O presente protocolo descreve um método simples e eficiente para o transporte de longa distância de ácidos perfluoroalquil em trigo.
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Artigo de método
Investigando o transporte de longa distância de ácidos perfluoroalquil no trigo através de uma técnica de exposição de raiz dividida
Neste artigo
Resumo
Resumo
Grandes quantidades de ácidos perfluoroalquil (PFAAs) foram introduzidas no solo e acumuladas pelas plantas, representando riscos potenciais para a saúde humana. É imperativo investigar o acúmulo e a translocação de PFAAs dentro das plantas. O transporte de longa distância é uma via importante para os PFAAs transferidos das folhas da planta para os tecidos comestíveis através do floema. No entanto, anteriormente era difícil avaliar o potencial de translocação da contaminação orgânica em um período de exposição de curto prazo. O experimento de raiz dividida fornece uma solução para descobrir efetivamente a translocação de longa distância de PFAAs usando um experimento hidropônico, que, neste estudo, foi realizado em dois tubos de centrífuga de 50 mL (A e B), dos quais o tubo de centrífuga A tinha 50 mL de solução nutritiva estéril de Hoagland de um quarto de força, enquanto o tubo de centrífuga B tinha a mesma quantidade de concentração de nutrientes, e os PFAAs alvo (ácido perfluorooctano sulfônico, PFOS e ácido perfluorooctano, PFOA) adicionados a uma determinada concentração. Uma raiz de trigo integral foi separada manualmente em duas partes e inserida cuidadosamente nos tubos A e B. A concentração de PFAAs nas raízes, parte aérea do trigo e soluções nos tubos A e B foi avaliada por LC-MS/MS, respectivamente, após ser cultivada em incubadora por 7 dias e colhida. Os resultados sugeriram que o PFOA e o PFOS experimentam um processo de transporte de longa distância semelhante através do floema da parte aérea até a raiz e poderiam ser liberados no ambiente ambiente. Assim, a técnica de raiz dividida pode ser usada para avaliar o transporte de longa distância de diferentes produtos químicos.
Introdução
Os ácidos perfluoroalquil (PFAAs) são amplamente utilizados em diversos produtos comerciais e industriais devido às suas excelentes propriedades físico-químicas, incluindo atividade superficial e estabilidade térmica e química 1,2,3. O ácido perfluorooctanosulfônico (PFOS) e o ácido perfluorooctano (PFOA) são os dois PFAAs mais importantes utilizados mundialmente 4,5,6, embora esses compostos tenham sido listados na Convenção Internacional de Estocolmo em 2009 e 2019 7,8....
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Protocolo
Sementes de trigo, Triticum aestivum L., foram adquiridas (ver Tabela de Materiais) e utilizadas para o presente estudo.
1. Germinação de plântulas de trigo e cultura hidropônica
- Selecione sementes de trigo de tamanho semelhante e desinfete-as por 15 min com solução de peróxido de hidrogênio a 8% (p/p).
- Lave bem as sementes desinfetadas com água desionizada e, em seguida, coloque-as em papel de filtro úmido no escuro à temperatura ambiente para germinar por 5 dias.
- Selecionar aproximadamente nove plântulas germinadas de tamanho uniforme e transferi-las para copos plást....
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Resultados
O experimento de raiz dividida investigou o transporte de longa distância de PFAAs em trigo. Como mostrado na Figura 2A,C, tanto o PFOA quanto o PFOS poderiam ser absorvidos pela raiz do trigo e transferidos para a parte aérea. PFOS e PFOA não foram detectados na raiz de trigo e solução no tubo A do controle em branco. Verificou-se que PFOS e PFOA foram detectados nas raízes de trigo cultivadas na solução não cravada, com concentração de 0,26 ng/g ± 0,02 ng/g e 0,64 ng/g ± m.......
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Discussão
Para garantir a precisão deste método, deve ser feita uma operação cuidadosa para garantir que a solução cravada no tubo B não contamine a solução sem espinhos no tubo A. A concentração dada de PFAAs alvo no presente estudo foi relativamente maior do que sua concentração no ambiente real, garantindo o monitoramento de PFAAs alvo em trigo e solução não cravada usando LC-MS/MS.
Existem limitações para este método. Como apenas uma plântula de trigo foi utilizada em cada grupo de tratamento e a r.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Agradecemos o apoio financeiro da Fundação de Ciências Naturais da China (NSFC 21737003), do Fundo Científico das Universidades Chinesas (Nº 2452021103) e da Fundação Chinesa de Ciência de Pós-Doutorado (Nº 2021M692651, 2021M702680).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Coluna ACQUITY UPLC BEH C18 | Waters, Milford, MA | Coluna de cromatografia líquida | |
| Cartucho de PEP Cleanert | Bonna- Angel Technologies, China | Coluna de extração em fase sólida | |
| Cartucho de Pesticarb Clearnert | Bonna- Angel Technologies, China | Coluna de extração em fase sólida | |
| LC-MS/MS (Waters Acquity UPLC i-Class Acoplado a Xevo TQ-S) | Waters, Milford, MA | Cromatografia líquida e espectrometria de massa | |
| Liofilizador | Boyikang Instrument Ltd., Pequim, China | FD-1A50 | Amostra liofilizada |
| Masslynx | Waters, Milford, MA | software de análise | |
| de dados Éter metil terc-butílico | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EUA) | uso para extração de compostos-alvo de tecidos vegetais | |
| MPFAC-MXA | Wellington Laboratories (Ontário, Canadá) | PFACMXA0518 | os padrões internos |
| PFAC-MXB | Wellington Laboratories (Ontário, Canadá | )PFACMXB0219 | mistura de padrões de calibração PFAA |
| PFOA | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EUA) | 335-67-1 | a representam PFAAs |
| PFOS | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EUA) | 2795-39-3 | a representam PFAAs |
| Tampão de carbonato de sódio | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EUA) | uso para extrair compostos-alvo de tecidos vegetais | |
| Sulfato de hidrogênio tetrabutilamônio | Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, EUA) | uso para extrair compostos-alvo de tecidos vegetais Sementes | |
| trigo | Academia Chinesa de Ciências Agrícolas (Pequim, China) | Triticum aestivum L. |
Referências
- Lindstrom, A. B., Strynar, M. J., Libelo, E. L. Polyfluorinated compounds: Past, present, and future. Environmental Science & Technology. 45 (19), 7954-7961 (2011).
- Kannan, K. Perfluoroalkyl and polyfluoroalkyl substances: Current and future pe....
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Reimpressões e permissões
