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Artigo de método

Preparação padronizada do anel coronário de rato e gravação em tempo real de mudanças dinâmicas de tensão ao longo do diâmetro do vaso

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DOI:

10.3791/64121

16 de junho de 2022

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

O presente protocolo descreve a técnica de miógrafo de fio para medir a reatividade vascular da artéria coronária do rato.

Resumo

Como um evento-chave das doenças do sistema cardiovascular, a doença arterial coronariana (CAD) tem sido amplamente considerada como o principal culpado da aterosclerose, do infarto do miocárdio e da angina pectoris, que ameaçam seriamente a vida e a saúde das pessoas em todo o mundo. No entanto, como registrar as características biomecânicas dinâmicas dos vasos sanguíneos isolados há muito intriga as pessoas. Enquanto isso, o posicionamento preciso e o isolamento das artérias coronárias para medir mudanças in vitro dinâmicas de tensão vascular tornaram-se uma tendência no desenvolvimento de medicamentos CAD. O presente protocolo descreve a identificação macroscópica e a separação microscópica das artérias coronárias de ratos. A função de contração e dilatação do anel da artéria coronária ao longo do diâmetro do vaso foi monitorada utilizando-se o sistema multimógrafo estabelecido. Os protocolos padronizados e programados de medição da tensão do anel coronário, desde a amostragem até a aquisição de dados, melhoram tremendamente a repetibilidade dos dados experimentais, o que garante a autenticidade dos registros de tensão vascular após intervenção fisiológica, patológica e medicamentosa.

Introdução

A doença arterial coronariana (CAD) tem sido amplamente reconhecida e preocupada como uma doença cardiovascular típica e representativa, sendo a principal causa de morte nos países desenvolvidos e em desenvolvimento 1,2. Como uma rota de fornecimento de sangue e oxigênio para a função fisiológica cardíaca normal, o sangue circulante entra e nutre o coração através de duas artérias coronárias principais e uma rede vascular de sangue na superfície do miocárdio 3,4. Depósitos de colesterol e gordura nas artérias coronárias cortam o suprimento sanguíneo do....

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Protocolo

O protocolo animal foi revisado e aprovado pelo Comitê de Gestão da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Chengdu (Record nº 2021-11). Os ratos machos Sprague Dawley (SD) (260-300 g, 8-10 semanas de idade) foram utilizados para o presente estudo. Os ratos eram mantidos em uma câmara animal e eram livres para beber e comer durante o experimento.

1. Preparação da solução

  1. Prepare a solução fisiológica de sal (PSS) dissolvendo 118 mM de NaCl, 4,7 mM de K+, 2,5 mM de CaCl2, 1,2 mM de KH2PO4, 1,2 mM de MgCl2∙6H2O, 25 mM de NaHCO3, 11 ....

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Resultados

Posicionados anatomicamente, as artérias coronárias de ratos distribuídas e escondidas profundamente no tecido miocárdio não foram facilmente reconhecidas. Comparando-se as artérias coronárias de humanos (Figura 1A) e ratos (Figura 1B), a separação rápida e precisa das artérias coronárias de ratos foi conduzida de acordo com o processo de amostragem na Figura 2. Depois de localizar precisamente a aurícula direita, artéria pulmonar e.......

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Discussão

A perturbação da microcirculação coronariana, que envolve uma ampla gama de pacientes com CAD, tem sido gradualmente reconhecida e preocupada com a base para a perfusão adequada do miocárdio. Considerando as sérias complicações de doenças cardíacas coronarianas súbitas e doenças cardiovasculares, a prevenção e o tratamento oportunos de drogas são extremamente importantes para um indivíduo clínico com CAD17. Inevitavelmente, o sigilo da anatomia da artéria coronária e a complexidade de sua estrutur.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pelo projeto key P&D do Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438), da National Natural Science Foundation of China (82104533), da China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273) e do Departamento de Ciência & Tecnologia da Província de Sichuan (2021YJ0175).

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
ApigeninSangon Biotech Co., Ltd., Xangai, China150731
CaCl2Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, ChinaA501330
D-glicoseSangon Biotech Co., Ltd., Xangai, ChinaA610219
HEPESXiya Reagent Co., Ltd., Shandong, ChinaS3872
KClSangon Biotech Co., Ltd., Xangai, ChinaA100395
KH2PO4Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, ChinaA100781
LabChart Professional versão 8.3 ADInstruments, Austrália
MgCl2· 6H2OSangon Biotech Co., Ltd., Xangai, ChinaA100288
Sistema multi-miógrafoMyo Technology, Aarhus, Dinamarca620M
NaClSangon Biotech Co., Ltd., Xangai, ChinaA100241
NaHCO3Sangon Biotech Co., Ltd., Xangai, ChinaA100865
Fios de açoDanish Myo Technology, Aarhus, Dinamarca400447
U46619Sigma, EUAD8174
Danish

Referências

  1. Malakar, A. K., et al. A review on coronary artery disease, its risk factors, and therapeutics. Journal of Cellular Physiology. 234 (10), 16812-16823 (2019).
  2. Murray, C., et al.

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Reimpressões e permissões

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