Em Ovo Injeção intravascular em embriões de frango

Kai Jin; Jing Zhou; Gaoyuan Wu; Ziyi Lian; Zongyi Zhao; Shujian Zhou; Chen Chen; Hongyan Sun; Yingjie Niu; Qishenng Zuo; Yani Zhang; Jiuzhou Song; Guohong Chen; Bichun Li

doi:10.3791/63458

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Artigo de método

Em Ovo Injeção intravascular em embriões de frango

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DOI:

10.3791/63458

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3 de junho de 2022

Kai Jin¹^,² , Jing Zhou¹^,² , Gaoyuan Wu¹^,² , Ziyi Lian¹^,² , Zongyi Zhao¹^,² , Shujian Zhou¹^,² , Chen Chen¹^,² , Hongyan Sun¹^,² , Yingjie Niu¹^,² , Qishenng Zuo¹^,² , Yani Zhang¹^,² , Jiuzhou Song³ , Guohong Chen¹^,² , Bichun Li¹^,²^,⁴

¹Joint International Research Laboratory of Agriculture and Agri-Product Safety of Ministry of Education of China, Yangzhou University, ²Key Laboratory of Animal Breeding Reproduction and Molecular Design for Jiangsu Province, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, ³Animal & Avian Sciences, University of Maryland, College Park, ⁴College of Biotechnology, Jiangsu University of Science and Technology

Neste artigo

Resumo

O objetivo geral deste artigo é descrever como se apresentar na injeção intracelular ovo de materiais exógenos em embriões de frango. Essa abordagem é muito útil para estudar a biologia do desenvolvimento de embriões de frango.

Resumo

Como um sistema modelo clássico de biologia de embriões, o embrião de frango tem sido usado para investigar o desenvolvimento e diferenciação embrionária. A entrega de materiais exógenos em embriões de frango tem uma grande vantagem para estudar a função genética, a reprodução transgênica e a preparação da quimera durante o desenvolvimento embrionário. Aqui mostramos o método de injeção intravascular ovo em que materiais exógenos, como vetores plasmídeos ou células germinativas primordiais modificadas (PGCs) podem ser transferidos para embriões de frango doadores em estágios iniciais de desenvolvimento. Os resultados mostram que a injeção intravascular através da aorta dorsal e da cabeça permite que materiais injetados se difundam em todo o embrião através do sistema circulatório sanguíneo. No protocolo apresentado, a eficácia da introdução do vetor plasmídeo exógeno e lentiviral, e a colonização de PGCs exógenos injetados na gônada receptora, foram determinadas pela observação da fluorescência nos embriões. Este artigo descreve procedimentos detalhados deste método, fornecendo assim uma excelente abordagem para estudar a função genética, embrião e biologia do desenvolvimento, e a produção de frango gônd-quimérico. Em conclusão, este artigo permitirá que os pesquisadores realizem na injeção intravascular de ovo de materiais exógenos em embriões de frango com grande sucesso e reprodutibilidade.

Introdução

Os embriões de frango têm sido amplamente utilizados por séculos em aplicações biológicas, de desenvolvimento, imunológicos, patológicos e outras^aplicações biológicas ^1,2,3. Eles têm muitas vantagens inerentes a outros modelos animais no estudo da toxicologia e biologia celular⁴. Os embriões de frango são facilmente acessíveis e podem ser manipulados in vitro e diretamente observados em qualquer estágio de desenvolvimento, o que fornece um sistema de modelo de pesquisa de embriões útil.

Em geral, os métodos atuais d....