Artigo de método

Um Método Simples Modificado para Indução de Infarto do Miocárdio em Camundongos

DOI:

10.3791/63042

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3 de dezembro de 2021

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1Department of Cardiology, The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, 2Department of Cardiology, Ren Ji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

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Sob anestesia adequada, o coração de camundongo foi exteriorizado através do espaço intercostal, e o infarto do miocárdio foi induzido com sucesso pela ligadura da artéria descendente anterior (DA) usando materiais prontamente disponíveis na maioria dos laboratórios.

Resumo

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O infarto do miocárdio (IAM) representa uma das principais causas de morte. Os modelos de IM são amplamente utilizados para investigar os patomecanismos do remodelamento pós-IM e avaliação de novas terapêuticas. Diferentes métodos (por exemplo, tratamento com isoproterenol, criolesão, ligadura da artéria coronária, etc.) têm sido usados para induzir o infarto agudo do miocárdio. No entanto, os métodos tradicionais de ligadura coronária em camundongos são tecnicamente desafiadores. O presente estudo descreve um processo simples e eficiente para indução de IM em camundongos com materiais prontamente disponíveis. A pele do tórax de camundongos foi aberta sob anestesia estável. O coração foi imediatamente exteriorizado através do espaço intercostal após separação romba do peitoral maior e peitoral menor. O ramo descendente anterior (DA) esquerdo foi ligado com sutura 6-0 a 3 mm de sua origem. Após a ligadura da DAD, a coloração com cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio (TTC) indicou indução bem-sucedida de IM e mudanças temporais do tamanho da cicatriz pós-IM. Enquanto isso, os resultados da análise de sobrevida mostraram mortalidade evidente dentro de 7 dias após o IAM, principalmente devido à ruptura cardíaca. Além disso, a avaliação ecocardiográfica pós-IM demonstrou indução bem-sucedida de disfunção contrátil e remodelamento ventricular. Uma vez dominado, um modelo MI pode ser estabelecido em camundongos dentro de 2-3 min com materiais prontamente disponíveis.

Introdução

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O infarto do miocárdio (IAM) representa uma das principais causas de morte e incapacidade no mundo1,2,3,4,5. Apesar da reperfusão oportuna, atualmente há uma falta de terapias eficazes para tratar o remodelamento cardíaco pós-IM. Correspondentemente, esforços consideráveis têm sido feitos para a exploração mecanicista e terapêutica para a IM 6,7,8. Vale ressaltar que o estabelecimento de modelos de MI é um pré-requ....

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Protocolo

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Os experimentos envolvendo trabalho com animais são realizados com todas as aprovações necessárias do Comitê de Ética de Bem-Estar Animal de Laboratório do Hospital Renji, Shanghai Jiao Tong University, School of Medicine (R52021-0506). Camundongos C57BL/6J fêmeas e machos com idade entre 8-10 semanas foram usados no estudo.

1. Preparo do aparelho de anestesia simplificado (OPCIONAL)

NOTA: Esta é uma configuração pré-operatória opcional e pode ser substituída por anestesia titulável, conforme mencionado na seção 2. O comité institucional de ética em matéria de animais e o(s) veterinário(s) devem se....

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Resultados

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O protocolo experimental e algumas das etapas críticas são mostrados na Figura 1. O aparelho de anestesia simplificado induziu a anestesia. Como mostrado na Figura 2A, a anestesia induzida foi estável, refletida pelas frequências respiratórias regulares (variando de 90-107 ciclos/min nos camundongos testados). Após a ligadura da artéria coronária, a análise da coloração TTC indicou indução bem-sucedida de infarto do miocárdio e mudanças temporais do tamanho da c.......

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Discussão

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O presente relato demonstrou um protocolo fácil para indução de IM em camundongos com materiais prontamente disponíveis, que foi modificado a partir de um método relatado por Gao16. Modelos murinos de IM são indispensáveis para exploração mecanística e triagem de fármacos para disfunção e remodelamento pós-IAM12. Dentre as técnicas existentes para indução de IM, a ligadura da artéria coronária representa a mais praticada. A ligadura da artéria coronária recapitula fielmente.......

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Divulgações

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Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

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Este trabalho foi apoiado por subsídios da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (81930007, 81625002, 81800307, 81470389, 81500221, 81770238), do Programa de Líderes Acadêmicos Excepcionais de Xangai (18XD1402400), da Comissão de Ciência e Tecnologia do Município de Xangai (201409005200), do Programa de Talentos de Xangai Pujiang (2020PJD030) e da Fundação de Ciência Pós-Doutoral da China (2020M671161, BX20190216).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
2,3,5-Trifeniltetrazólio cloretoSIGMAT8877-25GTTC coloração
4-0 sutura de sedaYUANKANG4-0Autoclave de instrumento cirúrgico
HIRAYAMAHVE-50Esterilização para a
buprenorfinaQinghai Pharmaceutical FACTORY Co., Ltd.H10940181reduzir a dor pós-operatória
Tubo de centrifugaçãoBiological Hope1850-K15ML
Creme depilatórioZIKER BIOTECHNOLOGYZK-L2701Agente de depilação para animais de laboratório
FórcepsRWDF12028Instrumento cirúrgico
Filtro de gásZHAOXINSA-493Proteção do operador
IsofluranoRWD20071302Usado para anestesia
Fonte de luzBeijing PDVLG-150BLâmpada de operação
Hemostato de micro-mosquitoFST13011-12Instrumento cirúrgico
AgulhaBINXIONG42180104Instrumento cirúrgico
Agulha e sutura de seda 6-0JIAHESC086Instrumento cirúrgico
Suporte de agulhaShangHaiJZJ32030Instrumento cirúrgico
Porta-agulhasShangHaiJZJ32010Instrumento cirúrgico
Cotonetes de iodopovidonaSingleLadyGB26368-2010Tesoura de desinfecção
daCNSTRONGJYJ1030Instrumento cirúrgico
Creme para os olhos estérilShenyang Xingqi Pharmaceutical Co., Ltd.H10940177prevenir a secura da córnea
Sistema de imagem de ultrassom de ultra-alta resolução para pequenos animaisVisualSonicsVevo 2100Análise ecocardiográfica
sólida pele

Referências

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  1. Fu, Y., et al. A simple and efficient method for in vivo cardiac-specific gene manipulation by intramyocardial injection in mice. Journal of Visualized Experiments. (134), e57074(2018).
  2. Pell, S., Fayerweather, W. E.

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Myocardial InfarctionCoronary Artery LigationMouse MI ModelVentricular RemodelingTTC StainingPost MI RemodelingContractile DysfunctionEchocardiographic AssessmentCardiac RuptureIntramyocardial Injection

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