Avaliação Ecocardiográfica Abrangente da Função do Ventrículo Direito em Modelo de Hipertensão Arterial Pulmonar em Rato

Resumo

O presente protocolo descreve a caracterização ecocardiográfica da morfologia e função do ventrículo direito em um modelo de hipertensão arterial pulmonar em ratos.

Resumo

A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença progressiva causada pela vasoconstrição e remodelamento das pequenas artérias pulmonares. Esse remodelamento leva ao aumento da resistência vascular pulmonar, piora da função ventricular direita e morte prematura. As terapias atualmente aprovadas para HAP têm como alvo principal as vias vasodilatadoras pulmonares; no entanto, as recentes modalidades terapêuticas emergentes estão focadas em outras novas vias envolvidas na patogênese da doença, incluindo o remodelamento do ventrículo direito (VD). Técnicas de imagem que permitem a avaliação longitudinal de novas terapêuticas são muito úteis para determinar a eficácia de novas drogas em estudos pré-clínicos. A ecocardiografia transtorácica não invasiva continua sendo a abordagem padrão para avaliar a função cardíaca e é amplamente utilizada em modelos de roedores. Entretanto, a avaliação ecocardiográfica do VD pode ser desafiadora devido à sua posição anatômica e estrutura. Além disso, faltam diretrizes padronizadas para ecocardiografia em modelos pré-clínicos de roedores, dificultando a avaliação uniforme da função do VD em estudos em diferentes laboratórios. Em estudos pré-clínicos, o modelo de lesão por monocrotalina (TCM) em ratos é amplamente utilizado para avaliar a eficácia de drogas no tratamento da HAP. Este protocolo descreve a avaliação ecocardiográfica do VD em ratos virgens e ratos com HAP induzida por TCM.

Introdução

A HAP é uma doença progressiva definida como pressão arterial pulmonar média em repouso maior que 20 mmHg¹. As alterações patológicas na HAP incluem remodelamento da artéria pulmonar (AP), vasoconstrição, inflamação e ativação e proliferação de fibroblastos. Essas alterações patológicas levam ao aumento da resistência vascular pulmonar e, consequentemente, ao remodelamento, hipertrofia e falência do ventrículo^direito2. A HAP é uma doença complexa que envolve crosstalk entre várias vias de sinalização. As drogas atualmente aprovadas para o tratamento da HAP têm como alvo principal as vias vasodilatadoras, incluindo a via ....

Protocolo

Todos os experimentos deste protocolo foram realizados seguindo as diretrizes de cuidados com animais da University of Illinois at Chicago, Chicago Institutional Animal Care and Use Committee. Ratos machos da raça Sprague Dawley (SD) pesavam entre 0,200-0,240 kg no momento da injeção de TCM; no entanto, o protocolo descrito neste artigo pode ser utilizado com uma faixa de peso corporal mais ampla. Os animais foram obtidos de fonte comercial (ver Tabela de Materiais).

1. Desenho do estudo

1. Animais
   1. Obter ratos SD machos e deixá-los aclimatar-se por 4-7 dias. O grupo abriga os ratos pelo grupo ....

Resultados

Neste estudo, ratos tratados com TCM foram usados como modelo de HAP. A análise ecocardiográfica foi realizada no 23º dia do estudo, após a administração do TCM, e todas as medidas e cálculos representaram médias de três ciclos consecutivos. Os parâmetros ecocardiográficos obtidos de ratos controle (veículo: água deionizada) e tratados com TCM (60 mg/kg) são mostrados na tabela 1.

Imagens representativas da visão PLAX em ratos controle e tratados com TCM são mostradas na

Discussão

A avaliação ecocardiográfica do VD é uma valiosa ferramenta de descoberta para o rastreamento da eficácia de novos tratamentos em modelos animais de HAP. A caracterização aprofundada da estrutura e função do VD é necessária como novos alvos no tratamento da HAP abordam o remodelamento do VD ^4,14. Este estudo descreve um protocolo detalhado que permite a caracterização bem sucedida da estrutura e função do VD.

A complexa geometria estru.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Injeção de cloreto de sódio a 0,9% USP	Baxter	2B1324
Rolos de algodão trançado	4MD Medical Solutions	RIHD201205
Agente depilante	Wallgreens	Nair Removedor de Pelos
Gel de eletrodo	Parker Laboratories	15-60
Sistema de imagem de ultrassom de alta frequência e estação de imagem	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	Vevo 2100
Isoflurano	MedVet	RXISO-250
Ratos machos sprague Dawley	Charles River Laboratories	CD 001	CD IGS Ratos (Crl:CD(SD))
Monocrotalina (MCT)	Sigma-Aldrich	C2401
Sonda de temperatura retal	Physitemp	Câmaras de indução seladas RET-3
	Scivena Scientific	RES644	Tamanho de 3 L
Transdutor de ultrassom de estado sólido	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	Transdutor Vevo MicroScan MS250S
Paquímetro digital de aço inoxidável Paquímetro	digital VWR	62379-531
Gel de ultrassom	Laboratórios Parker	11-08
Software Vevo Lab	FUJIFILM VisualSonics, Inc.		Verison 5.5.1