Laqueadura da Artéria Coronária Esquerda: Um Modelo Murino Cirúrgico de Infarto do Miocárdio

Resumo

Apresenta-se aqui um procedimento cirúrgico para ligadura permanente da artéria coronária esquerda em camundongos. Este modelo pode ser utilizado para investigar a fisiopatologia e a resposta inflamatória associada após o infarto do miocárdio.

Resumo

A doença isquêmica do coração e o subsequente infarto do miocárdio (IM) são uma das principais causas de mortalidade nos Estados Unidos e em todo o mundo. A fim de explorar as alterações fisiopatológicas após o infarto do miocárdio e projetar tratamentos futuros, são necessários modelos de pesquisa de IAM. A ligadura permanente da artéria coronária esquerda (ACL) em camundongos é um modelo popular para investigar a função cardíaca e o remodelamento ventricular pós-IAM. Aqui descrevemos um modelo de IM murino cirúrgico menos invasivo, confiável e reprodutível por ligadura permanente da ACV. Nosso modelo cirúrgico é composto por anestesia geral facilmente reversível, intubação endotraqueal que não requer traqueostomia e toracotomia. A eletrocardiografia e a medição da troponina devem ser realizadas para garantir o IAM. A ecocardiografia no dia 28 após o IM discernirá a função cardíaca e os parâmetros de insuficiência cardíaca. O grau de fibrose cardíaca pode ser avaliado pela coloração tricrômica e ressonância nuclear magnética (RNM) cardíaca. Este modelo de IM é útil para estudar as alterações fisiopatológicas e imunológicas após o IM.

Introdução

A doença cardiovascular é uma grande preocupação de saúde pública que ceifa 17,9 milhões de vidas a cada ano, representando 31% da mortalidade global¹. O tipo de anomalia cardiovascular mais prevalente é a doença coronariana, sendo o infarto do miocárdio (IM) uma das principais manifestações da doença coronariana². O IAM geralmente é causado por oclusão trombótica de uma artéria coronária devido à ruptura de uma placa vulnerável³. A isquemia resultante causa profundas alterações iônicas e metabólicas no miocárdio afetado, bem como uma rápida diminuição da função sistólica. O IAM resulta na morte d....

Protocolo

O protocolo do presente estudo foi revisado e aprovado pelo Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) da Universidade de Pittsburgh. Oito (sham n = 4 e MI n = 4) fêmeas de 1 ano de idade de camundongos C57BL/6J pesando 24-30 g foram utilizados para esses experimentos. Aproximadamente 100% e pelo menos 80% dos camundongos sobreviveram nos primeiros 24 h e 28 dias, respectivamente.

1. Preparação e intubação endotraqueal dos camundongos

1. Pré-aqueça um esterilizador de contas (ver Tabela de Materiais) a 250 °C e coloque instrumentos cirúrgicos autoclavados nele por alguns minutos.
2. A....

Resultados

A Figura 1 demonstra os sinais representativos de ECG e respiração durante a avaliação ecocardiográfica de camundongos sham (Figura 1A) e IM (Figura 1B). A verificação dos sinais ativos de ECG e respiração é importante antes de adquirir os dados ecocardiográficos. A Figura 2 mostra a medida ecocardiográfica dos parâmetros funcionais cardíacos após 28 dias após a ligadura da ACV.

Discussão

O modelo murino de IAM está ganhando popularidade em laboratórios de pesquisa cardiovascular, e este estudo descreve um modelo de IAM reprodutível e clinicamente relevante. Este protocolo melhora o processo de ligadura LCA de várias maneiras. Para começar, evita-se o uso de anestésicos pré-operatórios injetáveis, como xilazina/cetamina ou pentobarbital sódico^14,15. Apenas a anestesia com isoflurano foi utilizada, que ajuda a aumentar as taxas de sobrevivência ani.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Agulha de cateter 22 G	Exel INT	26741	Toracocentese
agulha de cateter 24 G	Exel INT	26746	Intubação endotraqueal
4-0 sutura de nylon	Covetrus	29263	Sutura de músculos e pele
8-0 sutura de nylon	S& T	3192	Ligadura de
vaporizadores anestésicos	Veterinário equipar	VE-6047	Suporte anestésico
Monitor de fisiologia animal Fujifilm		VEVO 3100	Monitor de frequência cardíaca, frequência respiratória e temperatura corporal
Solução de betadine PBS	saúde animal	11205	Antispetic
Buprenorfina	Covetrus	55175	Analgésico
Microscópio de dissecação	OMANO	OM2300S-V7	Binocular
Barbeador elétrico	Wahl	79300-1001M	Gel de eletrodo de barbear
	Parker Laboratories	W60698L	Gel eletricamente condutor
Etanol	Decon Laboratories	22-032-601	desinfetante
	FST	11065-07	Aço inoxidável
Gaze	Curity	CAR-6339-PK	estéril
	Satco	S4998	Cuidados pós-operatórios
Almofada de aquecimento	Kent scientific	Surgi-M	Controle de temperatura
Esterilizador de esferas quentes	Germinador 500	11503	Esterilização de instrumento cirúrgico
Isoflurano	Covetrus	29405	Anestesia
Masson’ s kit de coloração tricrômica	Thermoscientific	87019	Medição de fibrose cardíaca
Micro Agulha Titular	FST	12500-12	Aço inoxidável
Micro tesoura	FST	15000-02	Aço inoxidável
Pomada oftálmica	Dechra	Puralube Vet	Lubrificante ocular estéril
Gel de varredura	Parker Laboratories	Aquasonic 100	Gel de transmissão de ultrassom aquoso
Tesoura	FST	14060-11	de Aço Inoxidável
Pequenos Animais	Modelo Penn-Century	LS-2-M	Iluminando a orofaringe
Ventilador para pequenos animais	Aparelho Harvard	557058	Suporte para ventilador
Luz cirúrgica	Cole parmer	41723	Iluminador Largura (pol): 7
Plataforma de imagem pré-clínica Vevo 3100	Ecocardiografia	Fujifilm	VEVO 3100
Software VevoLAB	Fujifilm	VevoLAB 3.2.6	Análise de dados ecocardiográficos

LAD Pinça Lâmpada de calor Laringoscópio para