Ilustramos os métodos envolvidos na triagem e identificação dos micróbios produtores biosurfactantes. Também são apresentados métodos de caracterização cromatografia e identificação química dos biosurfactantes, determinando a aplicabilidade industrial do biosurfactante no aprimoramento da recuperação residual do óleo.
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Artigo de método
Recuperação aprimorada do óleo usando uma combinação de biosurfactantes
Neste artigo
Resumo
Resumo
Biosurfactantes são compostos ativos na superfície capazes de reduzir a tensão superficial entre duas fases de diferentes polaridades. Os biosurfactantes vêm surgindo como alternativas promissoras aos surfactantes químicos devido à menor toxicidade, alta biodegradabilidade, compatibilidade ambiental e tolerância a condições ambientais extremas. Aqui, ilustramos os métodos utilizados para a triagem de micróbios capazes de produzir biosurfactantes. Os micróbios produtores de biosurfactantes foram identificados usando o colapso da queda, a propagação do óleo e os ensaios do índice de emulsão. A produção biosufactante foi validada determinando a redução da tensão superficial da mídia devido ao crescimento dos membros microbianos. Descrevemos também os métodos envolvidos na caracterização e identificação de biosurfactantes. A cromatografia de camada fina do biosurfactante extraído seguido de coloração diferencial das placas foi realizada para determinar a natureza do biosurfactante. LCMS, 1H NMR e FT-IR foram utilizados para identificar quimicamente o biosurfactante. Ilustramos ainda os métodos para avaliar a aplicação da combinação de biosurfactantes produzidos para melhorar a recuperação residual do óleo em uma coluna simulada de embalagem de areia.
Introdução
Biosurfactantes são as moléculas anfípáticas de superfície ativa produzidas por microrganismos que têm a capacidade de reduzir a superfície e a tensão interfacial entre duas fases1. Um biosurfactante típico contém uma parte hidrofílica que é geralmente composta de uma moiety de açúcar ou uma cadeia de peptídeos ou aminoácidos hidrofílicos e uma parte hidrofóbica que é composta de uma cadeia de ácidos graxos saturados ou insaturados2. Devido à sua natureza anfípppica, os biosurfactantes se reúnem na interface entre as duas fases e reduzem a tensão interfacial no limite, o que facilita a dispersão de uma fase para a outra<....
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Protocolo
1. Crescimento de cepas microbianas
- Pese 2 g de pó de Caldo de Luria e adicione a 50 mL de água destilada em um frasco cônico de 250 mL. Misture o conteúdo até que o pó se dissolva completamente e coma o volume de 100 mL usando água destilada.
- Da mesma forma, prepare mais dois frascos de 100 mL de Caldo de Luria e coloque tampões de algodão no pescoço dos frascos.
- Cubra os plugues de algodão com papel alumínio e autoclave os frascos por 15 min a 121 °C e 15 psi para esterilizar a mídia.
- Depois de autoclaving, deixe a mídia esfriar até a temperatura ambiente.
- Para a preparação da cultura primária de uma....
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Resultados
Três cepas bacterianas (Rhodococcus sp. IITD102, Lysinibacillus sp. IITD104 e Paenibacillus sp. IITD108) foram rastreadas para a produção de biosurfactantes por vários ensaios, que incluíram ensaio de colapso de queda, ensaio de deslocamento de óleo, ensaio do índice de emulsão e redução da tensão superficial. Supernantes livres de células de todas as três cepas bacterianas e uma solução de surfactante químico resultaram em um colapso de queda e, portanto, foram pontuados positivos para a prese.......
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Discussão
Os biosurfactantes são um dos mais versáteis grupos de componentes biologicamente ativos que estão se tornando alternativas atraentes para surfactantes químicos. Eles têm uma ampla gama de aplicações em inúmeras indústrias, como detergentes, tintas, cosméticos, alimentos, produtos farmacêuticos, agricultura, petróleo e tratamento de água devido à sua melhor capacidade de lintibilidade, menor CMC, estrutura diversificada e simpatia ambiental18. Isso levou a um maior interesse em descobrir mais cepa.......
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Divulgações
Os autores não declaram conflitos de interesse.
Agradecimentos
Os autores gostariam de agradecer ao Departamento de Biotecnologia, Governo da Índia, pelo apoio financeiro.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Pipeta de 1 ml | Eppendorf, Alemanha | G54412G | |
| 1H NMR | Espectrômetro tipo Bruker Avance AV-III, EUA | ||
| Pipeta de 20 ul | Thermo scientific, EUA | H69820 | |
| Autoclave | JAISBO, Índia | Ser nº 5923 | Jain Scientific |
| Queimador de chama azul | Rocker científico, Taiwan | dragon 200 | |
| Butanol | GLR inovations, Índia | GLR09.022930 | |
| coluna C18 | Agilent Technologies, EUA | 770995-902 | |
| Centrífuga | Eppendorf, Alemanha | 5810R | |
| Clorofórmio | Merck, Índia | 1.94506.2521 | |
| Clorofórmio-d | SRL, Índia | 57034 | |
| Tubos Falcon | Tarsons, Índia | 546041 | Polipropileno esterilizado por radiação |
| FT-IR | Thermo Fisher Scientific, EUA& | nbsp; Nicolet iS50 | |
| Exaustor | Khera, Índia | 47408 | |
| Ácido acético glacial | Merck, Índia | 1.93002 | |
| Contas de vidro | Merck, Índia | 104014 | |
| Corrediças de vidro | Polar industrial Corporation, EUA | Blue Star | 75 mm * 25 mm |
| Lã de vidro | Merk, Índia | 104086 | |
| Ácido clorídrico | Merck, Índia | 1003170510 | |
| Incubadora | Thermo Scientific, EUA | MaxQ600 | Incubadora agitada |
| Incubadora | Khera, Índia | Sunbim | |
| Iodo resublimado | Merck, Índia | 231-442-4 | grânulos K12 resublimados |
| - Tensiômetro Kruss Kruss | Scientific, Alemanha | K100 | |
| Cabine de fluxo de ar laminar | Thermo Scientific, China | 1300 Series A2 | |
| LCMS | Agilent Technologies, EUA | 1260 Infinity II | |
| Luria Broth | HIMEDIA, Índia | M575-500G | Metanol em pó |
| Merck, Índia | 107018 | ||
| Ninidrina | Titan Biotech Limited, Índia | 1608 | |
| p- anisaldeído | Sigma, EUA | 204-602-6 | |
| Placa de Petri | Tarsons, Índia | 460090-90 MM | Polipropileno esterilizado por radiação |
| Saponina | Merck, Índia | 232-462-6 | |
| Cloreto de sódio | Merck, Índia | 231-598-3 | |
| Tubos de ensaio | Borosil, Índia | 9800U06 | Placas TLC de tubos de vidro |
| Merck, Índia | 1055540007 | ||
| Vortex | GeNei, Índia | 2006114318 | |
| Banho-maria | Julabo, Índia | SW21C |
Referências
- Desai, J. D., Banat, I. M. Microbial production of surfactants and their commercial potential. Microbiology and Molecular Biology Reviews. 61 (1), 47-64 (1997).
- Banat, I. M. Biosurfactants pr....
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Reimpressões e permissões
