Artigo de método

Caracterização ecocardiográfica da estrutura, função e fluxo coronariano do ventrículo esquerdo em camundongos recém-nascidos

DOI:

10.3791/63539

7 de abril de 2022

Neste artigo

Resumo

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O presente protocolo descreve a avaliação ecocardiográfica da morfologia, função e fluxo sanguíneo coronariano do ventrículo esquerdo em camundongos recém-nascidos de 7 dias de idade.

Resumo

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A ecocardiografia é um procedimento não invasivo que permite a avaliação de parâmetros estruturais e funcionais em modelos animais de doença cardiovascular e é utilizada para avaliar o impacto de potenciais tratamentos em estudos pré-clínicos. Estudos ecocardiográficos geralmente são realizados em camundongos adultos jovens (ou seja, 4-6 semanas de idade). A avaliação da função cardiovascular neonatal precoce geralmente não é realizada devido ao pequeno tamanho dos filhotes de camundongos e às dificuldades técnicas associadas. Um dos desafios mais importantes é que o curto comprimento dos membros dos filhotes impede que eles atinjam os eletrodos na plataforma ecocardiográfica. A temperatura corporal é o outro desafio, pois os filhotes são muito suscetíveis a mudanças de temperatura. Portanto, é importante estabelecer um guia prático para a realização de estudos ecocardiográficos em filhotes de camundongos pequenos para ajudar os pesquisadores a detectar alterações patológicas precoces e estudar a progressão da doença cardiovascular ao longo do tempo. O presente trabalho descreve um protocolo para a realização de ecocardiografia em filhotes de camundongos na tenra idade de 7 dias de idade. A caracterização ecocardiográfica da morfologia, função e fluxo coronariano cardíaco em camundongos neonatais também é descrita.

Introdução

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O objetivo geral deste protocolo é examinar a morfologia, a função e o fluxo da artéria coronária cardíaca em filhotes de camundongos neonatais de 7 dias de idade usando ecocardiografia. A lógica por trás do desenvolvimento dessa técnica é determinar alterações precoces no fluxo coronariano e na função cardíaca em modelos de camundongos de doença cardíaca1. A natureza não invasiva da ecocardiografia é vantajosa, pois permite aos pesquisadores avaliar a função cardiovascular em condições fisiológicas e fornece aos pesquisadores uma ferramenta de triagem para o estudo de terapias direcionadas para o tratamento de doenças cardiovasculares

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Protocolo

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Todos os experimentos foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso Animal da Universidade de Illinois em Chicago. Para os experimentos, foram utilizados camundongos FVB/N de 7 dias de idade. O protocolo é dividido em preparação de camundongos, aquisição de imagens ecocardiográficas e cuidados pós-imagem com animais.

1. Preparação do mouse

  1. Obtenha os ratos de 7 dias de idade da gaiola de reprodução.
    NOTA: Nesta idade precoce, é difícil determinar o sexo do animal pelo exame físico.
  2. Coloque o gel de ECG (ver Tabela de Materiais) nas almofadas do eletrodo da plataforma aquecida. Coloque....

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Resultados

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Este estudo utilizou filhotes de camundongos de 7 dias de idade para caracterizar a morfologia cardíaca, a função e o fluxo da artéria coronária. O manuseio do mouse precisa ser feito com cuidado, e a plataforma do mouse deve ser adaptada para o pequeno tamanho dos filhotes, conforme descrito na Figura 1. Uma imagem representativa da visualização PLAX é mostrada na Figura 2A e no Vídeo Suplementar 1. Nessa visão, o modo M foi utilizado para medi.......

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Discussão

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Na era da medicina preventiva, a avaliação precoce das alterações na função cardiovascular é necessária para estabelecer o início da doença e projetar terapias intervencionistas apropriadas. Os ratos estão sendo cada vez mais usados como modelos pré-clínicos em pesquisas cardíacas, e os estudos ecocardiográficos são tipicamente conduzidos com camundongos adultos jovens. No entanto, para estudar o papel das alterações genéticas ou intervenções farmacológicas nos estágios iniciais das doenças cardíacas, a imagem ecocardiog.......

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Divulgações

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Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

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Os autores agradecem a Chad M. Warren, MS (University of Illinois at Chicago), pela edição deste manuscrito. Este trabalho foi apoiado por subsídios NIH/NHLBI K01HL155241 e AHA CDA849387 para PCR.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Agente depiladorNair Removedor
Eletrodo gelParker Laboratories15-60
Ultrassom de alta frequênciaFUJIFILM VisualSonics, Inc.Vevo 2100
IsofluranoMedVetRXISO-250
Transdutor de alta frequência de matriz linearFUJIFILM VisualSonics, Inc.MS550D
Camundongos casal reprodutorCharles River LaboratoriesFVB/NCódigo de cepa 207
Gel de ultrassomParker Laboratories11-08
Vevo Lab SoftwareFUJIFILM VisualSonics, Inc.Verison 5.5.1
de Pêlos

Referências

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  1. Le, V. P., Wagenseil, J. E. Echocardiographic Characterization of Postnatal Development in Mice with Reduced Arterial Elasticity. Cardiovascular Engineering and Technology. 3 (4), 424-438 (2012).
  2. Nagueh, S. F., et al.

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