Artigo de método

A genotipagem rápida de tecido Mouse Usando Extract-N-Amp Tissue Sigma PCR Kit

DOI:

10.3791/636

22 de janeiro de 2008

Neste artigo

Resumo

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A genotipagem completa de uma amostra da cauda do rato, incluindo a digestão do tecido e leitura de PCR, é feito em uma hora e meia utilizando SYBR Sigma Green Extract-N-Amp Tissue PCR kit.

Resumo

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Detecção genômica de DNA via PCR de amplificação e detecção em gel de eletroforese é uma maneira padrão que o genótipo de uma amostra de tecido é determinada. Preparação convencional de tecidos para PCR-DNA pronto muitas vezes levar várias horas ou dias, dependendo da amostra de tecido. O genótipo da amostra pode, assim, ser adiado por vários dias, o que não é uma opção para muitos tipos diferentes de experiências. Aqui demonstramos a genotipagem completa de uma amostra da cauda do rato, incluindo a digestão do tecido e leitura de PCR, em uma hora e meia utilizando SYBR Sigma Green Extract-N-Amp PCR Tissue Kit. Em primeiro lugar, demonstramos a extração de quinze minutos de DNA da amostra de tecido. Então, nós demonstramos o tempo real de leitura fora da amplificação por PCR da amostra, que permite a identificação de uma amostra positiva, uma vez que está sendo ampliado. Juntos, a leitura de extração e em tempo real permitem uma rápida identificação imediata do genótipo de uma variedade diferente de tipos de tecidos através do método confiável de PCR.

Protocolo

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Por favor, clique aqui para ver o protocolo.

Divulgações

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Os autores não têm nada a declarar.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR KitKit de ReagentesSigma-AldrichXNATGInclui: Solução de Extração, Solução de Neutralização B, Solução de Preparo de Tecido, Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

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