Artigo de método

Técnica Modificada para Constrição Aórtica Transversa em Camundongos

DOI:

10.3791/64386

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18 de agosto de 2022

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1Division of Cardiology, Department of Internal Medicine, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 2Hubei Key Laboratory of Genetics and Molecular Mechanism of Cardiological Disorders, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

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O presente protocolo descreve uma técnica modificada e simplificada com procedimento minimamente invasivo de constrição transversa da aorta (TAC) utilizando um afastador de fabricação própria. Esse procedimento pode ser realizado sem ventilador ou microscópio e introduz sobrecarga pressórica, eventualmente levando à hipertrofia cardíaca ou insuficiência cardíaca.

Resumo

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A constrição aórtica transversa (TAC) é uma cirurgia frequentemente utilizada em pesquisas sobre insuficiência cardíaca e hipertrofia cardíaca baseada na formação de sobrecarga pressórica em modelos murinos. O principal desafio desse procedimento é visualizar claramente o arco aórtico transverso e bandear com precisão o vaso-alvo. As abordagens clássicas realizam toracotomia parcial para exposição do arco aórtico transverso. No entanto, é um modelo de tórax aberto que causa um trauma cirúrgico bastante grande e requer um ventilador durante a cirurgia. Para evitar traumas desnecessários e simplificar o procedimento operatório, o arco aórtico é abordado pela proporção proximal do esterno, atingindo e ligando o vaso-alvo com um pequeno afastador de fabricação própria que contém uma alça. Este procedimento pode ser realizado sem entrar na cavidade pleura e não precisa de um ventilador ou operação microcirúrgica, o que deixa os ratos com padrões respiratórios fisiológicos, simplifica o procedimento e reduz significativamente o tempo de operação. Devido à abordagem menos invasiva e menor tempo de operação, os camundongos podem sofrer menos reações de estresse e se recuperar rapidamente.

Introdução

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A insuficiência cardíaca é um sintoma clínico complexo que resulta do comprometimento da estrutura e função do enchimento ventricular ou ejeção de sangue1. O estágio da doença é definido principalmente pela classificação de função da New York Heart Association baseada na gravidade dos sintomas e na atividadefísica2. Para aqueles pacientes com fração de ejeção acima de 50%, anormalidades estruturais e/ou funcionais elevaram peptídeos natriuréticos para apoiar o diagnóstico de insuficiência cardíaca com fração de ejeção preservada (ICFEP)2. A cardiopatia isquêmica é uma das principais causa....

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Protocolo

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O protocolo atual é aprovado pelo comitê de ética do Hospital Tongji, Faculdade de Medicina de Tongji, Universidade de Ciência e Tecnologia de Huazhong, Wuhan, China. Este procedimento é realizado em camundongos adultos machos C57/BL6 (>10 semanas de idade). Todos os instrumentais cirúrgicos foram esterilizados em autoclave no pré-operatório.

1. Preparo do instrumental cirúrgico

  1. Prepare uma seringa de 5 mL e aperte a ponta da agulha com um suporte para agulha para embotá-la.
  2. Prepare uma agulha de 27 G e embote-a com um suporte para agulhas. Cortar a ponta da agulha com tesoura oftálmica é uma maneira alt....

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Resultados

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Após cirurgia de TAC com sucesso, a sobrecarga de pressão foi detectada usando um sistema de imagem de ultrassom. Quatro semanas após a cirurgia, os ratos desenvolvem diminuição da função cardíaca. No presente estudo, a eficácia da cirurgia de TAC foi validada por meio da fração de ejeção (FE), fração de encurtamento (EF), massa ventricular esquerda (massa do VE) e diâmetro interno do ventrículo esquerdo (LVID) de camundongos submetidos à cirurgia de TAC após 4 semanas. A FE foi significativamente reduzida em ca.......

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Discussão

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A indução de sobrecarga pressórica sustentada pode gradualmente causar hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca. Esse modelo tem sido utilizado em inúmeros laboratórios ao redor do mundo14,15,16. O protocolo proporcionou um método de TAC aprimorado que não necessita de habilidades microcirúrgicas ou ventilação mecânica.

O passo mais importante nesse protocolo é a passagem da sutura de seda sob o .......

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Divulgações

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Os autores declararam não haver conflitos de interesse.

Agradecimentos

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Este trabalho é financiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (NSFC 81822002). Agradecemos a todos os membros que participaram deste trabalho.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
4-0 sutura não absorvívelJinhuanHM403Usado para suturar a pele
seringa de 5 mLHaifuda Technology Co., Ltd.BD-309628Usado para fazer laço contendo retractor
7-0 sutura não absorvívelJinhuanHM701Usado para ligadura da aorta
Monitor de temperatura animalKaerwenFT3400Usado para monitorar a temperatura corporal
Buprenorfina SigmaB-044Usado para tratamento de dor pós-cirúrgica
Creme depilatório VeetN / AUsado para remover pêlos do corpo da área cirúrgica
Almofada de aquecimentoXiaochuangxinN / AUsado para manter a temperatura corporal
IbuprofenoMCEHY-78131Usado para tratamento pós-cirúrgico da dor
Fio de ferro (0,5 mm)Qing YuanFio de ferro # 26Usado para fazer laço contendo retrator
Pinças microscópicasRWDF12006-10Usado para penetrar e separar o tecido para abrir o espaço de operação
Porta-agulhaRWDF12005-10Usado para beliscar a ponta da agulha de calibre e embotá-la
Pinça oftálmicaRWDF14012-10 Usado para segurar a pele e outros tecidos
Tesoura oftálmicaRWDS11001-08Usado para fazer a incisão sking do rato
Pentobarbital sódicoSigmaP3761Usado para anestesia de camundongos
Esteira de operação estérilHale & hearty211002Usado para colocar o animal durante a cirurgia
Sistema de imagem ultra-sônicaFujifilm visualsonicsvevo1100Usado para medir a velocidade do fluxo sanguíneo, espessura da parede ventricular esquerda e fração de ejeção, https://www.visualsonics.com/product/imaging-systems/vevo-1100

Referências

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  1. Heidenreich, P. A., et al. AHA/ACC/HFSA Guideline for the Management of Heart Failure: A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Joint Committee on Clinical Practice Guidelines. Circulation. 145 (18), 895(2022).
  2. McDonagh, T. A., et al.

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