Este estudo descreve uma técnica para estabelecer um modelo de silicose em ratos com inalação de sílica por todo o corpo em uma câmara inalatória. Os ratos com silicose poderiam mimetizar de perto o processo patológico da silicose humana de maneira fácil, econômica e com boa repetibilidade.
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Artigo de método
Estabelecendo um modelo de silicose em ratos via exposição de corpo inteiro à sílica respirável
Neste artigo
Resumo
Resumo
A principal causa de silicose é a inalação de sílica no ambiente ocupacional. Apesar de algumas diferenças anatômicas e fisiológicas, os modelos de roedores continuam sendo uma ferramenta essencial para o estudo da silicose humana. Para a silicose, o processo patológico clássico precisa ser induzível através da inalação de partículas de quartzo recém-geradas, o que significa induzir especificamente doença ocupacional humana. Este estudo descreveu uma técnica para estabelecer e mimetizar efetivamente o processo dinâmico patológico evolutivo da silicose. Além disso, a técnica apresentou boa repetibilidade, sem cirurgia envolvida. O sistema de exposição inalatória foi fabricado, validado e utilizado para estudos toxicológicos sobre inalação de partículas respiráveis. Os componentes críticos foram os seguintes: (1) gerador de pó SiO2 seco a granel ajustado com um controlador de fluxo de ar; (2) 0,3m3 de câmara de exposição inalatória de corpo inteiro acomodando até 3 ratos adultos; (3) um sistema de monitoramento e controle para regular a concentração de oxigênio, temperatura, umidade e pressão em tempo real; e (4) um sistema de barreira e disposição de resíduos para proteger os técnicos de laboratório e o meio ambiente. Em resumo, o presente protocolo relata a inalação por todo o corpo, e a câmara inalatória criou um modelo silicótico de rato confiável, razoável e repetível, com baixa mortalidade, menos lesões e mais proteção.
Introdução
A silicose, causada pela inalação de sílica, é a doença ocupacional mais grave na China, sendo responsável por mais de 80% do total de notificações de doenças ocupacionais a cada ano1. A etiologia da silicose é clara, podendo ser prevenida e controlada, mas não há método de tratamento efetivo disponível2. Muitos fármacos têm se mostrado eficazes em estudos básicos, mas apresentam efeitos clínicos imprecisos 3,4. Portanto, os mecanismos patológicos e fisiológicos da silicose ainda precisam ser explorados.
Muitos es....
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Protocolo
Todos os experimentos com animais foram conduzidos de acordo com o Guia dos Institutos Nacionais de Saúde dos Estados Unidos para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório e aprovados pelo Comitê de Ética da Universidade de Ciência e Tecnologia do Norte da China (código de protocolo LX2019033 e 2019-3-3 de aprovação). Ratos Wistar machos, com 3 semanas de idade, foram utilizados para o presente estudo. Todos os ratos foram mantidos em gaiolas estáticas com aparas de madeira. Os animais foram mantidos em um ciclo claro/escuro de 12 h/12 h e receberam ração e água ad libitum. Experimentos de seguimento foram conduzidos após 1 semana de alimentação adaptativa.
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Resultados
Usando o método proposto, alguns mecanismos potenciais e a patogênese da silicose foram explorados em ratos. O esquema da câmara inalatória é mostrado na Figura 1. A câmara consistia de um gerador de sílica liberado a ar, uma câmara de corpo inteiro e um sistema de disposição de resíduos, conforme descrito anteriormente17. As funções pulmonares, os níveis de fatores inflamatórios no soro e pulmão, a deposição de colágeno e a diferenciação miofibroblástica foram relata.......
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Discussão
Como principal causa de silicose, a sílica desempenha um papel decisivo na moldagem. As partículas de sílica inaladas por pacientes com pneumoconiose são partículas frescas e livres de sílica produzidas por corte mecânico. A sílica pode gerar espécies reativas de oxigênio diretamente na superfície das partículas recém-clivadas ou indiretamente através de seu efeito sobre os macrófagos25. Portanto, a moagem de partículas de sílica é de grande importância. No protocolo proposto, a sílica foi tritura.......
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Divulgações
Os autores declaram a inexistência de conflitos de interesse.
Agradecimentos
Este trabalho foi financiado pela Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (82003406), pela Fundação de Ciências Naturais da Província de Hebei (H2022209073) e pelo Projeto de Ciência e Tecnologia do Departamento de Educação de Hebei (ZD2022127).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Detector de ar (amostrador atmosférico compressivo) | Qingdao Xuyu Environmental Protection Technology Co. LTD | ||
| Mesa | Nenhuma marca específica é recomendada. | ||
| Anticorpo de CD68 | Abcam | ab201340 | |
| DAB | ZSGB-BIO | ZLI-9018 | |
| Secador de sopro de ar de aquecimento elétrico | Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., LTD | ||
| Balança eletrônica | OHRUS | ||
| Máquina de incorporação | leica | ||
| Dispositivo de descarga de gases de escape | ESPERANÇA Indústria e Comércio Co. Ltd. | ||
| Sistemas geradores | ESPERANÇA Indústria e Comércio Co. Ltd. | ||
| Luvas (luvas finas de laboratório) | A hematoxilina médica | ||
| e eosina | BaSO Diagnostics Inc. | BA4025 | |
| HOPE MED 8050 aparelho de controle de exposição | HOPE Industry and Trade Co., Ltd. | ||
| Câmara de inalação | ESPERANÇA Indústria e Comércio Co. Ltd. | ||
| Seringa | Nenhuma marca específica é recomendada. | ||
| Microscópio de luz | olympus | ||
| Objeto slide | shitai | ||
| PV-6000 (HRP-conjugado cabra anti-rato IgG polímero) | Pequim Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co., Ltd | s5631 | |
| Dióxido de silício | Sigma-Aldrich | ||
| Máquina de corte | leica | RM2255 | |
| Dispositivo de tratamento de gases residuais | HOPE Industry and Trade Co., Ltd. | ||
| de produtos de plástico cooperativo | caixa úmida | ||
| Xylol | Tianjin Yongda Chemical Reagent Co., LTD |
Referências
- Li, J., et al. The burden of pneumoconiosis in China: an analysis from the Global Burden of Disease Study. BMC Public Health. 22 (1), 1114(2019).
- The Lancet Respiratory Medicine. The world is failing on silicosis. The Lancet. Respiratory Medicine
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Reimpressões e permissões
