Artigo de método

Amostragem de tecido adiposo subcutâneo humano usando uma técnica de mini-lipoaspiração

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DOI:

10.3791/62635

27 de setembro de 2021

Neste artigo

Resumo

O manuscrito e o vídeo associado demonstram uma técnica de biópsia percutânea para obter amostras de tecido adiposo subcutâneo de áreas ao redor do umbigo. Este método é uma maneira de baixo risco e eficiente para investigar uma série de parâmetros (por exemplo, expressão genética ou proteica, atividade enzimática, conteúdo lipídico) dentro do tecido adiposo.

Resumo

Estudos sobre tecido adiposo são úteis na compreensão metabólica e outras condições. O tecido adiposo subcutâneo humano é acessível. Com treinamento adequado e rigorosa adesão à técnica asséptica, amostras de adiposos subcutâneos podem ser obtidas de forma segura e eficiente em um ambiente não clínico pelos pesquisadores. Após a administração do lado anestésico local ao umbigo, uma agulha de 14 G presa a uma seringa de 5 ou 10 mL é inserida através da pele no tecido subcutâneo. Sob sucção, a seringa é movida em um movimento recíproco e fatiado para isolar fragmentos de tecido adiposo. Retirar o êmbolo é suficiente para garantir que fragmentos de tecido adiposo sejam aspirados através da agulha na seringa. Uma única biópsia pode coletar cerca de 200 mg de tecido. Esta técnica de biópsia é muito segura tanto para os participantes quanto para a equipe de pesquisa. Após a biópsia, os participantes podem retomar a maioria das atividades cotidianas, embora evitem natação e atividades excessivamente extenuantes por 48h para evitar sangramento excessivo. Os participantes podem realizar duas biópsias com segurança em um único dia, o que significa que a técnica pode ser aplicada em estudos de intervenção aguda antes do pós-adoeça.

Introdução

O tecido adiposo pode fornecer informações úteis sobre a função metabólica dos seres humanos. O tecido adiposo subcutâneo humano é facilmente acessível. Uma técnica para extração subcutânea de tecido adiposo foi descrita pela primeira vez em meados dos anos 801; desde então, o protocolo inicial foi aprimorado para aumentar o rendimento e melhorar a tolerabilidade dos participantes do estudo. O tecido adiposo subcutâneo pode ser obtido de inúmeros locais, mais comumente a partir da glutei1 e área abdominal2. As amostras deste último podem ser mais desejáveis, pois fornecem informações mais valiosas....

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Protocolo

NOTA: O Comitê de Pesquisa Clínica da Universidade de Stirling, Invasivo ou Clínico aprovou o procedimento de biópsia descrito abaixo. Todos os estudos de pesquisa que utilizam esse procedimento devem ser aprovados pelo comitê de ética independente apropriado. O fazsocedor de biópsia deve ter concluído o treinamento formal na técnica descrita de acordo com as exigências de sua instituição. Normalmente, isso envolve observar uma demonstração da técnica de biópsia de tecido adiposo descrita por um médico certificado pela diretoria, seguida de prática supervisionada. Uma vez que o estagiário tenha realizado 10 biópsias de tecido adiposo prática em assuntos voluntários so....

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Resultados

O procedimento descrito de biópsia de tecido adiposo é uma técnica eficiente e de baixo risco para os pesquisadores obterem amostras de tecido adiposo subcutâneo de voluntários humanos. Foram realizadas 39 biópsias subcutâneas de tecido adiposo utilizando o procedimento descrito em 11 mulheres saudáveis e de peso normal (idade, 27,4 ± 3,3 anos; índice de massa corporal (IMC), 22,6 ± 1,5 kg.m2). Todos os participantes compareceram ao laboratório entre 7h e 10h, após um período de jejum de 8 a 12 horas. O rendim.......

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Discussão

O protocolo descrito e o vídeo associado fornecem uma visão geral passo a passo de uma técnica de mini-lipoaspiração para obter amostras de tecido adiposo subcutâneo da área abdominal. Este grupo de pesquisa realizou um total de 124 biópsias ao longo de 19 meses sem efeitos adversos nos participantes. O procedimento é seguro e associado ao risco mínimo aos participantes ou à equipe de biópsia, desde que sejam seguidas as medidas de segurança descritas. A técnica asséptica (incluindo abertura e dispensação de equipamentos.......

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Divulgações

Os autores não têm conflitos de interesse para declarar.

Agradecimentos

Os autores não têm fundos para declarar.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Item: 14 G agulha
14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm
B Braun4665473Por biópsia: 1
Item: 21 G agulha
21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm
TerumoAN*2138R1Por biópsia: 2
Item: 26 G  agulha
26 G x 1/2" agulha microlance 0.45 mm x 13 mm
BD303800Por biópsia: 2
Item: Seringa de 5 mL
5 mL luer
DB plastipak302187Por biópsia: 2
Item: Curativo adesivo para feridas
Curativo pós-operatório Opsite 9,5 x 8,5
Smith & Sobrinho6600709Por biópsia: 1
Item: Bisturi estéril descartável
Bisturi descartável Lâmina estéril nº 10
Swann Morton/0501Por biópsia: 1
Item: Icepack
BlueDot Reutilizável Hot/Cold Pack 26,5 cm x 13,0 cm
NuCareF711Por biópsia: 1
Item: Solução antisséptica à base de iodo
Solução antisséptica Videne
Ecolab Videne3030440Per biópsia: q.s
Item: Lidocaína 2% sem epinefrina
Lidocaína 2% injeção 5 mL
B Braun3558553Por biópsia: 5 mL
Item: Luvas não estéreis
Luvas de nitrilo sem pó sensível Starguard
StarguardSG-N-SPor biópsia: par
Item: Cloreto de sódio 0,9%
Chlride de sódio 0,9% p/v infusão intravenosa BP
BBraunS8004-5384Por biópsia: q.s.
Item: Solução de estabilização*
Solução de estabilização de RNAlater
ThermoFisher ScientificAM7020Por biópsia: q.s
Item: Pinça estéril
Pinça estéril
RocialleRML109-006Por biópsia: 1
Item: Cotonetes de gaze estéreis
Cotonetes não tecidos estéreis 7,5 x 7,5 cm
Prestige1860Por biópsia: 5
Item: Luvas estéreis
Luvas médicas sem pó estéril de vinil macio Prestige
S: P4301
M:P3302
L:P3301
Por biópsia: par
Item: Tubos de microcentrífuga estéreis
1,5 mL Tubos de microcentrífuga estéreis
StarLabI1415-5510Por biópsia: q.s
Item: Folha estéril
Papel branco liso 90 x 90 cm
RocialleRML 126-216Por biópsia: 1
Item: Barco de pesagem
Barcos de pesagem em forma de diamante
Heathrow ScientificHS1427CPor biópsia: 1
* denota materiais
opcionais

Referências

  1. Beynen, A. C., Katan, M. B. Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition. American Journal of Clinical Nutrition. 42 (2), 317-322 (1985).
  2. Moran, C. N., et al.

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