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Artigo de método

Técnica de Cuff Modificada para Modelo de Transplante Cardíaco Heterotópico Cervical:

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DOI:

10.3791/63504

7 de fevereiro de 2022

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

No presente protocolo, um modelo de transplante cardíaco em camundongos é utilizado para investigar o mecanismo de rejeição do enxerto cardíaco. Neste modelo heterotópico de transplante cardíaco, a eficiência da operação é melhorada, e a sobrevida dos enxertos cardíacos é garantida por uma anastomose cervical término-terminal do implante cardíaco usando uma técnica de Cuff modificada.

Resumo

A rejeição do enxerto cardíaco limita a sobrevida em longo prazo dos pacientes após o transplante cardíaco. Um modelo de transplante cardíaco em camundongos é ideal para investigar o mecanismo de rejeição do aloenxerto cardíaco em estudos pré-clínicos devido à sua alta homologia com genes humanos. Esse entendimento ajudaria a desenvolver abordagens únicas para melhorar a sobrevida em longo prazo dos pacientes tratados com aloenxertos cardíacos. Em um modelo de camundongo, o implante de coração de doador abdominal é comumente realizado com anastomose término-terminal à aorta e veia cava inferior do receptor por meio de pontos. Nesse modelo, o coração do doador é implantado por anastomose término-terminal com a artéria carótida e veia jugular do receptor pela técnica de Cuff modificado. A cirurgia de transplante é realizada sem costura e, assim, pode aumentar a sobrevida do receptor, uma vez que não há interferência no suprimento sanguíneo e refluxo venoso da parte inferior do corpo. Este modelo murino ajudaria a investigar os mecanismos subjacentes à rejeição imunológica e patológica (aguda/crônica) de aloenxertos cardíacos.

Introdução

O transplante cardíaco tornou-se o tratamento padrão para a insuficiência cardíaca terminal. Mais de 5.500 transplantes cardíacos por ano são realizados nas organizações registradas na Sociedade Internacional de Transplante de Coração e Pulmão. Entre os receptores de transplante cardíaco alogênico, a taxa de rejeição em 1 ano ainda é de >10%, enquanto a taxa de rejeição em 3 anos aumentou para 36%1,2. No entanto, faltam tratamentos profiláticos efetivos para pacientes com rejeição do enxerto cardíaco. Portanto, estudos em modelos animais são necessários para elucidar os mecanismos fisiológicos subjacentes à re....

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Protocolo

Todos os experimentos com animais foram realizados de acordo com o Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Eight Edition, National Research Council (US) 2011. Os procedimentos envolvendo animais foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais do Hospital do Câncer da Universidade de Chongqing, Chongqing, China. Camundongos BALB/c e C57BL/6 machos, pesando 20-30 g, obtidos de fontes comerciais (ver Tabela de Materiais), foram usados para o estudo do transplante cardíaco alogênico. Os camundongos C57BL/6 foram utilizados como doadores e receptores singênicos, enquanto os camundongos BALB/c serviram como receptores alogênicos. Um esque....

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Resultados

Neste modelo de transplante cardíaco heterotópico cervical em camundongos, a taxa de sobrevivência dos camundongos receptores foi de aproximadamente 95,2% (20 dos 21 camundongos sobreviveram). A principal causa de óbito foi sangramento pós-operatório. O batimento cardíaco acelerado com ritmo regular serve como indicador da sobrevida do coração doador implantado.

Camundongos C57BL/6 e BALB/c foram do tipo MHC (H-2b) e MHC (H-2d) nesse modelo, respectivamente 7,8

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Discussão

O modelo de transplante cardíaco em camundongos contribui para a investigação dos mecanismos de rejeição após o transplante cardíaco, contribuindo para o desenvolvimento de abordagens únicas para melhorar a sobrevida em longo prazo de receptores de aloenxerto cardíaco. Entretanto, o transplante cardíaco em camundongos é uma tarefa complexa e desafiadora, exigindo alto nível de técnicas de microcirurgia, principalmente em anastomosesvasculares11,12,13

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (81870304) para Jun Li.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
  5-0 Sutura de monofilamento de poliamidaB.Braun Medical Inc.C3090954
  8-0 Sutura de monofilamento de poliamidaB.Braun Medical Inc.
10-0 Sutura de monofilamento de poliamidaB.Braun Medical Inc.
braçadeira de poliuretano 22 GB.Braun Medical Inc.4251628-02
26 G manguito de poliuretanoSuzhou Linhua Medical Instrument Co., LTDREF383713
Câmara de indução de anestesiaRWD Life Science Co., LTDV100
Braçadeira microvascular atraumáticaBeyotimeFS500
BALB/c e C57BL/6 camundongos (20– 30 g)Centro de Animais Experimentais (Universidade Médica do Exército, Chongqing, China)
BuprenorfinaE.U. Ciências biológicas da vida352004
eletrocoaguladorGuangzhou Runman Medical Instrument Co., LTDZJ1099
GauzeHenan piaoan group Co., LTD10210402
almofada de aquecimentoGuangzhou Dewei Biological Technology Co., LTDDK0032
HeparinaNorth China Pharmaceutical Co., LTD2101131-2
Solução HTKShenzhen Changyi Pharmaceutical Co., LTDYZB / Min8263-2013
Seringa de injeção (10 mL)Shandong weigao group medical polymer Co., LTD20211001
IsofluranoRWD Life Science Co., LTD21070201
Fisiológicosalina Southwest pharmaceutical Co., LTDH50021610
Agulha para couro cabeludoHongyu Medical Group20183150210
ShaverBeyotimeFS600
Máquina de anestesia para pequenos animaisRWD Life Science Co., LTDR500
Microscópio cirúrgicoTiannuoxiang Scientific Instrument Co., Ltd, Pequim, ChinaSZX-6745
CotoneteYubei Medical Materials Co., LTD21080274
C2090880G0090781

Referências

  1. Khush, K. K., et al. The International thoracic organ transplant registry of the international society for heart and lung transplantation: Thirty-sixth adult heart transplantation report - 2019; focus theme: Donor and recipient size match. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 3....

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Reimpressões e permissões

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