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Artigo de método

Ressecção de linfonodo vascular poplíteo no membro posterior de coelho para indução secundária de linfedema

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DOI:

10.3791/64576

30 de novembro de 2022

Neste artigo

Resumo

Aqui, a indução cirúrgica de linfedema adquirido estável no membro posterior do coelho é descrita. Este animal experimental pode ser usado para investigar mais detalhadamente o efeito do tratamento do linfedema por técnicas microcirúrgicas.

Resumo

O linfedema é uma condição comum frequentemente associada ao câncer e seu tratamento, que leva a danos ao sistema linfático, e os tratamentos atuais são principalmente paliativos e não curativos. Sua alta incidência entre pacientes oncológicos indica a necessidade de estudar tanto a função linfática normal quanto a disfunção patológica. Para reproduzir o linfedema crônico, é necessário escolher um animal experimental adequado. As tentativas de estabelecer modelos animais são limitadas pela capacidade regenerativa do sistema linfático. Dentre os potenciais candidatos, o membro posterior do coelho é de fácil manuseio e extrapola para o cenário clínico humano, tornando-o vantajoso. Além disso, o tamanho desta espécie permite uma melhor seleção de vasos linfáticos para ressecção de linfonodos vascularizados.

Neste estudo, apresentamos um procedimento de ressecção de linfonodos vasculares no membro posterior de coelhos para indução de linfedema secundário. Os animais anestesiados foram submetidos à medida circunferencial, infiltração de azul patente V e linfografia com indocianina verde (ICG-L) usando fluorescência de infravermelho próximo em tempo real, uma técnica que permite a identificação de linfonodos poplíteos e canais linfáticos únicos. O acesso às estruturas identificadas é obtido pela excisão do nó poplíteo e pela ligação dos linfáticos aferentes medial e lateral. Cuidados especiais devem ser tomados para garantir que qualquer vaso linfático que se una ao sistema linfático femoral dentro da coxa sem entrar no nódulo poplíteo possa ser identificado e ligado.

A avaliação pós-operatória foi realizada aos 3, 6 e 12 meses após a indução, utilizando-se medidas circunferenciais do membro posterior e do ICG-L. Conforme demonstrado durante o acompanhamento, os animais desenvolveram refluxo dérmico que foi mantido até o12º mês, tornando este animal experimental útil para novas avaliações de longo prazo no manejo do linfedema. Em conclusão, a abordagem descrita aqui é viável e reprodutível. Além disso, durante a janela de tempo apresentada, pode ser representativo do linfedema humano, fornecendo assim uma ferramenta de pesquisa útil.

Introdução

O linfedema é uma condição crônica que merece atenção especial, devido à sua incidência mundial, falta de tratamento curativo e padronizado e sério impacto na qualidade de vida dos pacientes 1,2.

Nos países desenvolvidos, o linfedema é principalmente adquirido e secundário ao câncer de mama, devido à alta prevalência dessa malignidade; A incidência cumulativa de linfedema relacionado ao câncer de mama 10 anos após a cirurgia pode chegar a 41,1%3. No entanto, doenças como melanoma, cânceres ginecológicos, tumores geniturinário....

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Protocolo

Todos os procedimentos foram aprovados pelo comitê de ética do Centro de Cirurgia Minimamente Invasiva Jesús Usón e pelas diretrizes de bem-estar do governo regional, que se baseiam na legislação europeia.

1. Preparação pré-cirúrgica e cirúrgica

  1. Abrigam nove coelhas brancas da Nova Zelândia pesando 4-4,5 kg e com 4 meses de idade em gaiolas separadas mantidas a uma temperatura de 22-25 °C, com livre acesso a comida e água. Certifique-se de que as gaiolas contenham uma bandeja de polissulfona com uma área de superfície de 3 m2 e uma altura de 40 cm, bem como uma cama c....

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Resultados

Nove coelhos foram submetidos à indução de linfedema neste estudo, no entanto, três coelhos morreram durante o pós-operatório imediato e não puderam ser avaliados. Os dados do estudo foram obtidos aos 3, 6 e 12 meses de pós-operatório por três pesquisadores independentes. Medidas circunferenciais dos membros posteriores e ICG-L foram realizadas sob anestesia geral para avaliar a função do sistema linfático e o refluxo dérmico.

Os dados obtidos pelo ICG-L aos 3 meses de pós-operatório mostraram.......

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Discussão

A ressecção do PLN em um animal experimental é um procedimento relativamente novo que pode induzir linfedema secundário nos membros para avaliação e estudo. Após a ressecção linfonodal, há um período de alteração da funcionalidade do sistema linfático, acúmulo linfático e alterações histológicas dos vasos linfáticos que aparecem dilatados. Quando esse acúmulo de linfa atinge níveis adequados, o refluxo dérmico característico do linfedema, semelhante ao observado em humanos, pode ser obse.......

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Divulgações

Os autores não têm conflitos de interesse a divulgar.

Agradecimentos

Este projeto de pesquisa foi realizado no Centro de Cirurgia Minimamente Invasiva Jesús Usón (CCMIJU), que faz parte do ICTS Nanbiosis. O estudo foi realizado com o auxílio das seguintes unidades de Nanbiosis: U21, centro cirúrgico experimental, e U22, alojamento de animais. Este trabalho foi apoiado pelo Hospital de la Santa Creu i Sant Pau. Este trabalho foi parcialmente financiado pela Junta de Extremadura, o Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (Grant Number GR21201). O financiador desempenhou um papel no desenho do estudo, coleta de dados, análise, decisão de publicar e preparação do manuscrito. Agradecimentos especiais são ....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Bleu Patente V sodique (Guerbet)Guerbet. Villepinte, França2,5 g/100 mL
de buprenorfina (Bupaq)Richter Pharma. Wels, Áustria0820645AA3 mg / 10 mL
FluobeamFluoptics. Grenoble, FrançaImagem de fluorescência
IBM SPSS softwareIBMversão 21.0
Verde de indocianina (Verdye, Diagnostic Green GmbH)Diagnostic Green GmbH. Aschheim-Dornach, Alemanha5 mg/mL
Ketorolaco  (Normon) Normon, S.A. Madrid, EspanhaT01H30 mg/mL
Microsoft ExcelMicrosoftversão 16.66.1
Midazolam (Normon) Normon, S.A. Madrid, EspanhaT35M15 mg/3 mL
, módulo de fluorescênciaCarl Zeiss Meditec AG. Goeschwitzer Strasse 51-52. Jena, Alemanha302581-9245-000
Cloreto de potássio (Braun)B.Braun. Barcelona, Espanha1926201020 mmol/10 mL
de Propofol (Propomitor, Orion Pharma) Orion Pharma. Spoo, Finlândia20R039B200 mg/20 mL
RÜ Tubos endotraqueais SCHTeleflex Medical IDA Business and Technology Park. Athione, Irlanda.12CE 12Tamanho Tubo 4.0 I.D. mm
Sevoflurano (SevoFlo, Zoetis)Zoetis Bélgica. Luvain-la-Neuve, Bélgica60935591000 mg/g (250 mL)
Tramadol (Normon)Normon, S.A. Madrid, EspanhaT08U100 mg/2 mL
Microscópio Pentero 800

Referências

  1. Taylor, G. W. Lymphoedema. Postgraduate Medical Journal. 35 (399), 2-7 (1959).
  2. Weissleder, H., Schuchhardt, C. Lymphedema Diagnosis and Therapy. 2nd ed. , Kagerer Kommunikation. (1997).
  3. Pereira, A. C. P. R., Koifman, R. J., Bergmann, A.

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Modelo de Membro Posterior de CoelhoLinfonodo PoplíteoLigadura de Vasos LinfáticosLinfografia com Verde de IndocianinaFluorescência no Infravermelho PróximoAzul Patente VModelo de Linfedema CrônicoFluxo Retrógrado Dérmico

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