Comparação de métodos para isolar fungos entomopatômicos de amostras de solo

Thais A. Correa; Fernanda S. Santos; Mariana G. Camargo; Simone Quinelato; Vânia R. E. P. Bittencourt; Patricia S. Golo

doi:10.3791/63353

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Artigo de método

Comparação de métodos para isolar fungos entomopatômicos de amostras de solo

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DOI:

10.3791/63353

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6 de janeiro de 2022

Thais A. Correa¹ , Fernanda S. Santos² , Mariana G. Camargo³ , Simone Quinelato² , Vânia R. E. P. Bittencourt¹^,³ , Patricia S. Golo¹^,³

¹Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, ²Laboratório de Taxonomia Bioquímica e Bioprospecção de Fungos/Coleção de Cultura de Fungos Filamentosos, Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ), ³Departamento de Parasitologia Animal, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro

Neste artigo

Resumo

Colônias fúngicas entomopatômicas são isoladas de amostras de solo tropical usando isca tenebrio , isca de Galleria , bem como meio artificial seletivo, ou seja, ágar de dextrose de batata enriquecido com extrato de levedura suplementado com clorofenicol, tiaabzolendae e ciclohexmida (meio CTC).

Resumo

O objetivo do presente estudo é comparar a eficácia do uso de iscas de insetos versus meio seletivo artificial para isolar fungos entomopatogênicos (EPF) a partir de amostras de solo. O solo é um rico habitat para microrganismos, incluindo o EPF particularmente pertencente aos gêneros Metarhizium e Beauveria, que podem regular pragas de artrópodes. Produtos biológicos à base de fungos estão disponíveis no mercado principalmente para controle de pragas de artrópodes agrícolas. No entanto, apesar da alta biodiversidade endêmica, apenas algumas cepas são usadas em bioprodutos comerciais em todo o mundo. No presente estudo, 524 amostras de solo foram cultivadas em ágar de dextrose de batata enriquecido com extrato de levedura suplementado com clorofenicol, thiabendazol e cicloheximida (meio CTC). O crescimento das colônias fúngicas foi observado durante 3 semanas. Todos os Metarhizium e Beauveria EPF foram morfologicamente identificados no nível do gênero. Além disso, alguns isolados foram identificados molecularmente no nível da espécie. Vinte e quatro dessas 524 amostras de solo também foram pesquisadas para ocorrência de EPF utilizando o método de isca de insetos (Galleria mellonella e Tenebrio molitor). Foram isoladas 51 cepas de EPF (41 Metarhizium spp. e 10 Beauveria spp.) das 524 amostras de solo. Todas as cepas fúngicas foram isoladas de plantações ou pastagens. Das 24 amostras selecionadas para comparação, 91,7% foram positivas para ePF usando isca galleria , 62,5% usando isca Tenebrio e 41,7% utilizando CTC. Nossos resultados sugeriram que o uso de iscas de insetos para isolar o EPF do solo é mais eficiente do que usar o meio CTC. A comparação de métodos de isolamento, além da identificação e conservação da EPF, tem impacto positivo no conhecimento sobre biodiversidade. O aprimoramento da coleção EPF apoia o desenvolvimento científico e a inovação tecnológica.

Introdução

O solo é a fonte de vários microrganismos, incluindo fungos entomopatômicos (EPF). Este grupo particular de fungos é reconhecido por sua capacidade de colonizar e muitas vezes matar hospedeiros artrópodes, especialmente insetos¹. Após isolamento, caracterização, seleção de cepas virulentas e registro, a EPF é produzida em massa para o controle artrópode-praga, que sustenta sua relevância econômica². Assim, o isolamento da EPF é considerado o primeiro passo para o desenvolvimento de um biopesticida. Beauveria spp. (Hipocreales: Cordycipitaceae) e Metarhizium spp. (Hipocreales: Clavicipitaceae) são os fun....