0,1 % | |||
| 4 placas de diferentes espessuras (1,5cm, 2,5cm, 5cm e 8,5cm) | Avalia o defeito | ||
| 4-0 Sutura de nylon | 4-00 | ||
| Frascos | Techniplast | ACBT0262SU | frascos de 150 ml cheios de 100 ml de água e 100 ml de solução de sacarose a 1%(p/v) |
| Garrafas (quatro) para tarefas | Para os objetos utilizados dois garrafinhos, primeiro redondo (altura 13,5 cm) e segundo facetado (altura 20 cm) e dois grandes frascos facetados, o primeiro 9x6 cm (altura 21 cm) e o segundo 7x7 cm (altura 21 cm). | ||
| Broca de Serra Copo de Diamante 3mm de diâmetro | Kit de Serra Copo de Vidro | Opcional. | |
| Balança Digital | SIGMA - ALDRICH | Rs 4,000 | |
| Tesoura de dissecação | SIGMA - ALDRICH | Z265969 | |
| Etanol 99,9 % | Solução de farmácia | 5%-10% usada para limpar equipamentos e remover odores | |
| EthoVision XT (Software de vídeo) | Noldus, Wageningen, Holanda | Dispositivo opcional | |
| de percussão de fluido | feito sob medida na oficina da universidade | Nenhuma marca específica é recomendada. | |
| Esponjas de gaze | Fisher | 22-362-178 | |
| Luvas (luvas finas de laboratório) | Opcional. | ||
| Aquecedor com termômetro | Heatingpad-1 | Modelo: HEATINGPAD-1/2 | Nenhuma marca específica é recomendada. |
| Horizon-XL | Mennen Medical Ltd | ||
| Isofluran, USP 100% | Piramamal Critical Care, Inc | NDC 66794-017 | Líquido anestésico para inalação |
| Office 365 ProPlus | Microsoft-Microsoft | Office Excel | |
| Microscópio Olympus BX 40 | Pinça operacional Olympus | ||
| SIGMA - ALDRICH | |||
| Operacional Tesoura | SIGMA - ALDRICH | ||
| PC Computador para gravação USV e análise de dados | CPU Intel | Intel® core i5-6500 @ 3.2GHz, 16 GB RAM, sistema operacional de 64 bits | |
| Caixas de plexiglass ligadas por uma passagem | Duas caixas de plexiglass transparentes de 30 cm &vezes; 20 cm &vezes; 20 cm de plexiglass ligadas por uma passagem estreita de 15 cm &vezes; 15 cm &vezes; passagem de 60 cm | ||
| Purina Chow | Purina | 5001 | A ração de laboratório para roedores dada a ratos, camundongos e hamster é uma nutrição de ciclo de vida que tem sido usada em pesquisas biomédicas para mais de 5 |
| gaiolas de ratos (gaiola doméstica para ratos ou outro recinto) | Techniplast | 2000P | Nenhuma marca específica é recomendada |
| Lâminas de bisturi 11 | SIGMA - ALDRICH | S2771 | |
| SPSS | SPSS Inc., Chicago, IL, EUA& | nbsp; Pacote de 20 | |
| Instrumentos Estereotáxicos | feitos sob medida na oficina | Nenhuma marca específica é recomendada | |
| Temporizador de intervalo do dispositivo de temporização | : Tempo para gravação de USVs | Opcional. Qualquer temporizador serve, embora seja conveniente usar um temporizador de intervalo se você estiver fazendo cócegas em vários ratos | |
| Dispositivo de tarefas topológicas e métricas | Feito por si mesmo na Universidade Ben Gurion de Negev | Plataforma circular branca de 200 cm de diâmetro e 1 cm de espessura na mesa | |
| Câmera de vídeo | Logitech | C920 HD PRO WEBCAM | Câmera de vídeo digital para gravação em alta definição do comportamento de ratos em teste de labirinto positivo |
| Windows 10 | Microsoft |
Referências
- Binder, L. M. Persisting symptoms after mild head injury: A review of the postconcussive syndrome. Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology. 8 (4), 323-346 (1986).
- Binder, L. M. ....
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Reimpressões e permissões
