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Artigo de método

Um protocolo para a indução de comportamento semelhante ao transtorno de estresse pós-traumático (TEPT) em camundongos

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DOI:

10.3791/63803

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28 de julho de 2022

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Neste artigo

Resumo

Neste estudo, o comportamento semelhante ao transtorno de estresse pós-traumático (TEPT) é induzido em camundongos usando duas sessões de choque elétrico inevitável nos pés. Animais semelhantes ao TEPT e resilientes são identificados usando vários ensaios para comportamentos específicos de TEPT.

Resumo

O transtorno de estresse pós-traumático (TEPT) é uma condição psiquiátrica debilitante que se precipita em ~ 10% dos indivíduos expostos a um evento traumático (TE). Os sintomas incluem pensamentos recorrentes e intrusivos, distúrbios do sono, hipervigilância, sobressalto exagerado e comportamento imprudente ou destrutivo. Dada a natureza complexa e heterogênea da doença, modelos animais para sintomatologia semelhante ao TEPT são de interesse crescente para o campo da pesquisa de TEPT. Como a resiliência à sintomatologia semelhante ao TEPT é um aspecto epidemiológico importante do TEPT, os modelos animais que resolvem animais vulneráveis e resilientes são de particular valor. Devido à natureza complexa do fenótipo de TEPT e às possíveis sobreposições entre o comportamento semelhante ao TEPT e os comportamentos associados a outras psicopatologias induzidas pelo estresse, como ansiedade ou depressão, os modelos animais que utilizam várias leituras para o comportamento semelhante ao TEPT também são de valor crescente. Utilizamos um paradigma desenvolvido por Lebow et al. 2012 para a indução e identificação de sintomatologia semelhante ao TEPT em camundongos. Este paradigma utiliza choque elétrico inevitável nos pés, administrado em duas sessões descontextualizadas ao longo de dois dias consecutivos. Camundongos estressados realizam quatro testes comportamentais - transferência de escuridão / luz, enterro de bolinhas, sobressalto acústico e atividade de gaiola doméstica - para gerar cinco leituras comportamentais de comportamento semelhante ao TEPT: % de avaliação de risco (% RA), % de bolinhas enterradas (% MB), % de inibição de pré-pulso (% PPI), latência para amplitude de pico de sobressalto (LPSA) e % de atividade da fase de luz (% LPA). A sintomatologia semelhante ao TEPT é caracterizada por diminuição do %RA, aumento do %MB, diminuição do %PPI, diminuição do LPSA e aumento do %LPA. Os 20% dos animais que exibem o comportamento mais semelhante ao TEPT em cada teste recebem um certo número de pontos, dependendo do teste, e os animais que marcam pontos suficientes são designados como semelhantes ao TEPT, enquanto os animais que não marcam pontos são designados como resistentes ao TEPT. Este paradigma identifica o comportamento semelhante ao TEPT em ~ 15% dos animais, uma taxa comparável à observada em humanos. Este protocolo representa um paradigma robusto e reprodutível para a indução de comportamento semelhante ao TEPT em camundongos.

Introdução

O transtorno de estresse pós-traumático (TEPT) é uma psicopatologia debilitante que pode precipitar em indivíduos que foram expostos a um evento traumático (TE)1. De acordo com o DSM-V, a exposição ao TE pode assumir muitas formas, incluindo exposição indireta direta ou repetida a uma ameaça real ou percebida de morte, lesão corporal ou violência sexual a si mesmo ou a outrapessoa 2. A sintomatologia do TEPT é caracterizada por pensamentos e lembranças negativas intrusivas, hiperexcitação, hipervigilância, aumento do comportamento de risco e ciclos de sono interrompidos....

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Protocolo

Todos os procedimentos descritos aqui são aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Mayo Clinic (IACUC).

1. Animais e alojamento

  1. Alojar camundongos C57BL / 6J machos de 10 semanas de idade 4 para uma gaiola em condições de alojamento padrão (gaiola de microisolador padrão, temperatura ambiente (RT) de 70 ° F, comida e água ad libitum, ciclo de 12 h / 12 h de luz / escuridão).

2. Indução de TEPT

  1. Sessão de trauma
    1. Prepare o equipamento e a câmara de condicionamento do medo.<....

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Resultados

Esperamos ver animais exibindo comportamento semelhante ao TEPT em cada teste comportamental distribuído uniformemente em todas as coortes. Uma concentração de animais semelhantes ao TEPT em qualquer coorte pode indicar artefatos introduzidos durante a indução de TEPT ou teste comportamental. Os animais que pontuam em cada leitura comportamental são distribuídos igualmente em todas as coortes testadas (Figura 2). 7 dos 48 animais (14,6%) expostos ao paradigma de indução de TEPT marcaram 5 ou.......

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Discussão

O TEPT é uma doença psiquiátrica complexa e heterogênea. Infelizmente, atualmente não existe um modelo animal confiável para o comportamento semelhante ao TEPT, e os paradigmas comportamentais para a indução de comportamento semelhante ao TEPT são os meios mais confiáveis de gerar animais exibindo um fenótipo comportamental semelhante ao TEPT. O paradigma descrito aqui fornece um meio robusto e confiável de precipitar um fenótipo comportamental semelhante ao TEPT devido ao uso de trauma .......

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Divulgações

Nenhum autor tem conflitos a divulgar.

Agradecimentos

Este trabalho foi possível graças à generosidade da Fundação Hayward e da Família Marriot. Também gostaríamos de reconhecer o trabalho árduo e a experiência dos comitês e departamentos de medicina comparativa da IACUC da Tulane University e da Mayo Clinic, bem como do Centro de Pesquisa Comportamental de Roedores da Mayo Clinic.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Ácido acético, glacialSigma AldrichAX0073
Balança de bancadaFisher Scientific01-913-925
Clocklab Data Collection SuiteActimetrics-Homegaiolas de atividades de gaiola
Deciblemeter
Ethovision XT14 SoftwareNoldus-Software
de rastreamento de movimentoÁlcool etílicoSigma Aldrich443611
Caixa Clara/EscuraNoldus-Caixade transferência clara/escura
Lux Meter
Câmera GigE monocromáticaNoldus-Requerhardware de montagem no teto disponível na Noldus
NIR Video Pacote de condicionamento de medo para mouse [Padrão, USB]Med AssociatesMED-VFC2-USB-MEquipamento e câmara de condicionamento do medo. O pacote inclui todo o equipamento necessário para testar 1 animal de cada vez.
Frasco de sprayThermo ScientificBirA500
SR LAB SoftwareSan DiegoInstruments-Startleresponse software
SR LAB Unidade de resposta de sobressaltoSan DiegoInstruments-Unidadede sobressalto acústico
Video Fear Coniditioning "Video Freeze" SoftwareMed AssociatesSOF-843Software de condicionamento de medo
Ruído branco máquinaMed AssociatesENV-230

Referências

  1. Yehuda, R., et al. Post-traumatic stress disorder. Nature Reviews Disease Primers. 1 (1), 15057(2015).
  2. Flory, J. D., Yehuda, R. Comorbidity between post-traumatic stress disorder and major depressive d....

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Reimpressões e permissões

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